«МОРФОЛОГИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ КЛЕЩЕЙ PSOROPTES CUNICULI И ЭФФЕКТИВНОСТЬ АКАРИЦИДА ФЕНОКСИФЕН ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОМ ПСОРОПТОЗЕ КРОЛИКОВ ...»

Наиболее простыми и удовлетворительными являются способы, в которых в качестве консервантов применяется холод в сочетании с атмосферой, насыщенной парами 50 - 60 этилового спирта. Температура в пределах 0-+4С, которую можно создать в бытовом холодильнике, а воздушно-водно-спиртовая атмосфера позволит сохранить клещей от микробного разложения и высыхания в течение 15 – 20 суток. Более высокие концентрации спирта в атмосфере приводят к сильной деформации клещей при хранении, т.к. спирт способствует испарению воды из тела клещей.

Консервируют клещей следующим образом. Очищенных от артефактов клещей наклеивают на подложки. Затем берут чистую пробирку Флоринского и на е дно кладут рыхлый кусочек ваты, смоченный 50 этиловым спиртом.

Подложки с клещами переносят в пробирку и герметически закрывают резиновой пробкой. После этого пробирку помещают в холодильник под морозильную камеру, но не в не и хранят там до исследования в СЭМ. Нельзя помещать пробирки с клещами в морозильную камеру, т.к. вода в клетках кристаллизуется и кристаллы льда разрывают ткани клещей. После размораживания такие клещи теряют свою форму.

Перед микроскопированием подложки с клещами извлекают из пробирок, выдерживают 5 – 7 минут при комнатной температуре для подсыхания. За это время их осматривают под МБС-1, поправляют или приклеивают упавших клещей, а затем переносят в камеру для напыления золотом и после этого исследуют в СЭМ.

ИССЛЕДОВАНИЕ МОРФОЛОГИИ И БИОЛОГИИ КЛЕЩЕЙ:

Род Psoroptes Gervais открыт в начале 19 века в 1841г., вид P.cuniculi в 1859г. (Delafond).

Несмотря на всестороннюю и основательную изученность псороптидных клещей, знаний по данному вопросу недостаточно, кроме того, существует ряд противоречий. Поэтому существует необходимость в подробном рассмотрении данного аспекта.

ИССЛЕДОВАНИЕ ГНАТОСОМЫ КЛЕЩЕЙ:

Гнатосома псороптид изучена недостаточно. Имеются общие описания гнатосомы и отдельных е структур в работах Schilston A.W. (1916), И.Н. Богданова (1936), Э. Беккер, Г. Уартон (1952), В.Б. Дубинина (1954), Meleney W.P. (1967).

Их гнатосома состоит из трхчленистых педипальп, двухчленистых хелицер и гипостома.

По данным Е.В. Дубининой (1987), гнатосома на 2/3 прикрыта с дорзальной стороны эпистомом, ротовой аппарат колюще-сосущего типа. Но, не описано механизма действия ротового аппарата и строение апикальной части гнатосомы с ротовым аппаратом, непосредственно воспринимающих жидкую пищу.

возможность рассмотреть все структуры, их естественное расположение и форму.

В общем плане гнатосома клещей длинная конусовидная (рис 3), снование расположено на туловище терминально в небольшом округлом углублении (камерстоме, по М.А. Палимпсестову, 1948) конического выступа проподосомы и слегка, но не на 2/3, как пишет Е.В. Дубинина (1987), прикрыта его валикообразными краями (рис 4). Характер сочленения гнатосомы с проподосомой обеспечивает подвижность гнатосомы в продольной, вертикальной и горизонтальной плоскостях.

Гнатосома – это агрегат ротовых органов, приспособленный для добывания жидкой пищи. Она сформирована двумя парами ротовых конечностей: хелицерами и педипальпами. Другие структурные единицы преобразованные части ротовых сегментов. В формировании гнатосомы участвует головной щит, смещенный на дорзальную сторону конического выступа проподосомы (рис 5).

Хелицеры: располагаются на дорзальной стороне гнатосомы, по бокам от сагиттальной линии состоят из двух члеников (пальцев) верхнего, или основного и нижнего. Верхниий членик втянут в стилет, его базальная расширенная часть имеет внутри полость, сообщающуюся широким эллипсоидным отверстием с полостью идиосомы. Апикальный конец основного членика закруглн и нест незначительным углом друг к другу.

Рис. 3. Гнатосома сверху: сщ – спинной щиток; п – педипальпы (ув. Х 500).

Рис. 4. Гнатосома с дорсальной стороны: п – педипальпы, х – хелицеры; сщ – спинной щиток (ув. Х 250).

Рис.5. Проподосома с дорсальной стороны (ув. Х 150).

Рис. 6. Апикальная часть хелицер: зубовидные выросты.

Третий зубовидный вырост расположен с латеральной стороны членика, несколько ниже верхних.

Второй членик хелицер значительно меньше основного, он также втянут в стилет и расширенным основанием подвижно соединен с основным члеником. К базальной части второго членика прикрепляются мышцы леваторы и депрессоры, при сокращении которых свободный конец членика оттягивается вниз или прижимается к основному. Соприкасающиеся поверхности клешни гладкие. Вершина второго членика нест всего два зуба. Один из них когтевидный и направлен вперд, второй вырост более широкий и направлен вершиной вниз. Строение хелицер и их движение говорят о том, что верхний членик приспособлен только для резания кожи зубовидными выростами.

Нижний же членик приспособлен ещ и для прокалывания кожи животного.

Правая и левая хелицеры соприкасаются медиальными сторонами, но с дорзальной стороны их основания слегка расходятся, образуя при этом воронкообразное углубление. Латеральные и медиальные поверхности хелицер полностью прикрываются педипальпами. Между основанием хелицер и проподосомой расположена поперечная хитинизированная пластина.

Соединение этой пластины и хелицер обеспечивает мягкая эластичная мембрана, которая при помощи камерстомальной складки мягко соединена с проподосомой и жестко с медиальными сторонами первых члеников педипальп. Пластина является своего рода опорой.

Педипальпы: располагаются по бокам гнатосомы. Литературные свидетельствуют о том, что пальпы у псороптид имеют три членика.

Однако, трхчленистость выражена лишь с дорзальной и латеральной сторон гнатосомы, в то время, как с вентральной поверхности различимо сочленение двух телоподитов - второго и третьего. Но, притом, что они срослись с гипостомом, сохраняются четко выраженные сочленения. Базальные (первые) членики педипальп сильно гипертрофированы, широкие; по всему периметру сочлененные со вторым телоподитом и хелицеральной пластиной. На дорзальной поверхности первый членик пальп имеет сужение с одной короткой игольчатой щетинкой. Вентральные края члеников заворачиваются вниз к сагиттальной линии, где они и срастаются. Благодаря чему, на вентральной стороне гнатосомы образуется мощная хитинизированная гнатококса. Комплекс гнатококса и педипальп, срастаясь, формирует широкое сдавленное в дорзовентральном направлении полукольцо, которое с боков ограничено сочленением вторых телоподитов, вентрально – двумя щетинками гнатококсы, а сзади – камеростомом.

Второй членик педипальп короче первого и оснащн двумя щетинками:

дорзальной и вентрально-боковой. Третий членик пальп самый короткий и находится под углом 45 к оси двух предыдущих. На апикальной части трех члеников, терминально расположены в два ряда шесть мягких языковидных выростов. Выросты верхнего ряда крупные, широкие, их вершины могут быть раздвоены (рис 7). В нерабочем состоянии они прижаты к апикальной части членика и напоминают валики или круглые бугорки, а в рабочем – они наполняются гемолимфой и могут совершать движения вверх и в стороны. С терминальной стороны гнатосомы видны полулунные образования, идущие вниз от внутреннего края апикальной части третьего членика (рис 8). Эти образования срастаютя нижним краем с гипостомальной пластиной, а внутренним – с латеральными губами, окаймляя ротовую щель с боков и сзади.

Ротовое отверстие заключено между латеральными губами и имеет треугольную форму в открытом состоянии. Полулунные органы с боков гладкие, а снизу имеют ряд параллельных валикообразных перепонок (рис. 9).

Членики педипальп в поперечном сечении имеют клиновидно-овальную форму. Вентрально они соприкасаются с гипостомом и образуют с ним замкнутый желоб, по которому течт жидкая лимфа при питании.

Рис. 7. Ротовой аппарат: я – языковидные выросты; пло-полулунные органы; лг – латеральные губы (ув. Х 3000).

Рис. 8. Ротовой аппарат телеонимфы: я – языковидные выросты; пло полулунные органы, лг – латеральные губы (ув. Х 1500).

Рис. 9. Ротовой аппарат личинки: лг – латеральные губы; я - языковидные выросты; пло - полулунные органы (ув. Х 1000).

Гипостом: расположен на гнатосоме вентрально и имеет вид мягкой эластичной трапециевидной пластинки, ограниченной сзади двумя щетинками гнатококсы и с боков – педипальпами. Гипостомальная пластинка боками срастается с пальпами посредством интигумента, а сзади незаметно с гнатококсой. Спереди пластина срастается с полулунными органами и латеральными губами, окружающими ротовую щель.

При питании клещей жидкой лимфой происходит прокалывание эпидермиса кожи животного когтевидным выростом нижнего членика, а затем разрезание ранки зубовидными выростами вдоль. Как только из ранки начнт вытекать лимфа, клещ охватывает полулунными органами раневое отверстие и при помощи языковидных выростов пальп загоняет лимфу в открытое ротовое отверстие.

Ранее (до работ В.И. Ильященко), в литературе по псороптоидным клещам не упоминалось о полулунных органах, латеральных губах и языковидных выростах. Так, А.П. Гончаров (1960) в работе по P.cuniculi описал остроконечные вырезки, покрытые перепончатой мембраной. Скорей всего он имел в виду структуры, описанные В.И. Ильященко (1992), т.к. языковидные выросты и полулунные органы на плоских препаратах в световых микроскопах имеют перепончатое строение.

И.А. Акимов (1977) и Johnston (1965) отводили полулунным органам только механическую роль (препятствуют растеканию лимфы), а языковидным выростам – механическую и осязательную функции.

Латеральные губы и перитроид не описывались ранее, т.к. авторы исследовали плоские раздавленные препараты, заключнные в водную среду или жидкость Фора-Берлезе. Но эти препараты не дают точного представления о структуре апикальной части гнатосомы.

В.И. Ильященко (1992) установил, что на вентральной стороне гнатосомы имеются только две щетинки, а на гипостомальной пластине они вообще отсутствуют.

В то время, как А.П. Гончаров (1960) и М.А. Палимпсестов (1948) утверждали, что на гипостоме вентрально располагаются три щетинки, а на пластине (губе) их две.

На втором членике педипальп у клещей всех возрастных фаз отмечено наличие двух хет: вентрально-боковой и дорзальной.

Учитывая данные по строению гипостомы клещей, можно увидеть, что в процессе эволюции их ротовой аппарат усовершенствовался:

хитинизированные 2-члениковые хелицеры;

- хелицеры более вытянуты и снабжены зубовидными выростами;

- сильное развитие мышц хелицер и как следствие их сокращение помогает разрезанию эпидермиса кожи животного.

- появление на апикальной части гипостом полулунных органов и языковидных выростов, способствующих добыванию и приму жидкой пищи из тканей животного.

Хелицеры псороптидных клещей режуще-колющего типа.

ИССЛЕДОВАНИЕ ИДИОСОМЫ

Туловище клещей овальное (кроме самок протонимф) уплощенное в дорзо-вентральном направлении.

У самок протонимф боковые стороны за второй парой конечностей имеют округлые выросты – плечевые выступы, которые придают им грушевидную форму (рис 10). Плечевые выступы наиболее выражены у протнимф P. cuniculi.

У половозрелых самок и самцов, а также у личинок, за второй парой конечностей заметна кольцевая поперечная борозда. Кроме того, у половозрелых самцов и самок на спинной стороне заметны ещ две продольные борозды Sобразной формы, проходящие по обе стороны от средней линии туловища (рис 11, 12, 13).

Рис. 10. Протонимфа женская с дорсальной стороны.

Рис. 11. P. cuniculi с дорсальной стороны: л – лопости; s – s-образная борозда; Сб – сеюгальная борозда (ув. х 50).

Рис. 12. Дорсальная сторона самки: сб – сеюгальная борозда; щетинки – sce-, sci (ув. х 50).

Рис. 13. Латеральная сторона самки: s – продольная s-образная борозда; h, sh щетинки (увю х 50).

В передней части туловища расположен спинной (проподосомальный) щиток (СЩ) кеглевидной формы (рис 14) с гладкой поверхностью. У взрослых самцов есть ещ и опистосомальный щиток шестиугольной формы, темнокоричневого цвета.

расположено анальное отверстие в виде продольной щели с крупными полулунными створками анального клапана. Такое расположение и форму анального отверстия имеют личинки, нимфы и взрослые самки. У самцов анальное отверстие расположено на вентральной стороне идиосомы, на уровне тазиков ног третьей и четвртой пары и входит в состав анально-полового комплекса (рис 15). У самок прото- и телеонимф на заднем крае опистосомы, почти тарминально, располагаются два копулятивных выступа (бугра), цилиндрической формы (рис 16). Бугры широко расставлены, расстояние между ними приблизительно равно высоте бугра.

На вентральной стороне идиосомы мужских и женских протонимф, по бокам от средней линии, немного выше уровня эпимеров ног третьей пары, видны два небольших отверстия и сбоку от них по одной короткой щетинке (рис 17) У телеонимф таких отверстий четыре (может быть пять) – по два с каждой стороны от медиальной линии, а щетинок три пары. Отверстия представляют собой рудименты половых присосок, рядом с ними генитальные щетинки (рис 18).

По мнению Oudemans A. (1926), Grandjean M.F. (1939), Л.Г. Ситникова (1978), половые, или генитальные присоски имеются у многих групп Sarcoptiformes, но по данным М.А. Палимпсестова, В.Б. Дубинина и Е.В.

Дубининой подобных структур у клещей семейства Psoroptidae не отмечается.

У взрослых самцов на заднем крае дорзальной стороны туловища есть два крупных плоских треугольных выроста, по их краю располагается пять волосовидных щетинок. Две центральные – толстые, длинные, а три боковые – короткие. Выросты идиосомы – это опистосомальные лопасти, имеющиеся Рис. 14. Проподосома с дорсальной стороны (ув. х 80).

Рис. 15. Клещ с вентральной стороны. АПК – анально-половой комплекс (ув. х 50).

Рис. 16. Опистосома телеонимфы снизу: кб – копулятивный бугор; ао – анальное отверстие; 4-ая пара ног (ув. х 50).

Рис. 17. Половые присоски и генитальные щетинки (ув. х 1500).

Рис. 18. Половые присоски (пп) и генитальные щетинки (g1) (ув. х 1500).

Рис. 19. Задняя сторона идиосомы: Л – лопасти; КП – копулятивные присоски (ув. х 50).

у всех половозрелых самцов клещей семейства Psoroptidae. Под ними, терминально расположены две крупные копулятивные цилиндрические присоски (рис. 19), способные выдвигаться из туловища и прижиматься к нему.

В стенке верхней части присоски имеется кольцевая мышца. При образовании копулятивной пары самец захватывает присосками копулятивн6ые бугры женской нимфы, кольцевая мышца присоски сжимается и нимфа фиксируется в нужном положении.

У взорослых самок на одной из створок анального клапана, в его верхней части, располагается копулятивный сосок конусовидной формы с копулятивным отверстием на вершине (рис. 20). После осеменения копулятивное отверстие закрывается пробкой секрета. Расположение копулятивного соска на створке анального клапана может быть различным, он может быть либо на левой, либо на правой створке (рис 21), об этом же свидетельствуют исследования В.И.

Ильященко.

расположено впереди анального (Е.В. Дубинина, 1987 и др.).

Вентрально на идиосоме взрослой самки располагается яйцевыводное отверстие, находящееся на уровне свободных эпимеров второй пары конечностей. В закрытом состоянии это отверстие имеет форму щели.

В работе Е.В. Дубининой (1987) отмечено, что яйцевыводное отверстие помещается между эпимеров ног первой и второй пары и имеет вид арки, его клапаны сильно склеротизированы.

Однако, по данным В.И. Ильященко (1992) – яйцевыводное отверстие располагается на конце короткой эластичной яйцевыводной трубки, которая при прохождении яйца выворачивается из яйцевыводной щели наружу и вперд, а после откладывания яйца снова втягивается внутрь.

У взрослых самцов на вентральной стороне идиосомы, на уровне эпимеров ног третьей и четвртой, в округлом углублении расположен анально-половой конус, который в спокойном состоянии вврнут внутрь идиосомы и прикрывается сверху склеротизированными пластинками Рис. 20. Копулятивный сосок на левой створке анального клапана (ув. х 300).

Рис. 21. Копулятивный сосок (КС) на правой стороне анального клапана (ув. х 250).

(рис 22), которые находятся в толще стенок в основании анально-полового конуса. Стенки анально-полового конуса вне пластин мягкие, эластичные и конус легко выворачивается наружу и втягивается внутрь. На вершине конуса открывается анальное отверстие, а на задней стенке конуса два отверстия семявыводного канала. При копуляции, скорее всего, одно из этих отверстий совмещается с копулятивным соском и отверстием самки. Но, т.к. ранее уже было отмечено, что у самок копулятивный сосок может быть как на левой, так и на правой створке анального клапана, становится ясна причина двух семявыводных отверстий на анально-половом конусе самца.

По боковой стороне анально-полового конуса самца располагаются две пары рудиментарных половых присосок в виде небольших круглых отверстий.

Но при исследовании клещей в световых микроскопах семявыводные отверстия и присоски у самцов не видны, и сообщение В.И. Ильященко (1984) об этих структурах является приоритетным.

Трахеи, стигмы, глаза у псороптидных клещей отсутствуют. Поверхность кутикулы, вне склеротизированных щитков, имеет параллельные складки, напоминающие рисунок пальцев рук человека. Дорзальная и вентральная поверхности идиосомы имеют редкие волосовидные щетинки (рис 23). По краю дорзальной стороны располагаются щетинки бокового ряда (L2 и Q5) и по обе стороны от сагиттальной линии щетинки внутреннего спинного ряда (d2 и d5).

На боковых сторонах туловища располагаются щетинки L1 – наружные плечевые (сразу за второй парой конечностей) и щетинки h и sh – впереди конечностей третьей пары (рис 24). На вентральной стороне туловища псороптид все щетинки короткие, волосовидные. На коксальных полях конечностей первой пары располагаются щетинки cx1, а на коксальных полях конечностей третьей пары – щетинки сх3 (рис 25). Кроме коксальных щетинок, на вентральной стороне имеются генитальные щетинки, а также анальные.

Рис. 22. Анальные области самца и протонимфы (ув. х 250).

Рис. 23. Анальное отверстие и щетинки (ув. х 300).

Рис. 24. Хризалидная личинка: L1 – наружные плечевые щетинки и H – впереди конечностей 3-ей пары (ув. х 80).

Рис. 25. Клещ с вентральной стороны со щетинками (ув. х 50).

ИССЛЕДОВАНИЕ КОНЕЧНОСТЕЙ

Конечности псороптид состоят из одного неподвижного (тазик) и пяти подвижных (вертлуг, бедро, колено, голень, лапка) члеников. Личинки шестиногие, нимфы и имаго восьминогие. Передние две пары конечностей развиты значительно сильнее задних. Лапки конечностей имеют волосовидные щетинки, соленидии (костыли по М.А. Палимпсестову, 1948) и на некоторых лапках есть амбулакры или претарзусы, состоящие из тюльпановидных присосок и длинного трехчленистого стебелька. Расположение амбулакров помогает в определении возраста клещей. Свободные концы лапок первой и второй пары конечностей имеют когтевидную форму (рис 26).

В различных литературных источниках и научных публикациях по псороптидным клещам даны различные сведения о количестве и расположении претарзусов. В.И. Ильященко, исследуя клещей в СЭМ установил, что у P.cuniculi первая и вторая пара конечностей имеют амбулакры (претарзусы), состоящие из мембранной тюльпановидной присоски и трехсегментного стебелька (рис 27), последний отходит от основания когтевтдного выроста лапки. Сегменты стебелька соединяются кольцевидным сочленением (рис 28).

Первый сегмент стебелька длинный четырхгранный. Внутри всего стебелька проходит полый канал, через который в присоску попадает жидкость, и присоска функционирует, как гидравлический орган. При нагнетании жидкости присоска расправляется, а е центральная часть становится воронкообразной и под ней создатся вакуум. При оттоке жидкости стенки присоски спадаются, и она принимает булавовидную форму, вакуум исчезает (рис 29). На третьей паре конечностей амбулакры имеются только у взрослых самцов (рис 30). У личинок, нимф и взрослых самок лапки третьей пары конечностей без амбулакров и заканчиваются двумя длинными толстыми щетинками (рис 31). На четвртой паре конечностей протонимф, мужских телеонимф и самок амбулакры с Рис. 26. 1-2 пары конечностей (ув. х 150).

Рис. 27. Лапки ног 1 пары: а – амбулакр; кг – когтевой вырост лапки; соленидии (ув. х 1000).

Рис. 28. Сочленение стебелька и присоски амбулакра (ув. х 3500).

Рис. 29. 1-ая пара ног; - соленидии голени; - соленидии лапки (ув. х 500) Рис. 30. Лапка 3-ей пары ног: - соленидий лапки; а – амбулакр; кг – когтевой вырост (ув. х 500).

Рис. 31. Щетинки 3-ей пары и амбулакр 4-ой пары конечностей протонимфы (ув.

х 200).

длинным трхчленистым стебельком (рис 32), такие же, как и на лапках ног первой и второй пары. У самок телеонимф четвртая пара конечностей без амбулакров и заканчивается двумя длинными толстыми щетинами (рис 33).

У самцов клещей лапки четвртой пары конечностей имеют по два маленьких амбулакра, стебельки которых короткие двухчленистые. Одни амбулакры расположены на конце лапки, другие несколько ниже. Причм, вершина лапки не когтевидно заострена, как на первой и второй парах конечностей, а закранчивается тупым выростом (рис 34).

Таким образом, по результатам электронной микроскопии установлено, что у клещей рода Psoroptes длинностебельковые амбулакры на лапках ног первой и второй пары конечностей имеются у всех возрастных фаз. У женских и мужских протонимф, взрослых самок и мужских телеонимф такие амбулакры есть на четвртой паре конечностей. У женских телеонимф лапки третьей и второй пар конечностей без амбулакров. У самцов длинностебельчатые амбулакры имеются на лапках первой, второй, третьей пары и по два короткостебельчатых амбулакра на лапках четвртой пары конечностей (В.И.

Ильященко, 1982).

Помимо исследования претарзусов изучался состав и расположение щетинок на конечностях клещей, в частности соленидиях. Е.В. Дубинина (1987) в характеристике клещей надсемейства Psoroptidae пишет, что соленидий у большинства семейств занимают базальное положение на лапке. М.А.

Палимпсестов (1946) отмечал в числе специфических щетинок псороптидных клещей «якоревидные костыли» на лапках первой и второй пары конечностей.

Т.В. Соколова, Р.Ф. Федоровская, А.Б. Ланге (1989) в морфологической характеристике клещей указывают, что лапки передних конечностей имеют два акантоида в форме тупых длинных палочек.

Е.С. Шалдыбина (1975) дат характеристику акантоидов, соленидиев и щетинок клещей. При этом она отмечает, что акантоиды – это модифицированные щетинки лапок, имеющие внутри полость, часто бывают расположены только на лапках первой пары ног и иногда на лапках второй Рис. 32. №-я и 4-ая пара конечностей (ув. х 400).

Рис. 33. 3-я и 4-ая пары ног (ув. х 200).

Рис. 34. Амбулакры 4-ой пары ног (ув. х 4000).

Соленидии – это трубочки с тонкими стенками, закрытые на дистальном конце, имеют всегда гладкую наружную поверхность. Концы соленидиев бывают булавовидные, заострнные, волосовидные; встречаются на колене, голени и лапке. Прияты обозначения соленидиев: «W» - расположены на лапках, «» - на голенях, «» - коленных члениках.

В случае наличия нескольких соленидиев на членике рядом с буквой ставится арабская цифра, показывающая порядок развития соленидиев в онтогенезе. Если имеется обозначение «1», то это указывает, что соленидий голени, имеющийся уже у личинки и т.д.

Изучая щетинки конечностей псороптидных клещей, В.И. Ильященко установил, что они имеют четыре разновидности: простые волосовидные щетинки разной длинны, они имеются на всех члениках; толстые палочковидные щетинки на дорзальной стороне лапок и голени; короткие толстые щетинки, расположенные рядом с палочковидными щетинками лапки и рядом с длинной волосовидной щетинкой дорзальной стороны коленного членика. Четвртый вид щетинок – толстые бичевидные щетинки на лапках третьей и четвртой пар конечностей.

При исследовании толстых палочковидных щетинок в световых микроскопах можно видеть, что они имеют четыре стенки: две наружные и две внутренние. Между внутренней и наружной стенкой масса тмная, между внутренними – светлая, что свидетельствует о трубчатом строении этих щетинок.

Волосовидные щетинки при исследовании в проходящем свете микроскопа наблюдаются как оптически однородная масса, равномерно преломляющая свет.

В электронном сканирующем микроскопе полые щетинки видны как гладкие толстые щетинки с тупыми концами (рис 35, 36). Следовательно, толстые тупые щетинки на лапках и голени – это соленидии, а не акантоиды, поскольку последние, как отмечает Е.С. Шалдыбина, размещаются преимущественно на лапках. У псороптидных клещей такие щетинкиРис. 35. Лапка ног 4: а – амбулакры; - соленидий (ув. х 1000).

Рис. 36. Лапка 4-ой пары ног: а – амбулакры; - соленидий (ув. х 800).

соленидии располагаются на лапках и голенях не только первой и второй, но и других пар конечностей.

Т.о., чувствительные щетинки (соленидии) соответствуют аналогичным щетинкам, обозначенным М.А. Палимпсестовым (1948) у псороптидных клещей как «якоревидные костыли» и Т.В. Соколовой с соавторами (1989) как «акантоиды». Смена простых волосовидных щетинок на толстые короткие щетинки – соленидии, а также апикальные части лапки на когтевидный вырост, судя по всему, является результатом адаптации клещей к паразитизму на животных. Когтевидная форма вершины лапок и толстых щетинок соленидий усиливает сцепление конечности с субстратом. При этом конечность не проваливается между шерстью и бесприпятственно выносится вперд.

Также, нет единого мнения о количестве телоподиев (члеников) ходильных конечностей. Vitzthum H. (1928), В.Б. Дубинин (1945, 1955), Е.С.

Черкасский (1966) и др. указывали, что у всех чесоточных клещей конечности состоят из пяти подвижных члеников: вертлуга (trochanter), бедра (femor), колена (genu), голени (tibia), лапки (tarsus). Шестой членик – тазик (cocxae) – неподвижен и слит с туловищем. Однако, в работах М.А. Палимпсестова (1948) в характеристике конечностей клещей неоднократно указывается, что они состоят из тазика, вертлуга, бедра, голени и лапки. То есть, он отмечает те же пять члеников, но отсутствует коленный членик и, следовательно, тазик причисляется к подвижным членикам.

Причина мнения автора по наименованию члеников конечностей у псороптидных клещей не совсем понятна, т.к. при микроскопическом исследование псороптид очень чтко видно, что все конечности состоят из пяти подвижных члеников, а именно: вертлуга, бедра, колена, голени и лапки (рис 37). Шесток членик (тазик) неподвижно слит с туловищем и его границы обозначены на вентральной стороне туловища валикообразными эпимерами, имеющими более высокую склеротизацию и тмную окраску. Эпимеры у псороптидных клещей свободные.

ИССЛЕДОВАНИЕ МОРФОЛОГИЧЕСКИХ ОСОБЕННОСТЕЙ

ПОЛОВОЗРАСТЫХ ФАЗ КЛЕЩЕЙ P.CUNICULI

В их жизненном цикле различают фазы: яйца, личинки, нимфы первой (протонимфы) и третьей (телеонимфы), половозрелого самца и самки (имаго).

исследование морфологии и микрометрических измерений клещей и яиц.

Внимание уделяют длине – от переднего края до заднего края идиосомы (у самцов до заднего края опистосомальных лопастей) и ширине – в наиболее биометрическому анализу по Е.К. Меркурьерой и Г.Н. Шангин-Березовскому (1983) (таблица 1).

ЛИЧИНКИ

ПРОТОНИМФЫ МУЖСКИЕ

ПРОТОНИМФЫ ЖЕНСКИЕ

ТЕЛЕОНИМФЫ МУЖСКИЕ

ТЕЛЕОНИМФЫ ЖЕНСКИЕ

Как видно из таблицы, существует разница в размерах тела клещей разных возрастов и фаз развития.

Яйца: удлиннно-овальной формы (рис 38) серовато-белого цвета, с блеском. Одна сторона у них вогнутая, а другая выпуклая. Оболочка яиц хорошо просвечивается и при их исследовании в световом микроскопе внутри яйца можно наблюдать разные стадии развития личинки.

При исследовании яиц в сканирующем электронном микроскопе (СЭМ) при увеличении 3000 и более хорошо видно, что поверхность яиц не гладкая, а мелкопористая, шероховатая.

Личинки: (рис 39) светло-серого или слегка желтоватого цвета, имеют размеры в длину 0,306 – 0,425 мм, в ширину 0,238 – 0,315 мм. Гнатосома хорошо сформирована, имеет конусовидную форму. Ротовой аппарат имеет такое же строение (рис 40), как у взрослых клещей и приспособлен к приму жидкой пищи. Туловище удлиннно-овальное, имеет только один – проподосомальный щиток. Анальное отверстие расположено на задней стороне туловища и слегка смещено на его вентральную сторону.

На дорзальной поверхности туловища имеются щетинки: sce – очень маленькие, расположены на уровне второй пары конечностей, sci – длинные, расположены несколько каудально и наружу относительно предыдущих (рис 41).

Далее идут щетинки: за сеюгальной бороздой наружные – I2 и ближе к средней линии d1, на уровне конечностей третьей пары – щетинки I3 и d2; по краю опистосомы – две пары щетинок I4 и d3, а со стороны анального клапана две щетинки d4 (рис 42).

Рис. 37. Вторая пара ног (ув. 200).

Рис. 38. Яйца.

Рис. 39. Личинка (увеличение х 150).

Рис. 40. Ротовой аппарат личинки: я – языковидные выросты, пло – полулунные органы (ув. х 2000).

Рис. 41. Молодая личинка (ув. х 80).

Рис. 42. Опистосома с вентральной стороны (ув. х 150).

На вентральной стороне туловища располагаются щетинки сх1 и сх3 на коксальных полях первой и третьей пары конечностей.

На боковых сторонах туловища имеются наружные плечевые щетинки – I1, расположенные сразу за второй парой конечностей, а также щетинки h и sh впереди третьей пары конечностей.

У личинок шесть пар ног: первая и вторая пары мощные, располагаются на переднее-боковых сторонах туловища, имеют амбулакры. Третья пара конечностей – тонкие, длинные, без амбулакров, располагаются субмедиально.

Их лапки заканчиваются двумя толстыми длинными щетинками (рис 43).

Ходильные конечности имеют щетинки и соленидии. На первой паре конечностей они расположены в следующем порядке: на вертлуге – 0, бедре – 1, колене – 2, голени – 1 щетинка и 1соленидий (), на лапке – 5щетинок и 1соленидий. Рядом с соленидием видна короткая шиповидная микрохета. Т.о., общая формула щетиной первой пары конечностей, выглядит так: 0 – 1 – 2 – (+) – 6 (+). Общая формула щетинок второй пары конечностей может быть представлена в следующем виде: 0 – 1 – 2 1 (+) – 5 (+). На третьей паре конечностей толстые щетинки. Соленидии расположены на заднее-боковой стороне голени, а общая формула щетинок составляет: 0 – 0 – 0 – 1 (+) – 4.

Протонимфы: имеют более крупные размеры по сравнению с личинками и у них четыре пары ходильных конечностей. Две передние пары – мощные, прикрепляются к переднее-боковой стороне туловища и снабжены амбулакрами (рис 44). Третья пара конечностей сублатеральные, без амбулакров и оканчивается толстыми длинными щетинками (рис 45). Четвртая пара конечностей также тонкая, прикрепляется субмедиально. По длине они немного короче ног третьей пары и они имеют амбулакры. Анальное отверстие щелевидное, располагается на заднем крае туловища, ближе к его вентральной поверхности. В отличие от личинок, у протонимф на створке анального клапана, в нижней части, имеется по одной волосовидной щетинке и ещ четыре пары коротких волосовидных щетинок расположены по сторонам от анального отверстия, в том числе щетинки I5, d4, d5 и анальные щетинки. На вентральной стороне идиосомы протонимф, чуть ниже уровня эпимеров третьей пары конечностей, по обе стороны от средней линии, располагаются две короткие щетинки и впереди них два небольших круглых отверстия, которые представляют собой рудименты половых присосок. В световом микроскопе присоски видны в виде двух тмных точек и до В.И. Ильященко в литературе по псороптоидным клещам они не были описаны.

Ротовой аппарат протонимфы (рис 46) имеет такое же строение, как у взрослых клещей. Половые органы отсутствуют.

Самцы протонимф удлиннно-овальной формы.Сеюгальные и продольные S-образные борозды идиосомы не выражены. На спинной стороне щетинки наружного ряда представлены I1 – I4 щетинками, внутреннего ряда – щетинками d1 – d3. На боковых сторонах идиосомы располагаются щетинки I1, h и sh. На вентральной стороне идиосомы имеются коксальные щетинки – сх1 и сх3 и пара генитальных щетинок, рядом с половыми присосками, на уровне эпимеров третьей пары конечностей. Формулы щетинок конечностей выглядят следующим образом: 1-я пара – 0 – 1 – 2 – 1 (+) – 6 (+); 2-я пара – 0 – 1 – 2 – 1 (+) – Т.о., приведнные формулы свидетельствуют о том, что у самцов протонимф лапки и голени 1, 2 и 3-й пар конечностей имеют соленидии.

Н.Н. Богданов в книге «Курс кожных болезней» (1936, С. 309) пишет, что различить самцов и самок, форму личинок и протонимф псороптид – невозможно. Однако, у В.И. Ильященко, читаем следуещее: «Отличие самцов отличинок протонимф: протонимфы имеют большие размеры идиосомы и четыре пары конечностей, тогда, как личинки шестиногие, у личинок отсутствуют половые присоски и щетинки на створке анального клапана, а также щетинки I5, d4 и d5. Самки протонимф имеют грушевидную форму идиосомы, с выраженными плечевыми выступами. На заднем крае идиосомы Рис. 43. Хризалидная личинка с вентральной стороны (ув. х 80).

Рис. 44. Протонимфа женская (ув. х 140).

Рис. 45. Протонимфа в центре (ув. х 200) Рис. 46. Ротовой аппарат протонимфы: лг – латеральные губы; я – языковидные выросты (ув. х 1000).

расположены два копулятивных бугра цилиндрической формы, которые отстоят друг от друга на расстояние, равное высоте бугра. Под копулятивными буграми заметны четыре короткие волосовидные щетинки: пара наружных – I4 и пара внутренних – щетинки d3. Оснащение конечностей щетинками и соленидиями такое же, как у самцов протонимф. Амбулакры имеются на лапках ног 1, 2 и 4-й пары.

Следовательно, женские протонимфы отличаются от личинок размерами и формой идиосомы, наличием четырх пар конечностей, копулятивных бугров и половых присосок, а также количеством щетинок в прианальной области.

От самцов протонимф они также отличаются формой идиосомы, наличием двух копулятивных бугров на заднем крае идиосомы.

Хетотаксия конечностей протонимф псороптид выглядит следующим образом: соленидии на голенях конечностей 1 и 3-й пары представлены в виде толстых тупых щетинок.

Телеонимфы: имеют четыре пары конечностей, овальное туловище и длинную конусовидную гипостому. Ротовой аппарат устроен также, как у взрослых клещей и приспособлены к приму жидкой пищи. На вентральной стороне туловища как у самцов, так и у самок телеонимф, на уровне эпимеров конечностей третьей и четвртой пары расположены четыре (может быть пять) рудиментарных половых присосок в виде небольших отверстий и рядом с ними шесть микрощетинок – по три щетинки рядом с каждой парой присосок. При наличии пятой рудиментарной присоски она располагается на сагиттальной линии. Наружные половые органы у телеонимф отсутствуют.

Самцы телеонимф удлиннно-овальной формы (рис 47), их размеры в длину 0,438 – 0,67мм, в ширину 0,310 – 0,484мм. На спинной стороне всего один проподосомальный щиток кеглевидной формы). Сеюгальная и S-образная борозды туловища не выражены. За проподосомальным щитком располагается пара микрощетинок - sce и пара длинных щетинок – sci, затем вдоль края идиосомы идут щетинки: I2, I3 и I4, а также щетинки внутреннего спинного ряда: d2 и d3. На боковой стороне идиосомы располагаются щетинки I1 – за второй парой конечностей, h и sh – перед третьей парой конечностей.

Анальное отверстие находится на заднем крае туловища, ближе к его вентральной поверхности. В нижней части створки анального клапана есть две короткие анальные щетинки. По бокам от анального отверстия располагаются четыре пары щетинок, в том числе щетинки I4, d4 и d5, а также анальные щетинки – ai (рис 48). На вентральной стороне идиосомы имеются коксальные щетинки – сх1, сх3 и три пары генитальных щетинок сбоку и сзади от половых присосок.

амбулакрами. Конечности третьей пары тонкие, располагаются сублатерально; их лапки без амбулакров и оканчиваются двумя толстыми длинными щетинками.

Четвртая пара конечностей также тонкие, по длине они немного короче ног третьей пары и располагаются субмедиально, их лапки имеют амбулакры с длинным трехчленистым стебельком.

Оснащение конечностей чувствительными щетинками и соленидиями выглядит следующим образом: одна пара на вертлуге – 1длинная и 1короткая щетинка; на бедре – 1длинная волосовидная; на колене – 2длинных и 1микрощетинка; на голени – 1длинная волосовидная щетинка и 1палочковидный соленидий; на лапке – 7щетинок и 2соленидия. Общая формула щетинок: 1 – 1 – – 1(+) – 7(+2). Общая формула щетинок второй пары конечностей составляет: – 1 – 3 – 1(+) – 6 (+); третьей пары: 1 – 0 – 0 – 1 (+) – 4; четвртой пары: 0 – 0 – Как видно из формул у телеонимф появляются щетинки на вертлугах 1, 2 и пары конечностей и микрощетинки на голенях. На лапках первой пары конечностей число щетинок достигает семи и появляется второй соленидий.

Самец телеонимфы отличается от протонимфы большими размерами, наличием щетинок на вертлугах первой и второй пары конечностей, большим числом (на 2) половых присосок и генитальных щетинок (на 4).

Рис. 47. Телеонимфа мужская (ув. х 200).

Рис. 48. Анальный клапан телеонимфы. Половое отверстие отсутствует (ув.

х 500).

Женские телеонимфы имеют широкую овальную форму идиосомы, без выраженных плечевых выступов (рис 49). Размеры телеонимфы в длину 0,62 – 0,722мм, в ширину 0,468 – 0,553мм. На спинной стороне туловища только проподосомальный щиток, а на заднем крае располагаются два копулятивных бугра цилиндрической формы. Под копулятивными буграми в один ряд располагаются четыре микрощетинки, из них пара наружных – щетинки I4 и пара внутренних – щетинки d3. Анальное отверстие в виде продольной щели расположено ближе к вентральной поверхности опистосомы (рис 50), на его створке имеется одна пара анальных щетинок. По стороне от анального клапана расположены четыре пары коротких волосовидных щетинок (I5, d4, d5 и ai).

Набор и расположение щетинок дорзальной и боковой поверхностей идиосомы такой же, как и у самцов телеонимф, за исключением щетинок I4 и d3, которые, как уже было отмечено, располагаются под копулятивными буграми, по краям опистосомы. На вентральной стороне идиосомы есть щетинки сх1 и сх3 – на коксальных полях первой и третьей пары конечностей, и три пары генитальных щетинок рядом с половыми присосками на уровне эпимеров третьей пары конечностей.

У самок телеонимф амбулакры имеются на лапках первой и второй пар конечностей, третья и четвртая пара претарзусов – не имеют и их лапки оканчиваются двумя длинными толстыми щетинками. Формулы щетинок и соленидиев телеонимф выглядят следующим образом: 1пара – 1 – 1 – 3 – 1(+) – – 1 – 5.

Половые органы у телеонимф отсутствуют, ротовой аппарат хорошо развит и имеет такое же строение как у взрослых клещей.

Самки телеонимф отличаются от самцов наличием двух копулятивных бугров на заднем крае идиосомы и отсутствием амбулакров на лапках четвртой пары конечностей. От самки протонимфы они отличаются формой идиосомы (у телеонимф нет плечевых выступов), наличием щетинок на Рис. 49. Женская телеонимфа (справа).

Рис. 50. Опистосома псороптеса: кб – копулятивные бугры; а – амбулакры ног 4 пары (ув. х 150).

вертлугах первой, второй и третьей пары конечностей, у них нет амбулакров на лапках ног четвртой пары, тогда, как у протонимф амбулакры здесь есть.

От половозрелых самцов и самок телеонимфы отличаются тем, что у них нет наружных половых органоы, но есть копулятивные бугры на конце идиосомы.

Самки: (рис 51) имеют размер в длину 0,663 – 0,888мм, в ширину 0,451 – 0,610мм. Идиосома самок широко-овальная, уплощенная в дорзо-вентральном направлении. Цвет кутикулы от светло-коричневого до тмно-коричневого.

Гнатосома хорошо развита, конусовидная, слегка изогнутая вниз (рис 52). На дорзальной стороне идиосомы самки есть только один – проподосомальный щиток кеглевидной формы. За второй парой конечностей у слабонапитавшихся самок хорошо заметны сеюгальная (поперечная) борозда и две продольные Sобразные борозды. Анальное отверстие расположено на заднем конце идиосомы и слегка заходит на е вентральную сторону; имеет щелевидную форму и замыкается двумя полулунными створками анального клапана (рис 53). На верхнем конце одной из створок анального клапана располагается конусовидный сосок с копулятивным отверстием на конце. После осеменения половое отверстие закрывается пробкой засыхающего секрета. В нижней части створки анального клапана имебются две волосовидные щетинки; по сторонам от анального клапана размещаются ещ четыре пары волосовидных щетинок, в том числе пара щетинок d4, d5 и I5.

На спинной стороне, на уровне конечностей второй пары, располагаются щетинки sce и sci, затем идут щетинки наружного спинного ряда I2 – I4 и внутреннего спинного ряда d1 – d3. На боковых сторонах туловища располагаются длинные наружные плечевые щетинки I1 – за второй парой конечностей и щетинки h и sh – за третьей парой конечностей.

На вентральной стороне туловища, на уровне эпимеров второй пары ног, располагается яйцевыводное отверстие. В закрытом состоянии оно имеет вид поперечной щели (рис 54), которая переходит в две глубокие параллельные складки. Впереди яйцевыводного отверстия располагаются две коксальные Рис. 51. Самка с дорсальной стороны.

Рис. 52. Передняя часть самки.

Рис. 53. Открытое анальное отверстие с фекальными массами (ув. х 500).

Рис. 54. Вентральная сторона самки (ув. х 50).

щетинки сх1, а ниже отверстия, в конце складок – три пары генитальных щетинок на коксальных полях третьей пары конечностей – сх3 щетинки.

трхчленистого стебелька. Третья и четвртая пары конечностей развиты слабее, тонкие, почти одинаковые по длине. Амбулакры имеют только лапки четвртой пары конечностей, лапки третьей пары оканчиваются двумя толстыми длинными щетинками. Первая пара конечностей имеет следующие щетинки: на вертлуге и бедре – по одной длинной щетинке, на колене – одна микрощетинка и две волосовидные щетинки, на голени – одна волосовидная и один соленидий на передней дорзальной стороне членика, на лапке – восемь щетинок и два соленидия. Общая формула щетинок первой пары конечностей: 1 – 1 – 3 – 1 (+) – 8 (+2). Формулы щетинок других конечностей выглядят следующим образом:

– 2 – 5.

Половозрелые самки отличаются от телеонимф большими размерами, наличием копулятивного и яйцевыводного отверстий, амбулакров на четвртой паре конечностей; у телеонимф они отсутствуют. У самок нет копулятивных бугров.

От самцов самки отличаются размерами идиосомы (самцы меньше), у них опистосомальный щиток. У самки иное расположение амбулакров на ногах: они есть на первой, второй и четвртой парах конечностей, а у самца – ещ и на четвртой паре.

Самцы: (рис 55) имеют размеры в длину 0,612 – 0,677мм, в ширину 0,451 – 0,610мм. Гипостома самцов длинная, конусовидная, слегка изогнута вниз.

Туловище короткое, широко-овальное, клиновидно-расширенное в задней части.

Сеюгальная и S-образная борозда выражены (рис 56), цвет кутикулы от светлокоричневого до тмно-коричневого. На спинной стороне идиосома имеет два склеротизированных щитка: проподосомальный – кеглеобразный и Рис. 55. Самец (слева).

Рис. 56 Самец (вид сбоку).

опистосомальный – шестиугольной формы. На краю опистосомы располагаются две крупные опистосомальные лопасти треугольной формы. Лопасти широко расставлены и имеют по краю пять толстых щетинок. Лопасти служат для фиксации женской протонимфы при скреплении в копулятивные пары. Под опистосомальными лопастями, терминально, располагаются две крупные копулятивные присоски, которыми самец захватывает копулятивные бугры самки протонимфы и телеонимфы при спаривании. Под каждой присоской имеется по донной игольчатой щетинке – d4.

На вентральной стороне идиосомы, на середине расстояния между основами конечностей третьей и четвртой пар, расположен анально-половой конус, строение которого было изложено выше, при описании идиосомы клещей. По обе стороны от анально-полового конуса, располагаетс две пары рудиментарных присосок, которые образуют вместе с анальным отверстием и половыми органами единый анально-половой комплекс. Сразу за комплексом видны две генитальные микрощетинки – g1.

На дорзальной стороне туловища самца располагаются щетинки sce и sci – сразу за проподосомальным щитком. Затем, каудально, идут щетинки наружного спинного ряда I2 – I4 и внутреннего ряда d1 и d2. Щетинки d3 у самца отсутствуют и на их месте находятся копулятивные присоски, которые являются, по видимому, изменнными щетинками.

На боковых сторонах туловища расположены щетинки I1 – за второй парой конечностей, щетинки h и sh – впереди ног третьей пары.

Вентральная сторона идиосомы имеет щетинки сх1 и сх3 на коксальных полях первой и третьей пары конечностей и по две щетинки на границе с коксальными полями четвртой пары конечностей. По видимому, это смещнные генитальные щетинки g2 и g3.

Первая и вторая пары конечностей толстые, мощные, прикрепляются к передне-боковой стороне идиосомы. Их лапки имеют коготковидный вырост и амбулакры с длинным трхчленистым стебельком. По стороне от основания коготковидного выроста вершина лапки нест два соленидия. Ещ один соленидий располагается на дорзальной стороне дистального конца голени. Общая формула щетинок первой пары конечностей составляет: 1 – 1 – 3 – 1 (+) – 6 (+2). На второй паре конечностей лапки и голени имеют по одному соленидию, а общая формула щетинок составляет: 1 – 1 – 3 – 1 (+) – 5 (+).

Конечности третьей пары длинные тонкие, почти в 2 – 2,2 раза длиннее конечностей четвртой пары. Их лапки имеют коготковидный вырост с длинным трхчленистым стебельком. На переднее-боковой стороне голени располагается палочковидная щетинка – соленидий, а на заднее-боковой стороне – волосовидная щетинка; на лапке – одна длинная бичевидная, две щетинки средней длинны и один короткий соленидий, свободный конец которого раздвоен наподобие рожка.

Между соленидием и коготковидным выростом лапки, проходит стебелк амбулакра. Т.о., общая формула щетинок третьей пары конечностей составляет: Конечности четвртой пары тонкие, короткие, прикрепляются субмедиально. При исследовании клещей в СЭМ, В.И. Ильященко установил, что лапки четвртой пары конечностей имеют по два амбулакра с короткими двухчленистыми стебельками, один длинный, два коротких и одну микрощетинку, один палочковидный соленидий; общая формула щетинок: 0 – 0 – 0 – 1 (+) – (+). По данным М.А. Палимпсестова (1948), у самцов на лапка четвртой пары конечностей всего одна щетинка и один амбулакр.

Самцы заметно отличаются от нимф и половозрелых самок. От мужских телеонимф они отличаются формой и размерами идиосомы. Телеонимфы немного крупнее, их идиосома удлиннно-овальная, у самцов идиосома широко-овальная.

У телеонимф нет опистосомального щитка и лопастей, копулятивных присосок, анально-полового конуса. Конечности третьей пары почти такие же по длинне, как и конечности четвртой пары. У самцов все четыре пары конечностей имеют амбулакры, тогда как у телеонимф они имеются на первой, второй и четвртой парах.

С.Н. Никольский (1980, С.383) пишет: «У самцов присоски (он имеет в виду амбулакры) расположены так же, как у самок, но на четвртой паре ног они рудиментарные. Кроме того, у самцов хорошо выражены опистосомальные лопасти и две половые присоски».

По В.И. Ильященко у самцов имеются амбулакры и на третьей паре конечностей, их хорошо видно даже в световом микроскопе, а также, по мнению этого же автора «половые присоски» располагаются не под опистосомальными лопастями, а по бокам от анально-полового конуса, на вентральной стороне туловища.

От самок самцы отличаются меньшими размерами идиосомы, наличием шестиугольного опистосомального щитка, опистосомальных лопастей, копулятивных присосок на заднем конце идиосомы, расположением анального отверстия, размерами третьей пары конечностей и расположением амбклакров – у самки амбулакры имеют первая, вторая и четвртая пары конечностей, у самцов длинностебельковые амбулакры есть на первой, второй и третьей парах, а короткостебельковые амбулакры на четвртой паре.

Т.о., у псороптидных клещей налицо морфологические отличия по полу и возрасту. Эти отличия особенно хорошо заметны в фазу протонимфы и выражаются, прежде всего, в различной форме, размерах идиосомы, наличии или отсутствии органов для образования копулятивных пар (копулятивные бугры, присоски, опистосомальные лопасти), половых органов, в количестве половых присосок, склеротизированных щитков на спинной стороне идиосомы, размерах третьей и четвртой пар конечностей, оснащении их амбулакрами и др.

Основные морфологические признаки клещей:

- все щетинки клещей гладкие, в большинстве волосовидные, на туловище – немногочисленны;

- гнатосома длинная, конусовидная; ротовой аппарат приспособлен для прима жидкой пищи;

- амбулакры первой и второй пар конечностей включают тюльпановидные присоски и длинный трхчлениковый стебелк;

- у самцов опистосомальный щиток крупный, шестиугольной формы, опистосомальные лопасти широко расставлены и хорошо развиты;

- у самки протонимф и телеонимф копулятивные бугры высокие отстоят друг от друг на расстояние равное высоте бугра.

3.3. Гематологические показатели и активность факторов иммунитета у кроликов при экспериментальном псороптозе Исследования проводились в лаборатории кафедры эпизоотологии и инфекционных болезней животных, а также паразитологии и инвазионных болезней животных. С целью выявления изменений, происходящих в организме больных животных, было проведено экспериментальное заражение здоровых кроликов псороптозом.

Лабораторные исследования проводились по общепринятым методикам :

- определение гемоглобина в крови – гемоглобинцианидным методом (с ацетонциангидрином);

- подсчет эритроцитов и лейкоцитов проводился в камере Горяева;

- для определения лейкоцитарной формулы мазки крови фиксировали по Лейшману, окрашивали по Романовскому-Гимзе.

- скорость оседания эритроцитов определяли методом Панченкова;

- определение гематокрита осуществлялось микрометодом в модификации И.Тодорова;

фагоцитарную активность нейтрофилов определяли по методу Кост и Стенко;

- определение бактериальной активности сыворотки крови по методу О.В. Смирновой, Т.А. Кузьминой Статистическая обработка результатов проводилась по методу А.Ф. Садовского.

Для этого был произведен отбор материала (взятие соскобов в 3 местах поражения) у больных кроликов. Для постановки эксперимента подобрали подопытных кроликов (16 голов), в возрасте 6 месяцев, обоих полов, пород:

серая шиншилла и рыжий великан, поделили их на 2 группы: опытные и контрольные по 8 животных в каждой.

Заражение здоровых кроликов проводили путем подсадки в ушные раковины лабораторных животных живых клещей и закладки корочек с яйцами паразитов. Кроликов контрольной группы (8 голов) содержали отдельно.

Ежедневно проводили наблюдение за опытными и контрольными животными.

На 5 день наблюдали покраснение внутренней поверхности ушных раковин у животных опытной группы. На 10 день было образование незначительного количества струпьевидного налта в глубине ушных раковин, заметны расчсы с наружной стороны уха.

На 20 день кролики трясли головами и чесали уши, в ушных раковинах наблюдали значительное увеличение корочек. Животные были угнетены, аппетит понижен.

На 25 день – кролики по-прежнему угнетены, аппетит очень вялый. При пальпации ушей – местная температура и чувствительность повышена.

На 30-ый день было проведено взятие соскобов из ушных раковин у кроликов опытной группы с последующей микроскопией.

Микроскопия показала наличие в соскобах наличие всех стадий развития паразитов рода Psoropter cuniculi и их яиц.

Параллельно с этим исследованием у животных опытной и контрольной групп каждые 5 дней проводили взятие крови из краевой ушной вены для определения гематологических показателей, а также активности факторов неспецифического иммунитета У подопытных животных на 1, 5, 7, 10, 15, 20, 25, 30, 40 и 45 сутки после заражения брали кровь из ушной вены и определяли лейкоформулу. Результаты исследований представлены в таблице 2.

Эозинофилия периферической крови наблюдалась в течение всего периода наблюдений.

Динамика изменения лейкограммы у кроликов после заражения Psoroptes гиперчувствительность немедленного типа с участием тучных клеток, с эозинофильной инфильтрацией и васкулонекротическими изменениями в органах мишенях. В дальнейшем к этому присоединяется лимфоцитарная инфильтрация и образование гранулем, характерных для гиперчувствительности замедленного типа.

Развитие аллергической реакции свидетельствует о том, что процесс, начавшийся первично, как местный, приобретает общий характер.

неспецифического иммунитета. Результаты исследований представлены в таблице 3.

Факторы неспецифического иммунитета у кроликов при экспериментальном заражения (контроль) 45,74 +3,2431,0 + 3,7 8,1 + 0,45 64,85 +2,14 6,76 + 0, Примечание: Уровень достоверности (р) удовлетворительный (р = 96,0-97,5 %);

весьма удовлетворительный (р = 99,0-99,6 %);

высокий (р = 99,8 %) Анализируя активность факторов неспецифического иммунитета у кроликов, больных экспериментальным псороптозом, и сравнивая е активность у здоровых животных, мы можем отметить, что за период наблюдения у больных кроликов бактерицидная активность сыворотки крови снижалась на 30,2–55,46% по сравнению со здоровыми животными.

Несмотря на возрастающее количество лейкоцитов у больных животных их функциональная активность значительно отличалась от таковой у здоровых кроликов. Общее количество лейкоцитов несколько увеличилось у больных животных по сравнению с кроликами контрольной группы.

А фагоцитарная активность лейкоцитов к 25-му дню заражения у кроликов опытной группы практически идентична таковой у здоровых животных в контрольной группе. К 45-му дню после заражения фагоцитарная активность лейкоцитов у инвазированных кроликов соответствовала таковой у здоровых животных, фагоцитарное число было на 26,65% ниже, чем у здоровых животных и на 28,52% ниже, чем до заражения.

На примере экспериментального заражения мы увидели влияние данного заболевания на активность факторов неспецифического иммунитета (они снижаются, происходит ослабление организма животных).

В патогенезе псороптоза кроликов немаловажное значение имеют многие системные перестройки организма. В частности, поражение кожи, (наружного и внутреннего слоев), различных параметров гомеостаза, которые усугубляются псороптозной интоксикацией.

Так, при заражении кроликов клещами P. сuniculi уже на 5-й день произошли изменения гематологических показателей. Снизилось количество эритроцитов, уровень гемоглобина, возросло количество лейкоцитов. К 15-му дню после заражения количество эритроцитов снизилось на 27,48-47-54%, уровень гемоглобина на 15,31-38,46%, количество тромбоцитов на 32,96-60,69% по сравнению с показателями до заражения. Количество лейкоцитов возрастало на 17,44-60,52% по сравнению до заражения.

Следующим этапом исследований служило изучение факторов свертывания крови. Они представлены в таблице 4.

Состояние гомеостаза у кроликов зараженных P. cuniculi кровотечения (ВК) увеличилось в 1,87 раз, время свертывания крови (ВСК) увеличилось в 1,4 раза, количество тромбоцитов (Т) уменьшилось в 1,67 раз по сравнению с периодом до заражения. К 15-му дню после заражения продолжительность времени кровотечения увеличилась в 2,09 раз, время свертывания крови – в 1,73 раз, а количество тромбоцитов уменьшилось в 1, раз по сравнению с периодом до заражения. В дальнейшем наметился рост количества тромбоцитов и уменьшение продолжительности времени свертывания крови у зараженных кроликов и тем на менее, к 45-му дню после заражения время кровотечения у кроликов данной группы было в 1,47 раза больше показателей до заражения, время свертывания крови в 1,49 раз превышало продолжительность его до заражения, и количество тромбоцитов в 1,43 раза было ниже количества до заражения.

Проводя определение общего белка в сыворотке крови кроликов, больных псороптозом, и сравнивая с содержанием его в крови здоровых кроликов, мы установили, что у зараженных животных отмечается четко выраженная гипопротеинемия. Наиболее ярко гипопротеинемия была выражена в период с 20 по 45-й день после заражения.

Учитывая все вышеизложенное, мы можем сделать выводы, что псороптоз (даже на примере экспериментального заражения), может повлечь за собой определенные последствия и нанести ущерб кролиководческим хозяйствам.

Влияние псороптоза на продуктивные показатели кроликов Определение прироста массы здоровы и инвазированных псороптозом кроликов показало, что уже с первых дней заражения наблюдается отставание в росте, а у части животных наблюдалась полная задержка прироста массы тела.

Прослеживается четкая зависимость между снижением приростов живой массы кроликов и интенсивностью инвазии. Чем выше интенсивность инвазии, тем ниже приросты массы тела.

Все животные до заражения по минимальным требованиям к живой массе кроликов мясо-шкуровых пород относились к третьему классу. К окончанию опыта здоровые кролики относились ко второму классу, а кролики, инвазированные клещами P. cuniculi, являлись не классными.

Результаты исследований представлены в таблице 5.

значительному снижению прироста живой массы у зараженных животных.

Снижение живой массы кроликов прямо пропорционально интенсивности инвазии. Это связано с угнетенным состоянием больных животных и их отказом от корма.

Помимо выхода продукции, большое значение имеет ее качество. Наши исследования показали, что мясо, полученное от кроликов, инвазированных псороптозом, по биохимическим показателям и биологической ценности является продуктом низкого качества, употребление его может оказать негативное воздействие на организм человека, и оно должно оцениваться, как условно годное (таблица 6).

Физико-химические показатели мяса зараженных и здоровых кроликов Количество го азота, мг% Наличие солей аммония Из таблицы видно, что в мясе от зараженных животных уже к 15-му дню после заражения изменяется реакция среды в щелочную сторону, выявляются продукты первичного распада белков и снижается активность тканевых ферментов.

Это создает благоприятные условия для развития условно-патогенной микрофлоры, приводящей к порче мяса.

В материале от зараженных кроликов, убитых на 60-66 сутки, обнаружена его обсемененность микрофлорой. Проведенные исследования показали, что наибольшей микробной обсемененности подвергается печень, мезентериальные микроорганизмы: Proteus vulgaris, Pr. mirabilis, Pr. rettgeri, Bacillus paracolli, Salmonella enteroditis, Cocci.

Обсемененность микроорганизмами внутренних органов кроликов, патологического процесса, возможно связано со снижением активности неспецифического иммунитета. При высокой интенсивности инвазии резко снижается активность факторов неспецифического иммунитета, вследствие чего происходит снижение сопротивляемости организма микрофлоры, занесенной при перфорации барабанной перепонки.

Оценка биохимического состава крольчатины показала, что в мясе кроликов, больных псороптозом, отмечается повышение влаги на 3,27% к 20-му дню и на 10,24% к 40-му дню после заражения по сравнению с мясом здоровых животных. Резко снижается содержание жира на 26,25% к 20-му дню и на 86,04% - к 40-му дню после заражения (таблица 8).

Изменение химического состава мяса кроликов при псороптозе К 20-му дню после заражения содержание белка в мясе от больных животных на 3,1% выше, чем от здоровых кроликов, а на 40-й день – ниже на 12,22%.

Учитывая все вышеизложенное, мы можем сделать выводы, что псороптоз (даже на примере экспериментального заражения), может повлечь за собой определенные последствия и нанести ущерб кролиководческим хозяйствам.

На примере экспериментального заражения мы увидели влияние данного заболевания на привес животных (он значительно ниже, чем у здоровых кроликов; это ведет к истощению животных).

Таким образом, мы ещ раз убедились, что псороптоз – это бич кролиководства, с которым надо бороться.

3.5. Эффективность Феноксифена при псороптозе кроликов С целью поиска высокоэффективного лечения псороптоза кроликов мы испытали новый отечественный препарат «Феноксифен».

Изобретение относится к области ветеринарной паразитологии, в частности, к акарицидным составам, которые могут быть использованы для борьбы с клещами на разных стадиях развития – от яйца до имаго.

Наиболее близкими по технической сущности к достигаемому результату является инсектицидный состав «Пурофен», содержащий 3% S-фенвалерата и вспомогательные компоненты – глицерин, диметилсульфоксид, изопропиловый спирт, полиэтиленгликоль-400: патент (RU (11) 2204383 (13) C1) 7 A 61 K 31/00, A 01 N 25/02, 53/00, A 61 P 33/14.

Однако, известный состав, воздействуя на клещей (имаго), не обладает овицидным действием, т.е. не уничтожает яйца клещей.

Задачей настоящего изобретения является разработка эффективного состава, пригодного для лечения и защиты позвоночных животных от клещей на всех стадиях их развития и жизнедеятельности.

Данный состав готовили путм простого смешивания известного состава «Пурофен» с феноксиэтанолом в соотношении 2:1 и воды.

Использовали данный препарат путм локального нанесения его на поражнные участки, либо использованием его водных растворов (что наиболее выгодно с экономической точки зрения) при следующем соотношении компонентов:

S-фенвалерат – 0,006 – Диметилсульфоксид – 0,016 – Изопропиловый спирт – 0,03 – Полиэтиленгликоль-400 – 0,162 – Феноксиэтанол – 0,1 – Лабораторные исследования проводились в лаборатории кафедры эпизоотологии.

Был произведен отбор материала (взятие соскобов в 3 местах поражения).

Заражение здоровых кроликов (путем подсадки в ушные раковины лабораторных животных живых клещей и закладки корочек с яйцами паразитов) (рис. 58, 59).

Рис. Далее проводилось ежедневное наблюдение за лабораторными животными.

На следующем этапе опыта нам предстояло проверить действие комплексного препарата «пурофен+феноксиэтанол» в различных концентрациях, разработанного на базе АО «ДДД», по отношению к взрослым особям Psoroptes cuniculi и их яйцам.

Для этого производилось контрольное взятие соскобов с целью выявления данного паразита. Микроскопия соскобов дала положительный результат.

Сначала производилась обработка комплексным препаратом непосредственно самих клещей по методике А.А. Непоклонова и Г.А. Таланова.

Для этого клещей в количестве 10 особей погружали в эмульсию препарата на минуту. Затем помещали в пробирки с вложенной в нее фильтровальной бумагой.

Использовались следующие концентрации испытуемого препарата, исходя из его составляющих: 0,003%; 0,006%, 0,012%, 0,024%, 0,048%.

Гибель клещей наблюдалась уже при погружении в препарат 0,003% концентрации.

Опыт проводился при комнатной температуре в трех повторностях.

Учет результатов проводился через 24 часа.

Следующим этапом было выявление действия испытуемого препарата на яйца Psoroptes cuniculi. Для этого производилось взятие соскобов с корочками, из которых удалялись живые паразиты на всех фазах жизни и оставлялись только их яйца. Корочки подвергались микроскопии. Затем проводилось разделение корочек на равные части (при помощи припаровальной иглы и скальпеля) размером 0,5 Х 0,5 см. Производился подсчет яиц в каждом образце, количество их составило 15 штук. Данные образцы корочек помещали в чашки Петри, дно которых было закрыто фильтровальной бумагой. Проводили разведение испытуемого препарата до нужных нам концентраций: 0,003%, 0,006%, 0,012%, 0,024% и 0,048%.

Контролем служили яйца и имаго клещей P.cuniculi, обработанные составом «Пурофен», который не содержит феноксиэтанола и дистиллированной водой.

Результаты опытов преведены в таблице.

Далее каждый образец обрабатывали определенной концентрацией комплексного препарата (при помощи шприца) из расчета 0,5 мл на 0,5см образца. Обработку образцов каждой из концентраций производили в трехкратном повторении. Также были поставлены три чашки Петри для контроля (обработка образцов дистиллированной водой, из расчета 0,5 мл воды на 0,5см2 образца препарата).

Все образцы были поставлены в термостат при температуре 28°С. Туда же были установлены 4 чашки Петри с водой, для создания нужной влажности.

Учет результатов проводился на 3, 5 и 7 сутки. После первого учета результатов, т.е. на 3 сутки в образцах, обработанных 0,012% эмульсией, – 12 яиц (80%) - яйца изменили свою форму, были сплюснуты с боков;

0,048% эмульсией - деформация всех яиц. Остальные образцы без изменений.

На 5 сутки - расплод в контроле (15 особей - 100%). Остальные образцы На 7 сутки - расплод из недеформированных яиц в образцах, обработанных 0,003 и 0,006% эмульсией препарата (5 - 33%, 3 - 20% особей).

Деформированные яйца сухие, серого цвета, плохо извлекаются из корочек (рис.

60).

Следовательно, наиболее оптимальная концентрация данного препарата, имеющая овицидное действие - 0,048%.

Далее проводилась обработка лабораторных животных (кроликов), зараженных псороптозом в условиях нашего опыта.

Сначала проводилась обработка кроликов «Феноксифеном».

Больных псороптозом животных разделили на 5 групп: 4 – опытные; 1 – контрольная (по 3 кролика в каждой).

Использовали следующие разведения препарата для обработки животных:

1,2 мл «Феноксифена» +100мл воды;

Животные контрольной группы были обработаны раствором хлорида натрия, по аналогии с опытными группами.

Для этого, всем кроликам (5 голов), обрабатывали внутреннюю поверхность ушных раковин испытываемым препаратом, в уже известной концентрации – 0,048% (закапывали в каждое ухо при помощи шприца, из расчта 2мл в ухо). После закапывания препарата, необходимо слегка помассировать уши.

Учет результата на 3, 5 и 7 сутки.

Подопытных кроликов обрабатывали испытуемым препаратом в разных концентрациях, путм закапывания «Феноксифена» с помощью шприца, из расчта 1мл в каждое ухо (после закапывания уши следует слегка помассировать). Учт результатов на 3, 5 и 7 сутки – взятие соскобов и их микроскопия.

В соскобах, взятых из ушных раковин контрольных животных, при микроскопии на протяжении всего опыта обнаружены клещи рода P.cuniculi во всех фазах развития и их яйца.

На 3 сутки – при взятии соскобов и их микроскопии: обнаружение мертвых клещей, живых нет. Визуально – размягчение струпьевидных корочек в ушах. Кролики чешут уши меньше, чем до обработки.

На 5 сутки – при взятии соскобов и их микроскопии: яйца в корочках деформированы, расплода нет. Визуально – ушные раковины менее красные, отторжение струпьевидных корочек, частичное очищение слухорых проходов;

при пальпации – местная температура не повышена.

На 7 сутки – микроскопия не проводилась, т.к. произошло полное отторжение корочек и освобождение слухового прохода. Животные ведут себя спокойно, аппетит сохранен, уши не чешут.

В таблице 9 приведены данные по эффективности ряда составов в пределах обозначенных выше. Из этой таблицы следует, что данный состав дат 100% гибель имаго клещей и яиц при концентрации S-фенвалерата 0,006% и концентрации феноксиэтанола 0,1%.

Увеличение концентрации ДВ (действующего вещества) и феноксиэтанола также обеспечивает 100% гибель имаго и яиц.

Где: ДМСО – диметилсульфоксид;

ИПС – изопропиловый спирт;

ПЭГ-400 – полиэтиленгликоль.

Снижение концентрации феноксиэтанола в составе данного препарата не обеспечивает 100% гибели яиц. А при обработке яиц составом «Пурофен» без феноксиэтанола или просто дистиллированной водой – происходит выплод живых особей клещей из яиц. Но, если обработать «Пурофеном» клещей – наблюдается их 100% гибель.

Таким образом, можно сказать, что «Пурофен» обладает только акарицидным действием.

На следующем этапе проводилась обработка лабораторных животных (кроликов), зараженных псороптозом в условиях опыта. Для этого, всем кроликам (5 голов), обрабатывали внутреннюю поверхность ушной раковины составом «Пурофен» с феноксиэтанолом в рабочей концентрации (путм закапывания в каждое ухо при помощи шприца, из расчта 1 мл на ухо). После закапывания препарата, необходимо слегка помассировать уши.

На основании исследования соскобов, взятых от животных после обработки «Феноксифеном» в приведнных выше разведениях установлено, что эффективность препарата при псороптозной инвазии составила 100% уже при самом сильном разведении (0,15мл препарата на 100мл воды). Об этом свидетельствует отсутствие на 3 сутки опыта живых клещей, а к 7 суткам, при микроскопии соскобов, различима деформация и частичное разрушение оболочки яиц паразитов, молодого расплода нет.

Отсутствуют также клинические признаки псороптоза у кроликов.

Подобные испытания «Феноксифена» на кроликах, больных псороптозом были проведены в лабораторных условиях в г. Тюмень и р. Беларусь (г.

Витебск), получены положительные результаты.

Заключение: зафиксировано, что препарат «Феноксифен», при введении в ушную раковину в дозе 1мл готовой эмульсии, приготовленный путм эмульгирования разных объмов препарата (0,15 мл; 0,3 мл; 0,6 мл; 1,2 мл) и мл воды, дат положительный результат даже при самой низкой концентрации, что делает его расход экономным. Кроме того, установлено, что «Феноксифен»

обладает акарицидним и овицидным действием уже после однократной обработки, что также позволяет снизить расход препарата и кратность обработок. Отрицательного влияния препарата на организм животных не выявлено.

Следовательно, «Феноксифен», для достижения положительного результата, можно применять во всех выше перечисленных разведениях с целью профилактики и лечения псороптоза у кроликов. Но, чем концентрация препарата выше, тем это менее экономически выгодно (больший расход препарата и большие материальные затраты).

3.6. Изучение влияния феноксифена на организм кроликов Исследования проводили на кроликах в виварии МГАВМиБ им.

К.И.Скрябина. Животные были подобраны по методу аналогов с учетом возраста и массы тела. В результате было сформировано две группы животных:

первая группа – контрольная, вторая – подопытная.

Для изучения препарата кроликам подопытной группы в вечернее время с помощью шприца вносили в каждую ушную раковину 5 мл феноксифена с последующим массажем. Кровь для исследований брали из ушной вены натощак. Материалом для биохимических исследований служила сыворотка крови кроликов. Результаты исследований биохимического состава крови кроликов при однократном введении препарата представлены в таблице 10.

Изменение биохимических показателей сыворотки крови кроликов при однократном введении феноксифена (n=5, Р0,05) -амилаза, 701,33+ 697,8+ 699,66+ 702,33+ 697,33+ 700,33+ 704,0+ ЛДГ, МЕ/л 348,66+ 350,66+ 346,33+ 349,66+ 350,33+ 352,33+ 350,0+ Мочевая к- 41,04+ 42,23+1 39,26+0 40,44+0 38,66+ 39,85+ 44,62+ мкмоль/л Содержание -амилазы у контрольных животных составило 704,0 + 7,78 МЕ/л. В подопытной группе содержание -амилазы было в пределах физиологической нормы. О норме активности -амилазы в сыворотке крови судили по здоровым животным-аналогам.

Наиболее широко при диагностике фукционального состояния печени применяется определение АсАТ и АлАТ, а также соотношение активности АсАТ/АлАТ (коэффициент де Ритиса), который в норме составляет 1,33. В подопытной группе коэффициент де Ритиса в течение всего опыта был равен 1,33. В подопытной группе изменения активности гамма-глутамилтрансферазы и лактодегидрогеназы по сравнению с контрольной группой недостоверны.

Содержание холестирина у контрольных животных составило 1,89 + 0, ммоль/л. После однократного введения феноксифена колебания содержания холестирина было в пределах физиологической нормы.

Содержание креатинина у контрольных животных составило 96,35 + 7, мкмоль/л. В подопытной группе содержание креатинина было в норме.

Содержание глюкозы, мочевой кислоты, мочевины после введения феноксифена в течение всего опыта было в пределах физиологической нормы.

В нашем опыте различие между подопытной и контрольной группами не достоверно (Р0,05), что позволяет сделать вывод, что различий действительно нет.

Во второй стадии опытов изучили влияние двукратного применения феноксифена. Были сформированы две группы: подопытная и контрольная.

Препарат вводили в каждую ушную раковину в дозе 5 мл двукратно с интервалом 24 часа. Результаты исследований представлены в таблице 11.

Содержание -амилазы у контрольных животных составило 704,0 + 7, МЕ/л, у животных подопытной группы наблюдали снижение активности амилазы на 5-й и 7-й дни, которая нормализовалась достаточно быстро на день (696,0 + 12,3 МЕ/л). В подопытной группе наблюдали понижение коэффициента де Ритиса до 1,06-1,31, к 7 дню это соотношение полностью восстановилось.

Биохимические показатели сыворотки крови кроликов при двукратном -амилаза, 699,3+ 701,33+ 595,33+ 604,66+ 697,0+ 696,66+ 704,0+ ЛДГ, МЕ/л 348,33+ 355,0+ 337,66+ 346,66+ 349,66+ 347,0+ 350,0+ Креатинин, 92,82+ 92,82+ 58,35+ 79,56+ 93,71+ 95,47+ 96,35+ мкмоль/л В подопытной группе изменения активности гаммаглутамилтрансферазы и лактадегидрогеназы по сравнению с контрольной группой недостоверно.

Содержание холестирина у контрольных животных составило 1,89 + 0, ммоль/л. После двукратного введения феноксифена колебания содержания холестирина было в пределах физиологической нормы.

Содержание креатинина у контрольных животных составило 96,35 + 7, мкмоль/л. В подопытной группе на 5 и 7-й дни наблюдали понижение содержания креатинина (58,35 + 4,42 и 79,56 + 5,3 ммоль/л соответственно). Но понижение креатинина не имеет клинического значения.

Содержание глюкозы, мочевой кислоты и мочевины у подопытных кроликов было в пределах физиологической нормы.

В конце опыта (на 21-е сутки) различие между подопытными и контрольными животными не достоверно (Р0,05).

4. Обсуждение результатов собственных исследований Научная работа по теме диссертации проводилась в период с 2003 по гг. на кафедре паразитологии, эпизоотологии ФГБОУ ВПО МГАВМиБ.

Для лечения псороптоза кроликов мы применяли препараты Пурофен и Феноксифен. В результате исследований установлено, что Феноксифен обладает выраженным акарицидным действием против клещей Psoroptes cuniculi как in vitro, так и in vivo.

Анализ результатов по изучению овоцидной активности говорит о том, что препарат обеспечивает 100% гибель яиц клещей Psoroptes cuniculi, соответственно.

Остаточное акарицидное действие в условиях in vivo незначительно короче, чем в условиях in vitro. Так остаточное действие 0,1%-ного раствора отодектина и 1%-ного раствора дектомакса в условиях in vitro составило 22 (21-23) и 28 (26а в условиях in vivo 18 (16-20) и 24 (23-25) дней соответственно. Препараты группы синтетических пиретроидов обладают меньшим остаточным акарицидным действием, так 0,1%-ная водная эмульсия энтомозана и 0,01%-ная водная эмульсия энтомозана — С(супер) в условиях in vitro обеспечивают остаточное акарицидное действие 9-11 и 14-18 дней, а в условиях in vivo 7-9 и 14-16 дней соответственно.

При изучении влияния данных акарицидов на организм кроликов установлено, что препараты, группы синтетических пиретроидов оказывают незначительное раздражающее действие на слизистую оболочку глаз кроликов, а при нанесении вышеназванных препаратов на неповрежденную кожу не оказывали негативного влияния на общее состояние животных.

синтетическихпиретроидов на морфологические и биохимические показатели крови кроликов установлено, что все исследуемые параметры остаются в пределах физиологической нормы. В первые сутки после обработки происходит восстановление данных показателей происходит в течение следующих суток.

Изменений в лейкоцитарной формуле не наблюдается.

При проведении анализа биохимических показателей установлено, что показатели общего белка и альбуминов находятся в пределах физиологической нормы во всех опытных группах. Показатели белковых фракций в опытных группах находятся в пределах физиологических норм, в опытной группе после применения 0,1%-ной водной эмульсии энтомозана, через сутки происходит повышение содержания а-глобулинов до 13,88% против 11,08% в контроле, на третьи сутки после применения препарата этот показатель снизился до 12,0%.

По результатам исследований можно сделать следующий вывод, что обработка животных препаратам группы авермектинов и синтетических пиретроидов не оказывает отрицательного влияния на морфо-биохимические показатели крови кроликов.

Невысокие дозы испытуемых акарицидных препаратов не оказывают вредного влияния на организм кроликов, одновременно обеспечивая высокий терапевтический эффект.

При изучении терапевтической эффективности, вышеназванных препаратов, в предварительных опытах нами установлено, что выздоровление больных кроликов происходит от двукратной подкожной инъекции отодектина в дозе 0,2 мл/кг массы, однократной инъекции дектомакса в дозе 0,02 мл/кг массы или введения в ушную раковину 0,1% - ной эмульсии энтомозана или 0,01%-ной водной эмульсии энтомозана — С (супер), при двукратной обработке. При более низкой дозе и концентрации препараты были не эффективны.

Результаты предварительных опытов были потверждены в расширенных опытах на 2050 животных. Выздоровление животных отмечалось после двукратной инъекции отодектина в дозе 0,2 мл/кг массы, с интервалом 10 дней;

однократной инъекции дектомакса в дозе 0,02 мл/кг массы, двукратной обработки 0,1%-ной эмульсией энтомозана или 0,01%-ной эмульсией энтомозана - С (супер) с интервалом 7 дней. При наблюдении за животными в течение 60 дней рецедивы заболевания не отмечались. Применение данных препаратов для лечения псороптоза наряду с выздоровлением способствовали восстановлению морфологических и биохимических показателей крови кроликов до уровня физиологических норм уже на 7-е сутки после проведенного лечения, только эозинофилы достигали нормы на 14-е сутки. Кроме того, все вышеназванные препараты являются экономически выгодными для лечения псороптоза у кроликов — экономичекая эффективность на рубль затрат при применении отодектина составила 7,6 руб., дектомакса 12,5 руб., энтомозана и энтомозана - С (супер) 17,2 и 15,3 руб сответственно. Полученные результаты позволяют сделать следующие выводы.

По результатам электронной микроскопии установлено, что у клещей рода Psoroptes длинностебельковые амбулакры на лапках ног первой и второй пары конечностей имеются у всех возрастных фаз. У женских и мужских протонимф, взрослых самок и мужских телеонимф такие амбулакры есть на четвртой паре конечностей. У женских телеонимф лапки третьей и второй пар конечностей без амбулакров. У самцов длинностебельчатые амбулакры имеются на лапках первой, второй, третьей пары и по два короткостебельчатых амбулакра на лапках четвртой пары конечностей. Все щетинки клещей гладкие, в большинстве волосовидные, на туловище – немногочисленны.

Гнатосома длинная, конусовидная; ротовой аппарат приспособлен для прима жидкой пищи. Хелицеры псороптидных клещей режуще-колющего типа.

Учитывая данные по строению гипостомы клещей, можно увидеть, что в процессе эволюции их ротовой аппарат усовершенствовался:

хитинизированные 2-члениковые хелицеры;

- хелицеры более вытянуты и снабжены зубовидными выростами;

- сильное развитие мышц хелицер и как следствие их сокращение помогает разрезанию эпидермиса кожи животного.

- появление на апикальной части гипостом полулунных органов и языковидных выростов, способствующих добыванию и приму жидкой пищи из тканей животного.

На втором членике педипальп у клещей всех возрастных фаз отмечено наличие двух хет: вентрально-боковой и дорзальной.

У самцов опистосомальный щиток крупный, шестиугольной формы, опистосомальные лопасти широко расставлены и хорошо развиты. У самки протонимф и телеонимф копулятивные бугры высокие отстоят друг от друг на расстояние равное высоте бугра.

2. При заражении кроликов клещами P. сuniculi уже на 5-й день произошли изменения гематологических показателей. Снизилось количество эритроцитов, уровень гемоглобина, возросло количество лейкоцитов. К 15-му дню после заражения количество эритроцитов снизилось на 27,48-47-54%, уровень гемоглобина на 15,31-38,46%, количество тромбоцитов на 32,96-60,69% по сравнению с показателями до заражения. Количество лейкоцитов возрастало на 17,44-60,52% по сравнению до заражения.

3. Анализируя активность факторов неспецифического иммунитета у кроликов, больных экспериментальным псороптозом, и сравнивая е активность у здоровых животных, за период наблюдения у больных кроликов бактерицидная активность сыворотки крови снижалась на 30,2–55,46% по сравнению со здоровыми животными.

4.Общее количество лейкоцитов увеличилось у больных животных по сравнению с кроликами контрольной группы. Фагоцитарная активность лейкоцитов к 25-му дню заражения у кроликов опытной группы была практически идентична таковой у здоровых животных в контрольной группе. К 45-му инвазированных кроликов соответствовала таковой у здоровых животных, фагоцитарное число было на 26,65% ниже, чем у здоровых животных и на 28,52% ниже, чем до заражения.

5. У кроликов зараженных P. cuniculi к 10-му дню после заражения время кровотечения (ВК) увеличилось в 1,87 раз, время свертывания крови (ВСК) увеличилось в 1,4 раза, количество тромбоцитов (Т) уменьшилось в 1,67 раз по сравнению с периодом до заражения. К 15-му дню после заражения продолжительность времени кровотечения увеличилась в 2,09 раз, время свертывания крови – в 1,73 раз, а количество тромбоцитов уменьшилось в 1, раз по сравнению с периодом до заражения. К 45-му дню после заражения время кровотечения у кроликов данной группы было в 1,47 раза больше показателей до заражения, время свертывания крови в 1,49 раз превышало продолжительность его до заражения, и количество тромбоцитов в 1,43 раза было ниже количества до заражения.

гипопротеинемия, которая наиболее ярко выражена в период с 20 по 45-й день после заражения.

7. В материале от зараженных кроликов, убитых на 60-66 сутки, обнаружена его обсемененность микрофлорой. Проведенные исследования показали, что наибольшей микробной обсемененности подвергается печень, мезентериальные лимфоузлы, селезенка. При этом идентифицировали следующие микроорганизмы: Proteus vulgaris, Pr. mirabilis, Pr. rettgeri, Bacillus paracolli, Salmonella enteroditis, Cocci.

8.Наиболее оптимальная концентрация феноксифена, имеющая овицидное действие - 0,048%. 100% гибель имаго клещей и яиц происходит при концентрации S-фенвалерата 0,006% и концентрации феноксиэтанола 0,1%.

5. Практическое использование полученных результатов 1. Лекарственный препарат Феноксифен, обладающий акарицидной и овоцидной активностью, рекомендуется для применения в кролиководстве для лечения больных псороптозом кроликов. Феноксифен необходимо применять наружно, однократно, закапывая в каждое ухо больного псороптозом кролика по 1 мл препарата.

2. Результаты сканирующей электронной микроскопии по изучению морфологических половых и возрастных особенностей клещей Psoroptes cuniculi, а также данные микрометрических измерений клещей и яиц рекомендуется использовать в ветеринарных лабораториях при постановке диагноза на псороптоз кроликов.

3. Результаты исследований по изучению морфологии клещей P. cuniculi и терапевтической эффективности Феноксифена при псороптозе кроликов рекомендуется использовать в учебном процессе в ВУЗах РФ по дисциплине «Паразитология».

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

("Методические указания по испытанию пестицидов, предназначенных для борьбы с эктопаразитами животных", Москва - 1973, С 12-13), в частности "Испытание эффективности препаратов против клещей -возбудителей псороптоза".

1. Аббасов Т.Г. Борьба с арахно-энтомозами животных и птиц / Т.Г. Аббасов, В.А. Поляков // Проблемы ветеринарной санитарии и экологии: сб. науч.тр. М. - 1998. - т. 106. - с. 59- 2. Аббасов Т.Г. Влияние перметрина на воспроизводительную функцию кроликов / Т.Г. Аббасов, СБ. Аббасов // Проблемы ветеринарной санитарии и экологии: сб. науч.тр. - М. - 1998. - т. 105.-е. 25- 3. Аббасов Т.Г. Псороптоз (ушная чесотка) кроликов и препараты, применяемые при лечении животных /Т.Г. Аббасов, СЕ. Шерешкова // Проблемы ветеринарной санитарии, гигиены и экологии. - М. - 2004. — т. 116.-е. 114Аббасов Т.Г. Препараты из группы пиретроидов для борьбы с эктопаразитами животных / Т.Г. Аббасов, Поляков В.А. // Ветеринарая патология. -М. - 2005.

- №2. - с. 15- 5. Адетунджи Б. Распространение, патогенез и клинические проявления саркоптоидозов у кроликов / Б. Адетунджи, А.И. Майоров // Труды Всерос.

Института гельминтологии им. К.И. Скрябина. - М. - 2001. - т.37. - с.29- 6. Адетунджи Банколе Саркоптоидозы кроликов: усовершенствование терапии и профилактики: автореферат дис. канд. вет. наук / Б. Адетунджи; Мое. гос.

7. Акбаев М.Ш. Паразитология и инвазионные болезни животных / М.Ш.

Акбаев, Ф.И. Василевич, А.Р. Российцева. - М.: ВО «Агропромиздат», 1992.-с.

364- 8. Акбаев М.Ш. Практикум по диагностике инвазионных болезней животных/ 9. М.Ш. Акбаев, К.И. Абуладзе, В.И. Тараканов, А.В. Степанов,/ В.Г. Меньшиков, Ф.И. Василевич, Т.Н. Федосеев. - М.: Колос, 1994. с. 188- 10. Андриенко К.П. Упрощенная методика обнаружения чесоточных клещей.

Кожные болезни животных/ К.П. Андриенко // Тр. Гос. ин-та ветерин.

дерматологии. - 1943. - т.1. - с. 180- 11. Андричук Б. В. Эффективность пиретроидных препаратов при псороптозе овец / Б.В. Андричук // Вопросы вет. токсикологии, энтомологии и дератизации. - М. 1987.-е. 103- 12.Архипов И.А. Оценка противопаразитарной активности Дектомакса / И.А.

Архипов, К.Л. Мальцев, С.Д. Дурдусов, Г.М. Лазарев, Р.С. Садыков // Ветеринария. - 1997. - №2. - с. 13. Афанасьева А.И. Сравнительная терапевтическая эффективность акарицидных препаратов при псороптозе кроликов / А.И. Афанасьева, К.Д., Архипова, И.В. Богданов. // Актуальные проблемы патологии животных и человека. - Барнаул. - 1996. - с. 14. Ахмадеев Р.Н. Новые лекарственные средства при псороптозе кроликов / Р.Н. Ахмадеев, Д.К. Червяков // Вопросы химизации сельского хозяйства в Татарской АССР - 1985. - с. 128- 15. Басистый П.А. Мнение практического врача / П.А. Басистый // Ветеринария. - 1985. - №2. - с. 16. Бауман В.В. Жизнепособность яиц клещей-накожников при низких температурах/ В.В. Бауман// Ветеринария. - 1946. - №2. - с. 17. Богданов Н.Н. Курс кожных болезней животных / Н.Н. Богданов. - М.:

Сельхозиздат, 1936.-с. 18. Бондаренко В.О. Физико-химические, токсические свойства и акарицидная активность препарата биорекс / В.О. Бондаренко // Сб. науч. тр./ Всерос. гос.

НИИ контроля, стандартизации и сертификации вет. препаратов. — 1996.Т.

60.-С.19- 19. Буланова-Захваткина Е.М. Семейство Psoroptidae Can. — чесоточные клещи накожники и кожееды / Е.М. Буланова-Захваткина // Клещи грызунов фауны СССР. -М.-Л. 1955. -с. 119- 20. Бурик В.В. Эффективность некоторых препаратов при чесотке кроликов и видовая принадлежность возбудителя / В.В. Бурик, В.В. Бондаренко // Болезни животных и меры борьбы с ними: материалы 4 научно-практич.

конференции по проблемам ветеринарии Приморского края 12-14 сентября 1990 года Уссурийск Приморский с.-х. институт. - Владивосток. — 1991. — с.

87- 21. Водянов А.А. К вопросу видовой специфичности накожниковых клещей / А.А.Водянов // Диагностика, лечение, профилактика инфекционных и паразитарных заболеваний сельскохозяйственных животных. — Ставрополь, 1986. - с.72- 22. Водянов А.А. Стратегия борьбы с саркоптоидозами сельскохозяйственных животных / А.А. Водянов // Состояние, проблемы и перспективы развития ветеринарной науки России. - М., 1999. - т.2. - с. 26- 23. Волков Ф.А. Этапы и перспектива развития синтеза пиретроидов / Ф.А.

Волков, B.C. Промоненков. - М., 1984. - с. 24. Волков Ф.А. Экономическая эффективность препаратов при псороптоидозах животных / Ф.А. Волков, М.Н. Корешков // Методология мероприятий по профилактике и ликвидации болезней с./х. животных: сб.

научн. трудов ИЭВС и ДВ. - Новосибирск, 1995. - с.211- 25. Гарипов Т.В. Фармакология сульфоксидов нефтехимического синтеза / Т.В. Гарипов // Сб. науч. тр. Ленингр. вет. ин-т. - Л., 1989 (1990). - №106.

- с.29-32.

26. Гарипов Т.В. Влияние сульфоксидов на естественную реактивность кроликов пораженных псороптозом / Т.В. Гарипов, А.С. Гасанов // Физиол.аспекты ветеринарии и зоотехнии. — Казань, 1994. — с.69- 27. Гончаров А.П. Особенности поведения кроличьего накожника в условиях внешней среды / А.П. Гончаров // Харьковский вет. ин-т. — Десятое совещание по паразитологическим проблемам и природно-очаговым болезням 22-29 октября 1959. - М. - Л., 1959. - с. 28. Гончаров А.П. Морфологические особенности стадий развития кроличьего накожника / А.П. Гончаров // Сб. трудов Харьк. вет. ин-та. — Харьков, 1960.

-T.24.-C.321- 29. Горбунов Ф.П. Гипосульфитотерапия ушной чесотки кроликов / Ф.П.

Горбунов, О.М. Протопопова // Кролиководство. - 1935. - №9. - с. 30. Громов В.П. Болезни кроликов / В.П. Громов. - Свердл., 1963. - 268с.

31. Гутира Ф. Частная патология и терапия домашних животных / Ф. Гутира, И. Марек. -М.: Сельхозиздат. 1934. - с.743- 32.Демьяненко Л.Л. Морфо-биологические особенности возбудителя и меры борьбы с псороптозом кроликов: автореф. дисс....канд. биол. наук / Л.Л.

Демьяненко; Баш ГАУ. - Уфа, 2004. - 23с.

33. Демьянович М.П. Основы гипосульфитотерапии чесотки / М.П.

Демьянович // Тр. ин-та вет. дерматологии. - 1938. - т. 1. - с.6- 34. Добычин Н.П. Изучение наиболее эффективных методов диагностики чесотки домашних животных/ Н.П. Добычин // «Советская ветеринария». с. 35- 35. Дубовой Б.Л. Децис для борьбы с псороптозом кроликов / Б.Л. Дубовой, В.А. Циммерман // Актуальные вопросы диагностики и борьбы с болезнями с./х. животных. - Ставорополь, 1999. - с.177- 36.Дубинин В.Б. Колебания численности популяций постоянных наружных паразитов млекопитающих и их причины /В.Б. Дубинин // «Журнал общей биологии». -1950. -т.П. - №2.

37.Дубинин В.Б. Чесоточные клещи, их биология, вред в сельском хозяйстве, меры профилактики и борьбы с ними / В.Б. Дубинин. - М.: Советская наука, 1954.-172с.

38. Дубинин В.Б. Надсемейство Sarcoptoidea (Megn. et Trt.)- чесоточные клещи /В.Б. Дубинин // Клещи грызунов фауны СССР. - М. - Л.,1955. - с.110-124.

39. Дубинин В.Б. Современное состояние вопроса о классификации чесоточных клещей. Чесоточные клещи, их биология, вред в сельском хозяйстве, меры профилактики и борьбы с ними / В.Б. Дубинин. - М.:

Советская наука, 1954. — с. 12- 40. Дубинина Е.В. Аллергические компоненты клещевых заболеваний/ Е.В.

Дубинина // Возбудители и переносчики паразитов и меры борьбы с ними.

- Ташкент, 1988. — с. 41. Дьяконов Л.П. Паразитарные болезни сельскохозяйственных животных / Л.П. Дьяконов, И.В. Орлов, И.В. Абрамов и др. -М.: Агропроиздат, 1985. — с.

287- 42. Жуленко В.Н. Ветеринарная токсикология / В.Н. Жуленко, М.И.

Рабинович, Г.А. Таланов. - М.: «Колос С», 2004. - с.48- 43. Ильященко Н.В. Аэрозольные пены акарицидов при псороптозе кроликов /Н.В. Ильященко, М.А. Симецкий, Е.И. Милинец // Ветеринария. — 1979. с.70- 44. Ильященко В.И. Некоторые вопросы биологии клещей Psoroptes cuniculi /В.И. Ильященко // Вестник с/х науки Казахстана. Алма-Ата, 1981. - №5. — с.72- 45. Ильященко В.И. Исследование метаморфоза клещей рода Psoroptes (Psoroptidae) / В.И. Ильященко // Химиопрофилактика, патогенез и эпизоотология паразитов сельскохозяйственных животных. Алма-Ата, 1981.-С.68- 46. Ильященко В.И. Присоски на конечностях клещей как диагностический тест рода Psoroptes/В.И. Ильященко // Ветеринария. — 1982. — №8. – с.38- 47. Ильященко В.И. К морфологии клещей рода Psoroptes / В.И. Ильященко// Ветеринария. - 1984. - №4. - с.36- 48. Ильященко В.И. Исследование биологии псороптозных клещей / В.И.

Ильященко // Пятое. Всес. Акарол. Совещание: тезисы докладов. - Фрунзе, 1985.С.139- 49. Ильященко Н.В. Саркоптоидные клещи (Acarina Psoroptidae, Sarcoptidae).

Совершенствование методов диагностики и борьбы с ними: автореф. дис.

д-ра биол. наук / Н.В. Ильященко; - Кустанай, 1992. - 42с.

50. Ильященко Н.В. Подготовка саркоптоидных клещей к исследованию в сканирующем электронном микроскопе / Н.В. Ильященко // Сб. науч.

трудов / Всерос. НИИ вет. санитарии, гигиены и экологии. - М., 1995. — Т.97.-С.16- 51. Катаева Т.С. Ивомек в борьбе с псороптозом кроликов / Т.С. Катаева // сельскохозяйственной продукции: Тез. докл. обл. научно-практической конф. 24 декабря 1988 г. - Тюмень, 1987. - с. 52. Катаева Т.С. Псороптоз кроликов и меры борьбы с ним в Свердловской области / Т.С. Катаева, А.Н. Давлетшин, СМ. Тихомиров // Рекомендации.

-Свердловск, 1989.- 14с.