На правах рукописи

СЕРБИИ

Александр Владимирович

ПУТИ СОЗДАНИЯ

БИОСЕЛЕКТИВНЫХ ПОЛИМЕРНЫХ СИСТЕМ

КОМБИНИРОВАННОГО

ПРОТИВОВИРУСНОГО ДЕЙСТВИЯ

02.00.06- Высокомолекулярные соединения

Автореферат диссертации на соискание ученой степени доктора химических наук

- 2004 Москва www.sp-department.ru

Работа выполнена в ордена Трудового Красного Знамени Институте нефтехимического синтеза имени А.В. Топчиева Российской академии наук и Исследовательском центре биомодуляторов и лекарственных соединений Научно-инновационного фонда Здоровья доктор химических наук, профессор

Официальные оппоненты:

Фролов Вадим Михайлович доктор химических наук, профессор Штильмаи Михаил Исаакович доктор химических наук, профессор Заиков Геннадий Ефремович

Ведущая организация: Институт высокомолекулярных соединений Российской академии наук

Защита диссертации состоится января г. в часов на заседании «27»» 2005 диссертационного совета Д в Институте нефтехимического 002.234. синтеза им. А.В.Топчиева РАН по адресу: ГСП-1, Москва, 119991, Ленинский проспект, конференц-зал.

29,

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ИнстИ1уrа нефтехимического синтеза им. А.В. ТопчиеваРАН Автореферат разослан »декабря г.

« 27

Ученый секретарь диссертационного совета, ;;:jV j

1.

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы Рост и интенсификация жизнедеятельности человека в экологической системе планеты порождает встречную эволюцию вирусов, специализиро­ сегодня известно не менее вирусных генотипов, способных поражать клетки человека, приводя к различным заболеваниям, включая энцефалиты, гепатит, раковые оnухоли, СПИД. Природвый иммунитет проигрывает вирусам в эволюционном соревновании, а значит, возникает актуальная необходимость искусственного вмешательства, которое, на наш взгляд, неразрывно связано с целенаправленным развитием соответствуютих разделов науки о полимерах медицинского назначения.

Анализ известных научных данных показывает, что молекулярный фундамент вирусных частиц, их паразитической интеграции в клетки и естественных иммунных реакций составляют биополимерные формы ВМС.

В то же время традиционные подходы к созданию противовирусных препаратов основаны на химии низкомолекулярных соединений (НМС).

Это несоответствие закономерно становится объективным препятствием полноценному развитию данной области медицинской практики.

Физико-химическая основа недостаточной эффективности НМС ограниченность потенциала молекулярного воздействия «малых» молекул генетические паразиты, способны к быстрым мутационным изменениям выходят из-под контроля таких препаратов. Поэтому применение НМС­ невосприимчивых к традиционным лекарственным средствам [21,27,30,40].

На практике цена вопроса только по линии ВИЧ/СПИД за четверть века его истории достигает сотни миллионов человеческих жизней.

Все более очевидной становится актуальность и востребованность разработки нового поколения высокоэффективных противовирусных препа­ ратов с целенаправленным использованием преимуществ полимерного разнообразия вирусных патогенов возможность блокады не одного вида развития принципов и методов молекулярного конструирования полимерwww.sp-department.ru ных систем комбинированного противовирусного действия, которые и являются объектом исследования настоящей работы.

Не менее актуальным требованием к полимерам медицинского назначе­ ния является их токсическая безопасность, макромолекулярные методы оптимизации которой также вошли в систему исследовательских приорите­ тов диссертационной работы. Усnешность результатов оценивалась коли­ чественным критерием - индексом селективности (IS):

где: Ее концентрация вещества, обесnечивающая целевой nротивовирус­ НЪIЙ эффект, Те КОНцентрация nроявЛеНИЯ ТОКСИЧНОСТИ. В ИТОГе nланиро­ ВалОСЬ создание не nросто активных, но и биоселеюивных полимерных систем с IS : : _ 30, - nерспективных для nродвижения в клиническую nрактику.

Цель и задачи работы.

Целью диссертационной работы является развитие молекулярио­ функциональной стратегии, форм и методов синтеза нового nоколения искусственных nолимерных систем, обладающих расширенным диаnазоном комбинированного воздействия на вирус-сnецифические мишени nри минимальном уровне токсичности.

В задачи исследования входило:

1. Изучение макромолекулярной организации вирусов человека (в первую очередь ВИЧ) на уровне nриродных вме в целях разработки рабочих структурно-функциональных моделей для создания искусственных вме-систем адекватной nротивовирусной защиты.

Синтез и селекция nолимерных матриц, обладающих собственным nотенциалом противовирусной защиты и оптимизация их параметров;

Проектирование и синтез биоселективных полимерных систем ком­ бинированного противовирусного действия, сочетающих активность полимерных матриц с вирус-ингибирующими функциями нме-фармако­ форов (PF) различной химической природы, строения и специфичности.

кооперации химических носителей вирус-ингибирующих функций, разработка критериев оптимизации целевых свойств и создание опытных образцов, перспективных для продвижения в клиническую nрактику.

Научная новизна В отличие от традиционных сфер nрименения полимеров в качестве деnо- или транспортных форм доставки известных лекарственных соедине­ ний, либо для реализации частных аспектов nротивовирусной активности (наnример, полимер-адъювантной вакцинации), в данной работе обоснова­ ны и впервые эксnериментально nродемонстрированы возможности созда­ ния принциnиально нового nоколения искусственных nолимерных систем, обладающих комnлексом комбинированного биологического действия, *SAR- соотношение «структура- активносты>. как объект научного анализа биоселективно направленного на подавление патогенных макромолекуляр­ ных процессов вирусного инфицирования клеток Впервые предложена макромолекулярная стратегия, и разработаны конкретные формы и методы целенаправленного синтеза многофункциона­ льных ВМС-систем, в которых преимущества полиэлектролитного состоя­ ния вещества (как активного фактора стимулящии иммунитета) соединены с биоселективной активностью специализированных химических структур фармакофоров обретающих мощный потенциал адресного вирус­ блокирующего действия в условиях полимерной кооперации.

В качестве основы для создания таких систем теоретически обоснова­ но применение полиэлектролитов анионного типа и выполнены исследова­ ния по двум направлениям: целенаправленный синтез и структурно­ функциональная оптимизация полимерных аналогов янтарной кислоты, синтез и целевая селекция карбокси- и сульфокислотных модификаций природных полисахаридов. Впервые исследован ряд особенностей участия малеинового ангидрида в реакциях радикальной полимеризации, передачи цепи, диен-диенофильного присоединения, обрыва цепи на аддукты Дильса-Альдера, а также частные аспекты регулирования структуры и ММ полианионных продуктов. Разработаны эффективные и нетоксичные ВМС, способные к индукции интерферона, активации антителообразования и клеточных факторов иммунитета, в сочетании с функциями подавления адсорбции вирусов на поверхности клеток. Определены структурные и молекулярномассовые параметры для отбора «базовых» полианионных матриц оптимальных платформ макромолекулярного синтеза более (AS) сложных целевых систем комбинированного типа.

В отличие от доминирующих молекулярных подходов к созданию противовирусных ингибиторов внутриклеточного действия, для которых неизбежен эффект «терапевтического запаздывания» (попытка остановить инфекцию внутри уже инфицированной клетки), избрана молекулярная стратегия «опережающего действия». В качестве ключевого приоритета выбраны мембранотропного типа (би-, три- и поли-циклические карка­ сные углеводороды, их моноциклические и ациклические аналоги, холесте­ рин). Разработаны и реализованы такие формы и методы химической коопе­ русные функции компонент, но и синергически их усиливают, позволяя блокировать инфекционный процесс уже на самых ранних этапах проник­ новения вирусов в клетки на клеточной мембране.

ВМС-конъюrаты с базовым препаратом терапии СПИДа азидотимидином (AZT) вия и экспериментально подтверждены преимущества ВМС мембранотроп­ ного типа для предотвращения формирования резистентньiХ вирусных мутан­ тов, подавления известных АZТ-невосприимчивых штаммов ВИЧ-1 и изоля­ тов вируса гриппа, устойчивых к ремантадину (мембранотропному НМС).

Впервые осуществлено конструирование и синтез опытных образцов полимер-асооциированных имитаторов естественных БИЧ-специфичных рецепторов клеток человека. В отличие от природных рецеnторов, новые БМС-продукты растворимы в водной фазе, не фиксированы на клеточной мембране, и поэтому более мобильны в конкурентном связывании вирусов, предотвращая их проникновение в клетки.

Изучены закономерности «структура противовирусная активность В результате создано новое поколение биоселективных полимерных систем с уникально широким комплексом химически регулируемых проти­ тор-имитационного вмешательства в жизненный цикл вирусов.

Авторские nриоритеты на научные разработки и новые синтетические продукты химии БМС (более оригинальных соединений) закреплены в патентах и пионерских публикациях (см. список публикаций).

Практическая значимость Получены новые фундаментальные знания о возможностях и зако­ номерностях формирования биологически активных функций средствами химии БМС, имеющие важное значение для практического конструиро­ вания противовирусных агентов комбинированного действия с акцентиро­ ванной блокадой самых ранних этапов инфекционного цикла.

Полученные знания реализованы в конкретных полимерных струк­ турах с регулируемым комплексом противовирусного действия, достовер­ но подтвержденного в экспериментах на широком спектре вирусных ин­ фекций: гриппа (БГР), парагриппа (БПГ), герпеса (БГП), иммуно-дефици­ та человека (БИЧ-1, БИЧ-2), бешенства (ББ), везикулярного стоматита (ББСТ), восточного энцефшюмиелита лошадей (ББЭЛ), крымской гемор­ включая возбудителей особо опасных заболеваний, неподдающихся лече­ нию известными клиническими препаратами. В частности, разработаны ингибиторы БИЧ инфекционного возбудителя СПИД. Высокая эффек­ личных изолятов вируса, выделенных из крови БИЧ-инфицированных пациентов, лабораторных штаммов и AZT -резистентных мутантов, под­ тверждена в ведущих вирусологических центрах России [НИИ вирусо­ подтвержденный факт, что комбинированный характер противовирусной активности созданных ВМС-субстанций, на несколько порядков снижает вероятность формирования лекарственпо резистентных вирусных мутан­ Решающую роль для практического продвижения выполненных разработок в медицинскую практику играет и фактор токсической безопасности ВМС, реализованный наравне с противовирусными функциями на основе объек­ В итоге получена новая генерация противовирусных соединений с весьма высокими показателями от 50 до 10 000 и более.

В настоящее время порядка 30 разработанных субстанций отобраны в качестве активной основы для создания эффективных средств лечебно­ nрофилактической защиты от СПИДа на базе НИИ вирусологии РАМН (Москва) и ГНЦ ВБ «Вектор» (Кольцово) nри поддержке МНТЦ (Москва) и лекарственных форм успещно nрощел nредварительные этапы доклини­ ческих испытаний и запланирован к клинической апробации.

Основные положения, выносимые на защиту Макромолекулярное конструирование ВМС, обладающих комп­ лексом свойств комбинированной противовирусной защиты nри минима­ льной токсичности (на уровне биоселективности IS?::. 30).

сахаридов и синтетических nолимерных аналогов янтарной кислоты в зависимости от их структуры и макромолекулярных nараметров.

сополимеризации МА (включая nроцессы, осложненные реакцией Дильса­ Альдера) в целях регулирования ММ nродуктов.

алкоголиза, аминолиза и гидролиза полиангидридов в целях управляемой модификации PF -реагентами различной структуры и термолабильности.

Разработка рациональных схем синтеза и синтез бифункциона­ nотенциально противовирусного действия в ряду:

- трициклических каркасных nроизводных адамантана;

- синтетических аналогов бициклических каркасных терпеноидов;

- nолициклических каркасных соединений более сложного строения;

- полициклических некаркасных структур на основе холестерина;

- моноциклических некаркасных углеводородов;

- ациклических лиnофильных углеводородов;

- nроизводных азидотимидина.

имитаторов естественных клеточных рецепторов ВИЧ, в целях защиты рецепторной специфичности.

выщеперечисленных типов ВМС.

Апробация работы.

обсуждены на всесоюзных, российских и международных конференциях (конгрессах и симпозиумах), в частности: "Синтетические полимеры мед.

и практического применения каркасных соединений" (Волгоград, 1992);

Каргинеких конференциях по полимерам (Москва, 1997, 2004 ), Российских национальных конгрессах "Человек и лекарство" (Москва, 1996, 1997, 1998, 2000); по СПИДу, раку и родственным проблемам (Санкт-Петербург, 1992, 1993, 1995, 1997, 1999, 2000, 2002); «Фармация в XXI веке: инновации и традицию> (Санкт-Петербург, 1999); «Новые информационные технологии в медицине и экологии» (Гурзуф, Украина, 2000; Высокие Татры, Словакия, 2002, 2003; Хургада, Египет 2004); «Новые технологии в медицине и биологии в третьем тысячелетии» (Феодосия, Украина, 2002, Судак, Украина 2004); по полимерам для передовых технологий (Пиза, Италия, 1995; Лейпциг, Германия 1997); по фарм. технологии (Париж, Франция, 1998); по СПИДу (Женева, Швейцария, 1999); по экспериментальным исследованиям СПИДа (Тампере, Финляндия, 1999); по БИЧ-инфекции (Тулон, Франция, 1999); Международного общества микробиологов (Иерусалим, Израиль, 1996; Сидней, Австралия 1999); Европейского общества микробиологов (Любляна, Словения, 2003); Международного общества противовирусных исследований (Венеция, Италия, 1993;

Иерусалим, Израиль, 1999; Балтимор, США, 2000; Прага, Чехословакия, 2002; Саванна, США, 2003; Тусон, США 2004); Микробициды (Лондон, Великобритания) и др. (более 80 сообщений).

Структура и объем диссертации.

состоит из введения, глав, заключения и списка цитируемой литературы наименований), иллюстрирована 52 рисунками, содержит 37 таблиц.

( В главе 1 представлен обзор современных данных о фундаментальной роли природных ВМС во взаимоотношениях вирусов, клеток и иммунитета с акцентом на конкретные механизмы БИЧ-инфекции, а также о задейство­ ванных ресурсах химии НМС и ВМС для создания искусственных проти­ вовирусных средств. Дан анализ проблемы, обоснованы цели и задачи исследования. В главе теоретически обоснована стратегия целевого макромолекулярного синтеза. В главе рассмотрен синтез, SАR-анализ и методы и продукты синтеза фармакофор-модифицированных полианион­ ных систем. Глава посвящена исследованию закономерностей и направ­ лений оптимизации «структура активность биоселективность» би-потен­ создания и исследования мультикомбинированных интра- и интерполимер­ ных систем противовирусной защиты и опытных лекарственных форм.

II. ОСНОВНОЕ СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

II.1. Молекулярио-функциональная стратегия создания Стратегические приоритеты и молекулярные инструменты 11.1.1.

традиционной терапии вирусных заболеваний (узкий диапазон, низкая эффективность, иенадежиость защиты; формирование резистентных ви­ Таблица\. Стратегические приоритеты и молекулярные инструменты Адекватность молекулярного уровня средств те­ 1. Смешение базового раnевтической защиты уровню структурной орга­ на нескольких уровнях молекулярных механизмов защитного действия в целях: расширения диапазо­ эффективности и предотвращения формирования противовирусными Прогнозируемые результаты:

перенос акцента из области внутриклеточной упреждающей защиты клеток от проникновения рионов на выходе из уже инфицированных клеток: в) лиrандам рецепторов, перспектива противовирусных агентов лярной кооперации. Кроме того, пределы вариации анионной активности были расширены за счет частичной или полной модификации кислотных групп в солевые композиции с противононами различной природы, либо сложноэфирные производные, -AnZ = где:

-An =-СО, -OS0 2 ; Х = NH 2, NH(CH 2COOCH 3 ) 2, OR; у+ =Н+, Li\ К+ Na+, NH 4 +, Са++, Sr++, Ва ++, Cu ++, Zn ++, Ni++, Pt++(NH 3 ) 2, Pd++(NH 3 ) 2, Fe +++,...

Предполагалось, что такая модуляция может иметь существенное значе­ ние для предотвращения токсичности (кислотного шока), регулирования растворимости и оптимизации целевых противовирусных функций.

Исследование биофункциональных свойств анионных ВМС.

11.2.5.

Задачи данного раздела работы заключались в выявлении законо­ мерностей «Структура- Активность» (SАR-анализ) исследуемых ВМС в «базовых» полимерных матриц наиболее перспективных для создания действия. Экспериментальное изучение биологической активности ВМС научно-медицинского профиля НИИ вирусологии им. Д.И. Ивановского, НИИ гриппа, РАМН, ЦОЛИУВ, ГНЦ ВБ «Вектор», НИФ Здоровья и др.

(акад. РАМН Ф.И. Ершов, проф. Н.Н. Носик и сотр., проф. И.Ф. Баринс­ кий и сотр., nроф. Букринекая А.Г. и сотр., акад. РАМН Кашкии К.Г. и сотр., д.м.н. Сухин Г.М. и сотр, к.м.н. И.В. Тимофеев, Н.Г. Перминова и 1) По типу анионогенных групп «мягкие» карбоксикислотные произ­ водные более безопасны, чем полимерные аналоги серной кислоты сульфокислотные. В ряду солевых модификаций полимерных карбоксп­ латов установлена следующая зависимость:

(в скобках, представлены дозы, мг!кг. соответствующих солей MKDM3• вызы­ вающие 50% токсический эффект на мышах при внутрибрюшинном примене нии) (25%) физиологических средах. Отметим также низкую токсичность амидно­ 2) По структуре.моно.мерного звена.

(в скобках приведены те.же показатели, что и в предыдущем примере) жесткости и гидрофобности полимерной цепи.

По.молекулярной.массе. Поскольку применеиные нами методы регу­ лирования ММ синтетических полианионов были направлены на пони­ жение ММ < 30-50·1 03, то с учетом риска увеличения проникающей спо­ собности через биозащитные барьеры, наиболее актуальной представля­ лась экспериментальная оценка безопасности чрезмерного снижения сте­ пени полимеризации. Как выяснилось, переход от ВМС к олигомерам и НМС может быть небезопасным. Так, в ряду модификаций МКDМ 3°:

ВМС продукты (Mn ::::_ 10'103) наименее токсичны (LD50 ::::_2000 мкг/кг, внутрибрюшинно, мыши), олигомеры (Mn :: 3·1 0 3) имеют пониженный уровень переносимых доз (LD 50 ::::_ 1600 мкг/кг), а НМС аналог- ADA край­ (LD50 ММ> 10"10\ токсикологически наиболее оптимальны. В целом, исследуемые полианионы, особенно МКDМэ, МКDМ 4, MКDMsb, МКDМ 3 и МКDМ1 0, можно классифицировать, как весьма нетоксичные­ на 1-2 порядка менее токсичные, чем типичные противовирусные НМС.

11.2.5-2. И.м.муно.модулирующая противовирусная активность.

Интерферон индуцирующая активность.

выявлена в ряду синтетических полимерных аналогов янтарной кислоты МКDМ Зависимость эффекта от структурных параметров представ­ остальные DM (S 10) < DМэ (S 40) < DМз (S 320) < DMsb (S 640) подтверждается теоретический прогноз (раздел 11.1.2-1) о потенциальной активности в ряду полимерных соединений с чередованием анионных и фура н содержащих структур: активность МКDМз и МКDМ 5ь начинает проявляться уже при Mn- 3·10 3, но более выражено- при Mn;:: 8-1410 3.

2) Зависимость от.модуляции кислотных групп, на примере MKDM 3°:

эффект последовательно снижается по мере снижения электролитичес­ кой диссоциации и полностью подавляется амидированием. Применеине двухвалентных противононов может приводить к утрате растворимости (модификация более модификация кислотных групп в соли Na+ или к+ оказывается достаточной для получения максимального эффекта.

Активация гуморального фактора иммунитета.

Тестирование проводили по реакции образования антител (метод Ерне и Нордина) и реакции иммунного розеткаобразования в ответ на Выявлена следующая зависимость уровня образования антител 1) от структуры -DM-:

от природы противоиона в ряду солевых модификаций МКDМ 3 :

(в скобках указан уровень гуморального иммунного ответа в % по отношению к контролю на 5-7 день после инъекции антигена и внутрибрюшинного введения стимуляции иммунного ответа, при этом оптимальными являются также «фурановые» формы МКDМsЬи МКDМз в виде полунатриевых солей.

Активация клеточного фактора иммунитета.

компетентных клеток, включая нейтрофилов (макрофагов) и натуральных киллеров. Так, совместная инкубация макрофагов с МКDМ в концентра­ ности по продуцированию бактерицидных форм кислорода в следующей зависимости от структуры -DM- ( процент активации):

Как и в предыдущих случаях, фуран-содержащие модификации МКDМ стимуляции.

вантная активность в ряду позволила прогнозировать опреде­ ленный потенциал противовирусной защиты. Действительно, наиболее активные модификации МКDМз и MКDMsb проявили достоверно высокие уровни профилактической и лечебно-профилактической защиты животных от летальных доз опасных нейровирусных инфекций ВВЭЛ, Максимальный защитный эффект достигалея в режиме сочетанно­ го применения: полианион вакцина. А поскольку вакцины представля­ ют собой инфекционно неактивные формы вирусов, а последние с точки зрения ВМС - биополимерные комплексы, то, создавая бинарные компо­ MKDM + Вакцина, мы по существу систем комбинированного противовирусного действия интерполимерного типа: вирусный антиген синтетический полимерный иммуноадъювант.

Причем, в дополнение к стратегии искусственных полимерных вакцин [Кабанов В.А., Петров Р.В., Хаитов Р.М. и др.] в нашем случае роль синте­ тических полимеров не ограничивается только стимуляцией антителообра­ зования, а включает дополнительные ресурсы параллельных факторов иммунной защиты по линии индукции интерферона и фагоцитирующих клеток (см. выше). Более того, целевая селекция анионогенных форм полиэлектролитов, в соответствии с теоретическим прогнозом (раздел 11.1.2-2), открывает возможности не только иммуноопосредованной проти­ вовирусной защиты, но и прямой электростатической дезактивации или дезориентации непосредственно вирусных частиц.

11.2.5-3. Прямая противовирусная активность (in vitro) активности вирусов, проведена нами в ряду синтетических и природных полианионов имеющих дифференцированный набор анионогенных групп изолированные вдоль цепи карбоксильные группы, например, карбокси­ метилированные полисахариды, совершенно неактивны. Синтетические умеренную активность. Высокую активность показали лишь наиболее Рост анионогенной и ВИЧ-ингибирующей активности AS""Ad-E2o An=CO AS"""Ad-02, An2 =SO, An=CO AScьsAd-F2A An=-/SO,H Анализ пространствеиной и структурно-функциональной организа­ критическую роль в качестве молекулярных посредников БИЧ-инфици­ природных белков (рис. 7) воспроизведены в виде синтетических олигопеп­ тидов методами твердофазного пептидного синтеза и в соответствии с раздене является жизненно необходимым для человека, ответственен за Внешняя поверхность клетки Клеточная мембрана Внутренняя поверхность мембраны разделом модифицированы лизином, который имеет естествен­

N G F D W QА

Полианионная природа базовых полимеров соответствует функциям имитации отрицательного заряда, повышенная плотность которого является клеточной мембраны, и которая используется вирусом для электроста­ 3).

эфw~ктивности синтетических полианионов, параллельна с олигопептидом Р5 имеюшим мошные центры отрицательного заряда (сульфокислотно рецептора), синтезирован также его аналог Р5 без сульфокислотных групп общеприняты« оdнобуквенным кодом Предполагалось, что исключение из PSNs анионной функции сульфатиро­ в результате ее химического связывания с пеnтидом в единую макромоле­ кулярную систему. Этот подход снимал также проблему нестабильности сульфокситирозиновых реагентов, существенно усложнявших пептидный сннтез. В таблице 4 представлены структуры некоторых монопептидных и комбинированных конъюrатов на основе базовой матрицы МКDМ 5 ь AS-P5N Ad *1/о хюшческои природе 11 методу пол11Мерного связывания nenmudы Р6. Р7 и Р8 аналогичны, 11.3.4.

систем и оценка целевой результативности стратегии синтеза проведены на экспериментальной базе научных центров, представленных в разделе Расширенные исследования выполнены с участием проф.

Букринекой А.Г. и сотр., д.м.н. Карамова Э.В. и сотр. (НИИ вирусологии), д.м.н. Козелецкой К.Н. (НИИ Гриппа), к.м.н. Перминовой Н.Г. и сотр.

(ГНЦ ВБ «Вектор»), а также проф. М. Стевенсона и сотр., Д. Ричмана и сотр., Л. Марголиса и сотр. (США), проф. Э. Де Клерка и сотр. (Бельгия) и др.. Автор диссертации лично участвовал в планировании, координации и анализе биологических исследований, а также непосредственно выполнял токсикологические эксперименты, не требующие специального допуска.

Токсикологическая безопасиость 11.3.4-1.

систем позволяют констатировать позитивный эффект химической коопе­ рации исходных с «базовыми» полимерными матрицами. В частности, полианионная реконструкция содержащих препаратов позволила в 16, l S. 30. 36, 45, 50, 51], Одновременно решена проблема совместимости-транспортабельно­ сти в водных физиологических средах. Исключение составляют лишь логической безопасности AS.PF по параметру PF/An:

Установлено, что при прочих равных условиях, предпочтительнее гибкоцепные полианионы с высокой плотностью AnOH/Na COOH/Naгрупп, и с преобладанием гидрофильных структур в полимерном остове.

Активность полианионов в составе АS.РF-систем 1\.3.4-2.

Химическая модификация «базовых» полианионов в АS.РF-системы неизбежно ставит вопрос: при каких условиях и в какой мере будут сохра­ няться ценные биологические свойства полианионов? На примере систем вать анионогенные группы, показано, что в пределах степеней модифика­ ции, определяемых критерием АS.РF-системы вполне сохраняют:

tmдукцию интерферона (AS.Ad-De 1, титр интерферона 320 ед/мл), активацию антителообразования (AS.Ad-Dt\ до 330 %) и им.муноwww.sp-department.ru адъювантную защиту от ueiipoвupycoв, рис. Таким образом, критерий вполне соответствует и условшо воспроизводства полезных противо­ (27) вирусных функций, присущих базовым полианионным матрицам 50% нейровирусов nреnаратами принципиально различных по типу противовирусного действия:

1) Ad - противогриппозный PF типично мембранотропного действия и 2) AZT- анти-ВИЧ PF типично немембранотропного (внутриклеточного) действия.

не препятствуют проявлению иммуноадъювантной активности исходных полианионов. Однако, обратная зависимость влияния полианиона на активность против ВИЧ не только не усилилась, но даже не успела Вирусы гриппа (ВГП). штаммы:

Вирусыпарагриппа Многоуровневая (комбинированная) защита от ВИЧ 11.3.4-5.

Высокая анти-ВИЧ активность зарегистрирована в ряду мембранотро­ 48,50,58].

твердился факт ВИЧ-ингибирующего действия препаратов, с самого нача­ полагалось, наиболее активными ингибиторами адсорбции оказались силь­ лах не препятствует электростатической блокаде адсорбции, а напротив, может сnособствовать ее усилению. Так, изначально малоактив­ субклеточным фракциям nоказал, что в nрисутствии nреnаратов серии AS.Ad/Nb мембране без дальнейшего nроникновения в цитоnлазму и трансnорта Более того, nолучены эксnериментальные данные о возможности тераnевтического вмешательства nротив ВИЧ-1 не только на входе в клетку, но и на выходе из уже инфицированной клетки. Так, образцы