«РАЗРАБОТКА БИОМАТЕРИАЛОВ ДЛЯ РЕКОНСТРУКТИВНОЙ ХИРУРГИИ НА ОСНОВЕ КСЕНОПЕРИКАРДИАЛЬНОЙ ТКАНИ ...»
-- [ Страница 2 ] --
Исходя из этих данных, была составлена матрица параметров протокола обработки биоматериала (Рис. 10). Путем комбинации параметров по матрице были разработаны протоколы обработки ксеноперикарда для каждого вида биоматериала.
конц-я Е (ферментативная обработка) экспозиция в гипертонических солевых растворах концентрация сшивающего агента (стабилизация) Рисунок 10 – Матрица параметров протокола обработки биоткани.
В эксперименте участвовало 3 группы образцов.
Протокол №1. Образцы ксеноперикардиальной ткани обрабатывали следующим образом. После первичной обработки образцы подвергали экспозиции в растворе хлористого натрия в течение 1 ч (концентрация соли в гипертонической среде – 2%), затем промывали проточной водой и проводили ферментацию с концентрацией протеолитического фермента 10 ПЕ в боратном буферном растворе (рН=8.2) в умеренно щелочной среде при температуре 37ОС в течение 4 часов для разрушения клеточных элементов и сохранения белкового каркаса. После нейтрализации фермента пикельным раствором (9,5% хлористого натрия + 4 % раствор уксусной кислоты) последний нейтрализовали 0,1 М раствором гидрокарбоната натрия в течение 20 минут.
Продукты протеолиза удаляли в дистиллированной воде в течение 1 ч с последующей гипертонической экстракцией в растворах с нарастающей концентрацией. Соли удаляли проточным промыванием в течение 10 минут. Далее обработанный перикард помещали на специальные приспособления в ненапряженном состоянии для придания соответствующей формы и проводили структурную стабилизацию в 0,25% растворе глутарового альдегида на боратном буфере (в кислой среде). Затем материал с заданной формой снимали с приспособлений и подвергали химической стерилизации. Образцы этой группы обработаны в соответствии со способом подготовки биоткани для ксенопротезирования, описанном в патенте РФ № 2197818. Эта группа образцов служила контрольной группой сравнения в экспериментальном исследовании. Шифр образцов «Контроль».
Протокол №2. Образцы ксеноперикардиальной ткани обрабатывали следующим образом. После первичной обработки образцы подвергали экспозиции в растворе хлористого натрия в течение 1 ч (концентрация соли в гипертонической среде – 2%), затем, в отличие от контроля, не промывая проточной водой погружали ткань в 4% раствор хлористого натрия для создания пониженного осмотического давления и помещали образцы в ультразвуковую ванну в отличие от контроля на определенное время. Подобная обработка ткани позволяет уменьшить количество используемого фермента на последующей стадии не затрагивая целостности коллагеновых и эластических волокон. Затем проводили ферментацию с пониженной в отличие от
[ 
«