[ «Н.П.ИВАНОВ доктор ветеринарных наук, профессор, академик НАН РК К.А.ТУРГЕНБАЕВ доктор ветеринарных наук, профессор А.Н. КОЖАЕВ кандидат ветеринарных наук ИНФЕКЦИОННЫЕ БОЛЕЗНИ ЖИВОТНЫХ Том 4 Болезни птиц, плотоядных и ...»
При спонтанном заражении инкубационный период может достигать 5 лет. У зараженных коз он длится 7-22 мес.
Первые признаки болезни проявляются временами, поэтому диагностировать болезнь трудно. Больные овцы не выходят из овчарни или бегут навстречу собаке, к закрытым воротам. Такое состояние длится около 30 мин. У некоторых овец замечают неподвижный взгляд, зрение ослабевает или наступает слепота.
Кожа становится грубой, шерсть взъерошена (в результате раскручивания волоса), жесткая, а кончики волос белеют. Описанная стадия длится около месяца, а иногда и дольше.
С развитием болезни животные трутся о различные предметы и расчесывают область ягодичных мышц, основания хвоста, лба, затылка и верхней части шеи и груди. Эти участки кожи плотные, изъязвлены и покрыты струпьями. Некоторые животные расчесывают зубами область запястья и скакательного сустава или трут носом эти места (на носу обычно возникает папулезная сыпь и он опухает). Отмечается атаксия. Шаг укорочен, задние конечности не сгибаются в скакательном суставе. Равновесие нарушено. В тяжелых случаях болезни копытца задних конечностей во время движения волочатся. Животное пугливо, насторожено и возбудимо, зрачки расширены, наблюдается пучеглазие, нистагм. Голову и шею овца держит напряженно и выше чем обычно. Вскоре после развития параличей задних конечностей животное погибает. Описанная стадия длится 4- нед, иногда несколько мес.
У больных коз характерного трения телом о неподвижные предметы не наблюдают, но они чаще обычного чешутся и грызут зубами кожу и характерно поднимают хвост. От проявления первых признаков до полного развития болезни проходит 2-3 мес. В последней стадии болезни развивается коллапс, скорее связанный с невозможностью удержать равновесие, нежели с параличом конечностей.
Гистологические изменения. В срезах коры мозга мышей внутри разбухших отростков нейронов находят большое количество частиц диаметром 32- нм с полупрозрачным центром, толщиной стенок 9,5 нм, а также палочковидные образования такого же диаметра с шипами и др. необычные структуры. Подобные структуры наблюдали внутри нейронов мозга экспериментально зараженных овец. В нейронах, пресинаптических окончаниях и в осевых цилиндрах больных овец обнаружены частицы двух типов.
Диагноз ставят на основании симптомов болезни. Ведущими признаками являются неослабевающий зуд и связанные с этим расчесы, особенно в области запястных и скакательных суставов, чрезмерная возбудимость, расстройство координации движений, мышечная дрожь, нистагм, общая слабость и истощение.
В результате трения шерсть выпадает и появляются голые пятна. Пробой на зуд вызывают характерное состояние у овцы. При умеренном сжимании пальцами кожи в области ягодичных мышц, поясницы, основания хвоста и других мест у овцы возникает зуд. Она поднимает голову, делает захватывающие движения губами, высовывает язык. Одновременно может возникать и мышечная дрожь.
При гистологическом исследовании наблюдается выраженная вакуолизация нейронов продолговатого мозга. Кроме вакуолизации нейронов показательны макроскопические и микроскопические повреждения и дегенерация мускулатуры.
Экспериментальная инфекция. До 1936 г. все представления о скрепи основывались на клинических наблюдениях за животными. В 1936 г. Кюилль и Шнелль показали возможность заражения здоровых овец интрацеребрально и подкожно, используя суспензию головного и спинного мозга больных животных.
Инкубационный период продолжался до 1 года.
Показано, что естественная резистентность к скрепи обусловлена генетической предрасположенностью. Возбудитель может пассироваться на козах и передаваться от них овцам. При пассажах агента спрепи на козах наблюдали два различных синдрома: drowsy (глубокое угенетение, сонливость) и scratching (доминирование явлений зуда и чрезмерной возбудимости). В дальнейших пассажах каждый из них воспроизводился, и у вновь заражаемых животных развивался только переходной синдром.
При интрацеребральном заражении коз (агентом, адаптированным к мышам) симптомы болезни появлялись через 58-77, а при подкожном - через 89- нед. При подкожном заражении агент первоначально размножался в лимфоидных тканях (главным образом лимфоузлах). Через 92 нед он был обнаружен в спинном мозге и в стволовой части головного мозга. Клинически болезнь проявлялась тогда, когда концентрация агента в тканях мозга составляла около 3 lg мышиных интрацеребральных ЛДзо на 30 г ткани. Концентрация прионов в слизистой носовой полости, слюнных железах, тканях кишечника была очень низкой.
У зараженных мышей инкубационный период продолжался от 4 до7 мс.
Задолго до появления клинических признаков у них отмечалось прогрессивное снижение двигательной активности, а ко времени появления клиники скреипи начальный спад сменяется подъемом активности. У мышей описано три различные синдрома почесухи: чрезмерная возбудимость (длительность болезни несколько дней); ожирение (более длительное хроническое течение); и летаргия (самый обычный синдром, длительность болезни несколько нед). Во всех случаях исход болезни смертельный.
При периферическом заражении мышей агент сначала размножался в селезенке, а затем уже в мозге. Медленное накопление его в мозге возможно обусловлено тем, что репликация возбудителя происходит лишь в некоторых органах. Неизвестно в каких клетках размножается возбудитель и какие механизмы участвуют в его инактивации. По мнению Фрезер и Оутрем (1975) инкубационный период при скрепи зависит от генотипа мышей, штамма, дозы агента и пути заражения, а по сообщению Дикенсона (1975) этот период зависит от гена sine (аллели S7 и Р7). У гетерозиготных мышей инкубация зависит от штамма. Очевидно указанны ген определяет места репликации агента скрепи и характерные черты медленной инфекции. К агенту скрепи очень чувствительны мышиполевки, хомячки, песчанки. Удается экспериментальное заражение норок мозгом больных овец. Помимо указанных видов животных удалось установить патогенность агента скреипи для обезьян пяти видов: резусов, циномольгусов, капуцинов, паукообразных и саймири. Инкубационный период продолжается 1- лет при инокуляции в мозг.
Культивирование. Помимо восприимчивых животных агент скреипи культивируется в культуре клеток нейронов мышей. Установлено, что инфекционность агента в культуре перевиваемых клеток SMB связана с плазматическими мембранами.
Иммунитет. Не формируется.
Специфическая профилактика. Отсутствует.
Лечение. Неэффективно.
Организация профилактических и оздоровительных мероприятий.
Недопущение попадания в хозяйство животных из неблагополучных стад. Уничтожение или убой (мясо от животных неопасно для людей) всех овец неблагополучной отары при положительном диагнозе, уничтожение субпродуктов убоя, проведение жесткой дезинфекции и ограничение длительное время завоза в данное хозяйство овец.
Согласно рекомендациям ЕС стада овец признают свободными от скрепи, если заболевание не регистрируется минимум 6 лет.
Вопросы для самопроверки:
1. Определение болезни.
2. Характеристика возбудителя.
3. Эпизоотологические особенности.
4. Клинические признаки и патоморфологические изменения.
5. Диагностика болезни.
6. Организация профилактических и оздоровительных мероприятий при 32.2 ТРАНСМИССИВНАЯ ЭНЦЕФАЛОПАТИЯ
НОРОК
Трансмиссивная энцефалопатия норок – заразная болезнь, характеризующаяся очень продолжительным инкубационным периодом, симптомами поражения нервной системы и патологоанатомическими изменениями в ЦНС. С 1963 г данное заболевание считается распространенным повсеместно.
Возбудитель.Прион сходен с возбудителем скрепи. Различаются агенты тем, что возбудитель энцефалопатии норок может инфицировать хомячков, коз, полосатых скунсов, енотов, макакрезус, белок и тупохвостых макак, но не поражает мышей линии Swiss. Агент скрейпи патогенен для мышей, но менее патогенен для приматов. В этом аспекте возбудитель энцефалопатии норок аналогичен возбудителям энцефалопатии человека (куру или БКЯ), которые также не патогенны для мышей и не передаются приматам.
Устойчивость. Агент устойчив к высокой температуре и УФ облучению.
Прогревание в кипящей водяной бане 15 мин, воздействие 0,3%-ным раствором формалина в течение 12 ч при 37°С не инактивирует его, 10%-ный раствор формалина в течение 20 мес снижал инфекционный титр агента более чем на 31%.
При воздействии эфира в течение 18 ч титр снижался незначительно. Агент разрушается проназой. Выделить фракцию инфекционной нуклеиновой кислоты не удалось.
Эпизоотологические данные. В естественных условиях болезнь передается при контакте больных и здоровых животных.
Клинические признаки и патоморфологические изменения. Болезнь протекает в виде эпизоотии, восприимчивы норки, а лабораторных условиях и хорьки. Инкубационный период продолжается от 5 мес до года. В естественных условиях чаще поражаются взрослые животные. Ранними симптомами болезни считается изменение внешнего вида норок. У них своеобразно изгибается хвост, грубеет мех, снижается масса тела. Во время отдыха норки резко подергивают задними лапами. Движения замедленны, появляется неустойчивость зада, постепенно нарушается координация движений. Одни норки становятся агрессивными, другие - робкими, пугливыми и малоподвижными. С прогрессированием болезни кратковременные периоды сонливости становятся более продолжительными, а сон - глубоким.
Продолжительность болезни неодинакова. У некоторых норок продромальный период продолжается от трех до 4 нед, после чего болезнь обостряется и через 5-7 дн животные погибают. У других животных клинических признаков болезни не наблюдают и только за 2-3 дн до гибели отмечают анорексию. Иногда норки с атаксией живут более 6 нед.
Видимых патоморфологических изменений нет, лишь иногда отмечают умеренную отечность мозга. Микроскопические изменения постоянно находят только в мозге: увеличение глиальных элементов, астроцитоз, вакуолизацию нейроглии, инфильтрацию, дегенерацию нейронов; некоторые нервные клетки содержат эозинофильные гранулы. Изменения обнаруживают также в лобной области коры, в обонятельных луковицах, мозолистом теле (corpus stratum). Повреждения распространяются каудально, обычно вовлекается таламус, гипоталамус, варолиев мост, продолговатый мозг. В белом веществе, мозжечке, спинном мозге поражений не бывает. У норок с прогрессирующим заболеванием в этих отделах обнаруживают ишемический некроз клеток. Микроскопические изменения при трансмиссивной энцефалопатии норок напоминают таковые при скрепи, однако у овец и коз их распределение отличается, а вакуолизация нервных клеток при скрепи менее заметна.
Диагноз ставят на основании симптомов болезни и нейрогистологических изменений, сходных с наблюдаемыми при срейпи, но отличающихся от скрепи по виду хозяина и локализации (только в ЦНС).
Экспериментальная инфекция. Удается при подкожной, внутримышечной, внутримозговой и внутрибрюшинной инъекции 1 мл гомогената мозга в разведении 105-107, а также при скармливании норкам инфицированного материала. Продолжительность инкубационного периода зависит от способа заражения и числа пассажей агента на норках. При внутримышечной инокуляции инкубационный период на 2-3 мес короче, чем при скармливании зараженного материала или естественном заражении. Кроме норок удается заразить хомячков, коз, полосатых скунсов, енотов, белок, обезьян макак-резус.
Культивирование. Возможно пока только на норках.
Иммунитет. Не формируется.
Специфическая профилактика. Отсутствует.
Лечение. Не разработано.
Организация профилактических мероприятий. Мероприятия по профилактике и ликвидации болезни включают недопущение заноса в хозяйство возбудителя с больными норками; ветеринарно-санитарный контроль поступающих кормов; запрет скармливания сырых бараньих субпродуктов; своевременную диагностику; изоляцию, убой больных и утилизацию тушек и тщательную дезинфекцию в жестком режиме.
Вопросы для самопроверки:
1. Определение болезни.
2. Характеристика возбудителя.
3. Эпизоотологические особенности.
4. Клинические признаки и патоморфологические изменения.
5. Диагностика болезни.
6. Организация профилактических мероприятий при трансмиссивной энцефалопатии норок.
32.3 ГУБКООБРАЗНАЯ ЭНЦЕФАЛОПАТИЯ
КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА
ознакомить слушателей с губкообразной энцефалопатии Цель занятия:Губкообразная энцефалопатия (ГЭ) – медленно развивающаяся болезнь ЦНС взрослого КРС, сходная со скрейпи овец, трансмиссивной энцефалопатией норок, медленными инфекциями человека (куру, болезнь Крейцфельда-Якоба). У КРС её впервые зарегистрировали в ноябре 1986 г. в Великобритании. К 1991 г.
выявили около 20 тыс. больных животных Эпизоотологические данные. Распространение болезни в Великобритании обусловил ряд факторов: значительный рост поголовья овец в 1980-е г., что, возможно, способствовало увеличению инцидентности скрепи; широкая переработка овечьих голов (экстрагирование жира и белка); применение новых химических технологий их обработки (ранее использовали автоклавирование), которые менее эффективно инактивировали агент скрепи. Гипотезу заноса болезни с кормом подтверждала более высокая заболеваемость животных в молочных хозяйствах, чем в откормочных, где дают меньше кормовых концентратов (особенно телятам). Принципиальное отличие прионов и вирусов показано в таблице 83.
Таблица 83 - Различия между вирусами и прионами (по В.В.Макарову и др. 1992)
ВИРУСЫ ПРИОНЫ
Сложные мультимолекулярные комплексы, Простой белок - модифицированная от нуклеопротеидов до липосодержащих изоформа нормального белка оболочечных структур. Обладают организма хозяина первичными свойствами живой материи Имеют собственный геном, кодирующий Не содержит генетического материавирусное потомство, включая вирусные белки ла. Белок приона кодируется генами Чувствительны к денатурирующим и модифицирующим факторам (нагревание, детергенты) Болезни больше подвержены животные молочных стад ( по сравнению с мясными), заболевали; в основном, коровы, редко – быки. Наибольшее число случаев выявили среди животных голштинофризской породы, лучшей и самой продуктивной в Англии. Связь между стадией стельности, сезоном и началом болезни не установили. В 15% пораженных стад КРС не завозили, в 20% животные не контактировали с овцами. Доказательства вертикальной и горизонтальной передачи болезни в естественных условиях между КРС (или между КРС и мелким рогатым скотом) пока отсутствуют. В зоопарках страны признаки ГЭ обнаружили у 5 видов антилоп (ньяла, канна, сернобык и др.), 2 видов оленей, изолированных и неконтактировавших с крупным и мелким рогатым скотом.Этих животных кормили то же мясо-костной мукой. Обращает на себя внимание значительное уменьшение инкубационного периода у ньялы (3 мес) и сернобыка (15 мес). Особую тревогу вызвала болезнь домашних кошек (4 случая), у них при вскрытии обнаружили признаки ГЭ (животных кормили консервами). Считают, что распространение болезни связано не с внезапной мутацией возбудителя, а с попаданием в организм КРС большого количества агента скрепи и преодолением им видового барьера; так, энцефалопатия норок возникла при скармливании им мяса больных скрепи овец. Имеет место как горизонтальная, так и вертикальная передача возбудителя. В пользу этого говорят и эпизоотологические данные о возникновении заболевания в стадах Франции, Швейцарии, Португалии и Ирландии, а также у зоопарковых жвачных и представителей семейства кошачьих.
Клинические признаки и патоморфологические изменения. Термин ГЭ применительно к КРС впервые ввели Уэлл и др. для обозначения симптомокомплекса болезни, при которой нейроны и серое вещество мозга напоминали губку, будучи пронизанными вакуолями. Эта картина была сходна с таковой в группе медленных инфекций у животных других видов(скрепи овец, трансмиссивная энцефалопатия норок, хроническое изнурение чернохвостных оленей) и человека ( куру, БКЯ). Инфекционный характер болезни подтвержден экспериментально у мышей, зараженных суспензией мозга от больных животных, у которых клинические проявлялась ГЭ).
Предполагают, что инкубационный период может составлять от 2,5 до лет. Клиническая картина складывается из следующего комплекса: состояния страха, расстройства локомоции, гиперстезия, потеря массы.
Заболевания прионной этиологии и естественно восприимчивые животные показаны в таблице 84.
Таблица 84 - Нозологические формы заболеваний разных видов животных Губкообразная энцефалопатия КРС КРС, копытные 6 и кошачьи 4 видов Подозрения фермеров возникали из-за незначительных изменений, похожих на гипомагнезию или кетоз. Первоначально агрессивность животного рассматривалась в качестве основного симптома; в настоящее же время считают, что основной признак – боязливость, а агрессивность является лишь следствием нервного состояния животных. Отмечали, что большинство животных были послушны и возбуждались только в том случае, когда к ним приближались или загоняли в угол.
У больных животных отмечали скрежет зубов, дрожание нижнего отдела шеи и плечевой области, а иногда боковых сторон туловища, редко - дрожание всего тела. Больные животные сопротивлялись попыткам их осмотра, особенно в области головы. Локомоторные нарушения на ранней стадии проявлялись в слабой атаксии задних конечностей, причем заметнее при резких поворотах животного, когда происходило заплетание конечностей, спотыкание и даже падение.
Атаксии передних конечностей обычно не наблюдали. Если животное падало, то часто поднималось на передних конечностях, демонстрируя при этом резко выраженную слабость задней части тела. Отдельные случаи патологии впервые выявлены при неудаче животного преодолеть обычные препятствия; подставки, применяемые при доении, ступеньки или скользкий спуск, отмечали также внезапную боязнь проходить в дверь. Если же такое животное заставить сделать пробежку, то можно наблюдать полную картину болезни.
Часто наблюдали также опускание таза, утрату нормальной походки и характерные рысистые движения. Передние и задние конечности животного на одной стороне двигались совместно, оно при этом покачивалось. Отмечена гиперстезия, проявлялся неадекватный ответ (испуг и падение) на звук, внезапный шум или прикосновение. Симптомы проявлялись постепенно спустя 6-8 нед с начала заболевания, с последующим нарастанием (до 4-х мес). Но обычно животных убивали раньше в связи с потерей ими продуктивности. Несмотря на нормальный аппетит, у них снижалась лактация. Прогноз в целом безнадежный. Несмотря на отдельные случаи ремиссии, болезнь, однажды проявившись, неизбежно имеет тенденцию к прогрессированию.
При вскрытии обнаруживают двусторонние симметричные дегенеративные изменения в сером веществе стволовой части мозга, в нейроглии - вакуоли яйцевидной или округлой формы, реже менее правильной формы с неотчетливыми отверстиями по краям. Выявлен также перикарион нейронов и неврит некоторых стволовых ядер (особенно дорсальных ядер блуждающего нерва), сетчатость; вестибулярные ядра и красное ядро содержали крупные, отчетливо различимые единичные или множественные внутрицитоплазматические вакуоли.
При микроскопии обнаружена картина, сходная с таковой при скрепи овец (как в световом, так и электронном микроскопах). В экстрактах головного мозга больных животных выявлены ассоциированные со скрепи фибриллы. Как указано, первые симптомы названного заболевания отмечены в апреле 1985 г., после чего инцидентность заметно увеличилась к сентябрю 1987 г. и составляла около 60 случаев в месяц (до января 1988 г.). В большей мере подвержены этой болезни молочные стада (по сравнению с мясными). Заболевали главным образом, коровы, за исключением 2-х случаев - у быков, одного подтвержденного и одного клинически подозреваемого. Все случаи ГЭ зарегистрированы у взрослых животных в возрасте от 2-х лет 9-и мес до 11 лет, при этом самая высокая инцидентность у 4-летних (3,4%), а наименьшая - у 6-летних животных (25%). Не установлено связи между стадией стельности, сезоном и началом заболевания. В 15% пораженных стад не завозили КРС, а в 20% стад контакта с овцами не выявили. Отсутствуют доказательства передачи болезни непосредственно от КРС к КРС, а также между овцами и КРС. Хотя, несомненно, у ГЭ генетический компонент и просматривается, но это не просто наследственная болезнь. В небольшой части случаев ГЭ обнаружена семейная связь между пораженными животными внутри стада и между стадами. Однако внезапное появление болезни у животных в национальном масштабе, поражение некоторых пород и кроссбредов, отсутствие общего предка или небольшой родоначальной группы еще убедительнее подкрепляет мысль о факторах, связанных с окружающей средой.
Анализ данных о закупках животных и изучение родословной быковпроизводителей, особенно в изолированных хозяйствах, привели к заключению, что ГЭ была занесена в Великобританию с импортированным КРС или распространена со спермой. Распределение случаев по месяцам и годам свидетельствовало об обширном общем источнике возбудителя.
Считается, что фактором передачи являлось воздействия на КРС скрепиподобного агента, находящегося в корме, содержащим белок жвачных. Такое явление отмечалось в 1981-1982 гг., продолжалось до июля 1988 г., когда было запрещено включать в рацион КРС белок, полученный от жвачных в форме мясокостной муки, а большинство животных было инфицировано в раннем возрасте.
По-видимому, нет оснований говорить о мутации приона-скрепи. Полагают, что видовой барьер преодолен в связи с возросшим воздействием биоагента.
Диагноз. Этиологический агент ГЭ пока не изолирован, но как и при скрепи он уникален: чрезвычайно устойчив к действию физико-химических факторов. Даже длительное автоклавирование не дает 100%-ной стерилизации материала. Диагноз на ГЭ ставят на основе патологоанатомических, клинических и эпизоотологических данных. Прижизненная лабораторная диагностика не разработана. Из-за отсутствия у животных иммунного ответа AT при ГЭ не вырабатываются, поэтому серологические реакции не используют. Специфические тесты исследования крови (или других жидкостей организма) не созданы. Окончательно диагноз можно поставить лишь посмертно, при изучении гистосрезов тканей головного мозга – при наличии в цитоплазме стволовых нейронов крупных сферических и яйцевидных вакуолей (губкообразное изменение). Как дополнительный диагностический прием для обнаружения в экстрактах мозга больных особей специфических фибрилл используют ЭМ. Ученые углубленно, на молекулярно-генетическом уровне исследуют возбудителя и самих животных для определения устойчивых пород, поскольку при скрепи обнаружен определенный ген, влияющий на чувствительность овец к агенту. Если подобную связь установят при ГЭ КРС, этот феномен будут применять в селекционной работе. При диагностировании необходимо отличать ГЭ от сходных патологий. В ранней стадии развития клинических признаков её прежде всего дифференцируют от листериоза (наблюдали их смешанное течение), бешенства, болезни Ауески, нервных форм ацетонемии и гипомагнезимии.
Параллельно с широкими исследованиями эпизоотологии и клинического течения болезни в Великобритании, США и странах ЕЭС развернуты фундаментальные исследования прионов человека и животных. Расшифрована аминокислотная последовательность прионного белка скрепи овец, ГЭ коров и приона мышей. Синтезированы специфические пептиды, получены рекомбинантные белки прионов животных в E.coli и клеточной культуре с использованием ретровирусного вектора. Разработана методика типирования штаммов энцефалопатии животных, основанная на сравнительном изучении патологии у генетически стандартной группы линейных мышей. Эти опыты показали, что источник инфекции ГЭ у коров в Англии, Швейцарии, Франции и Португалии, видимо, один и тот же: гепард, пума, оцелот и домашние кошки поражены штаммом, циркулирующим в популяции коров, и он отличается от всех известных штаммов скрепи, выделенных от овец. Однако нельзя полностью исключить, что штамм ГЭ коров происходит от какого-то штамма скрепи овец, но он существенно изменился и стабилизировался в процессе адаптации к организму КРС.
Сравнительно недавно в цереброспинальной жидкости (ЦСЖ) пациентов, страдающих БКЯ были обнаружены два белка, отсутствующие в ЦСЖ здоровых.
Эти белки происходят из нервных тканей и затем появляются в ЦСЖ, как результат патологии при этих заболевании. Ранее была установлена неполная аминокислотная последовательность этих белков, как представителей класса белков 14-3-3. Иммунологический анализ на основе использования белка 14-3-3 с высокой степенью достоверности применялся при диагностике БКЯ. Белки 14-3- оказались весьма стабильными. Иммунологический анализ с их использованием возможен для диагностики скрепи и других энцефалопатии. При исследовании на присутствие белка 14-3-3 в ЦСЖ быков, пораженных губкообразной энцефалопатией. Проводили ЭФ подготовленных проб ЦСЖ в 12%-ном ПААГ с последующим перенесением их на мембраны миллипор. Для определения у-изоформ белка 14-3-3 использовали коммерческие специфические поликлональные AT к данному белку. Результаты показали, что белок 14-3-3 давал иммунореактивную полосу у всех 10 исследованных больных быков, тогда как она имелась лишь у одного из 6 контрольных животных (вероятно из-за технических погрешностей).
Результаты, полученные на основе иммунологического анализа белка 14-3согласовываются с гипотезой о том, что этот белок спиномозговой жидкости позволяет подтвердить диагноз при наличии клинических признаков ГЭ КРС.
Изучение более ранней стадии болезни и её диагностика при помощи обнаружения белка 14-3-3 является наиболее перспективным направлением. Данный тест оказался высокочувствительным (10/10). Необходимы дальнейшие исследования животных с другими неврологическими расстройствами для оценки специфичности 14-3-3 маркера и использования его для дифференциальной прижизненной, ранней диагностики.
Губкообразные болезни прионной этиологии показаны в таблице 85.
Иммунитет. Не формируется.
Специфическая профилактика. Отсутствует.
Лечение. Не разработано.
Таблица 85 - Губкообразные энцефалопатии прионной этиологии В осприимчвые животные Спонтанное 6 видов парнозаражение копытных, кошки Распространение Локальное Глобальное Глобальное Локальное Характер эпизоЭнзоотичность Энзоотичность Спорадичность Эндемичность от/эпидем.
Способ передачи Возможность заражения
ПАТОЛОГИЯ
Возраст больных (лет) прогресс.разв.- испуганность, тревожное состояние - наруш.коорд.
spongiosus Организация профилактических и оздоровительных мероприятий. В благополучных странах основой профилактики являются: 1) недопущение завоза из неблагополучных зон или стран племенного скота, мяса, консервов, субпродуктов и полуфабрикатов, мясокостной муки, спермы, эмбрионов, технического жира, кишечного сырья и других продуктов и кормов животного происхождения от жвачных; 2) тщательный контроль за закупками племенного скота и биологических тканей, особенно из неблагополучных стран; 3) запрет скармливания жвачным мясокостной и костной муки от крупного рогатого скота и овец; 4) запрет на использование кормов и кормовых добавок любого неизвестного происхождения; 5) тщательная диагностика при любом подозрительном случае и лабораторный мониторинг проб мозга убойного крупного рогатого скота, особенно от животных старше 3 лет.
В неблагополучных странах запрещено добавлять животные белки в корм жвачным, биоткани — в рационы животных, использовать бычьи субпродукты в биологической и пищевой промышленности и т. д. Проводят диагностику ГЭКРС больных животных и уничтожение туш.
Применяют жесткие методы стерилизации и дезинфекции. Патологический материал, посуду, инструменты, спецодежду обеззараживают одним из следующих способов: автоклавированием при избыточном давлении (134 °С) не менее 20 мин; выдерживанием в течение 12 ч в одном из растворов — 4%-ном гидроксида натрия, 2%-ном гипохлорита натрия, 5%-ном хлорной извести; сжиганием в упакованном виде одноразового инструментария и посуды.
В Великобритании указанные строгие меры позволили резко снизить заболеваемость и оздоровить ряд районов страны.
Вопросы для самопроверки:
1. Определение болезни.
2. Характеристика болезни.
3. Эпизоотологические особенности.
4. Клинические признаки и патоморфологические изменения.
5. Диагностика болезней.
7. Организация профилактических и оздоровительных мероприятий при губкообразной энцефалопатии крупного рогатого скота.
ознакомить слушателей с болезнью Ибараки и мераЦель занятия:
Болезнь Ибараки (орбивирусная инфекция) – остро протекающая инфекционная болезнь крупного рогатого скота, характеризующаяся лихорадкой, язвенным поражением ротовой полости и затрудненным актом глотания.
Впервые её диагностировал Омори в Японии в 1959 - 1960 гг. и назвали в соответствии с названием префектуры.
Возбудитель. Вирус Ибараки выделен впервые в Японии (Омрри, 1959 г.).
Морфология и химический состав. Вирус имеет 2-нитевую РНК, которая в ПАТ разделяется на 12 сегментов, относящихся к 3 классам. В среднем диаметр вириона равен 55 нм, сердцевины 35 нм. Вирионы икосаэдрической формы без оболочки. Капсид, вероятно, 1-слойный и состоит из 32 капсомеров, имеющих вид полых удлинённых призм, уложенных с симметрией 5:3:2- Менее 1% вирусных частиц заключено в так называемую псевдооболочку. На срезах инфицированных клеток вирусные частицы с электронно-плотными сердцевинами связаны с внутрицитоплазматическим вирусным матриксом. Вирионы приобретают оболочку, почкуясь через мембраны клетки. Диаметр частиц, покрытых оболочкой около 100 нм. Обнаружено сходство морфологии и морфогенеза вируса Ибараки и вируса «синего языка». Вирионы вируса Ибараки формируются в цитоплазматических тельцах-включениях в виде электронноплоидных частиц диаметром 20нм, транспортируются с помощью микрофиламентов и тубулярных структур и приобретают оболочку толщиной около 20 нм, достигая диаметра 50-60 нм.
Вирионы вируса Ибараки выделяются во внеклеточное пространство при лизисе клеточных мембран и, более редко, почкованием через клеточные мембраны.
Устойчивость. Вирус Ибараки устойчив к эфиру, хлороформу, дезоксихолату, 5-йоддезоксиуридину, но чувствителен к трипсину, лабилен в среде с кислым значением рН, устойчив в среде с рН 6,4 и выше, а также к повторному замораживанию и оттаиванию; инактивируется при температуре 56°С в течение мин, при 60°С и выше через 5 мин; относительно стабилен при 37° и очень устойчив при 4°С, однако теряет инфекционность при хранении в условиях -20°С.
Антигенная структура не изучена.
Антигенная активность. Введение вируссодержащего материала вызывает образование AT, титр которых при естественном течении инфекции коррелирует с широтой распространения инфекции. Титр анти-ГА к вирусу болезни Ибараки составлял 1:320.
Антигенная вариабельность и родство. По АГ-свойствам (в серологических реакциях) вирус Ибараки отличается от вируса "синего языка". Сообщали о наличии перекрёстной РН между вирусами Ибараки и "синего языка" овец (тип ГО). Аналогичные результаты получили Луницыным А.В. и соавт. Ими не установлено АГ родство между вирусами ЭГБО и блутанга. Однако вирусы ЭГБО и болезни Ибараки сходны, что установлено в РДП, РСК и ТФ ИФА.
Гемагглютинирующие свойства не изучены.
Локализация вируса, вирусоносительство и вирусовыделение. Детально не изучены. Вирус Ибараки выделен из проб крови больных животных во время лихорадки (лихорадка кошек, обильное слюнотечение, паралич гортани). Вирус выделен из пула мокрецов Culicoides oxystoma и других видов Culicoides.
Экспериментальная инфекция. У КРС, заражённого экспериментально, болезнь протекает так же, как в естественных условиях. Омори с соавт. в 1969 г.
выделил несколько штаммов вируса в культуре бьиьих клеток при экспериментально воспроизведённой инфекции. К вирусу Ибараки чувствительны новорождённые мыши.
Культивирование. Вирус Ибараки размножается в первичных культурах клеток почки телёнка, овцы, хомячка, в перевиваемых мышиных L-клетках, ВНК-21, суспензионной культуре клеток HmLu-1 и вызывает ЦПД. В этой системе вирус достигал титра 1067,5 ТЦД50/0,1 мл. Он также культивируется в 4-5-дн КЭ при заражении их в желточный мешок (33,5°С), в мозге мышат моложе 2- нед при интрацеребральном заражении. В первичных культурах клеток почек лошади, свиньи и в культуре клеток HeLa вирус не размножается. После 6-7 пассажей в бычьих культурах клеток вирус Ибараки становится менее вирулентным для КРС.
По способности размножения в культурах клеток, КЭ и мозге инфицированных мышей-сосунов вирус Ибараки очень похож на вирус КЛО. По морфологии и циклу развития напоминает вирус "синего языка", АЧЛ и реовирусы.
Эпизоотология. Источники и пути передачи инфекции не изучены. В естественных условиях вирус Ибараки слабопатогенен для овец, однако у крупного рогатого скота вызывает тяжело протекающую инфекцию.
Сезонность инфекции (август, декабрь) и её географическое распространение (центральная и южная части Японии) позволяют предположить трансмиссивную передачу болезни. Первые больные животные появляются летом и выделяются до поздней осени. Сезонность и географическое распространение болезни зависят, очевидно, от климатических условий. Предполагают, что болезнь Ибараки встречается также в Индонезии и на о. Тайвань. Летальность варьирует от 6 до 10 %.
Из крови коров и клещей Culicoides oxytoma в Японии выделен агент, вначале идентифицированный как арбовирус. Изолят условно был обозначен вирусом Chuzan. Полагают, что этот возбудитель является причиной рождения телят с водянкой головного мозга и синдромом гипоплазии мозжечка.
Клинические признаки. Болезнь продолжается 2-3 дня. На поражённых слизистых оболочках рта и носа иногда появляются небольшие некротические язвочки, которые быстро заживают. Характерный признак болезни - затруднённое глотание - наблюдается у 20-30 % больных. Этот симптом появляется через 7-10 дней от начала заболевания, когда все другие признаки болезни уже исчезли. При таком течении болезни 30-40 % животных погибает или подвергается вынужденному убою. Чаще поражаются мышцы языка, гортани, глотки, пищевода. На губах, во рту, в желудке и на венчике копыт появляются отёки и кровоизлияния. Сначала развиваются дистрофические изменения эпителия слизистых оболочек, а затем местами ткань некротизируется, появляются эрозии и язвы.
Если поражается слизистая оболочка глотки и пищевода, глотание затрудняется.
Начинается обезвоживание организма и истощение. Если развивается аспирационная пневмония, то большинство животных погибает. Характерные особенности данной болезни - стоматит и ларингофаренгиальный паралич. У клинически больных животных возрастает активность лактатдегидрогеназы в сыворотке крови, отмечалась депрессия, отсутствие аппетита.
Патоморфологические изменения. У павших на губах, во рту, в желудке и на венчике копыт появляются отёки и кровоизлияния. Наблюдаются дистрофические изменения эпителия слизистых оболочек, местами ткань некротизирована, встречаются эрозии и язвы. Патологогистологические изменения при этом характеризуются дегенерацией и некрозом мышц пищевода, глотки, гортани.
Диагностика. Разработан непрямой вариант ТФ ИФА с антивидовым иммунопероксидазным конъюгатом против IgG КРС для определения антител, специфических к вирусу Ибараки. Специфический культуральный антиген вируса готовят из лизата клеток CV-1, инфицированных вирусом. Специфические сыворотки к вирусу Ибараки получают на гипериммунизированных телятах месячного возраста. Для получения сыворотки кролика их иммунизируют иммуноглобулином G. Активность антивидового IgG в РДП составляла 1:256. Таким образом, непрямой вариант ИФА оказался чувствительным и специфичным экспрессметодом диагностики, позволяющим выделять антитела, специфические к вирусу Ибараки.
Иммунитет и специфическая профилактика. Патогенность вируса Ибараки для КРС была ослаблена путём серийных пассажей его в клеточных культурах КЭ. Живая вакцина при введении под кожу не вызывала лихорадки и клинической реакции у КРС и в 100 % случаев индуцировала образование вируснейтрализующих антител, сохранявшихся более 3 лет. Важное знамение при лечении болезни Ибараки представляют меры против обезвоживания и пневмонии, развивающейся в результате затрудненного глотания.
Вопросы для самопроверки:
1. Определение болезни 2. Характеристика возбудителя.
3. Эпизоотологические особенности.
4. Клиническая картина болезни.
5. Патоморфологические изменения.
6. Диагностика.
7. Иммунитет и специфическая профилактика болезни Ибараки.
ознакомить слушателей с болезнью Акобане и мераЦель занятия:
Болезнь Акобане (Буньявирусная инфекция) – инфекционная вирусная болезнь крупного рогатого скота, реже овец, характеризующаяся дефектами и отеками головного мозга, атрофией скелетных мышц, гипоплазией легких.
Возбудитель. Вирус семейства Bunyaviridae, рода Bunyavirus.
Имеет электронноплотную сердцевину диаметром 65-70 нм, ограниченную 1-2-слойной оболочкой, и внешнюю 2-слойную оболочку толщиной 6,5-7 нм.
Общий диаметр вирионов 120-130 нм, поверхность их зернистая, окружена слоем шипиков длиной около 10 нм.
Вирус Акобане (шт. Р) репродуцируется в перевиваемых культурах клеток CV (титр 6,6+0,1 lg ТЦД50/мл) и ПСГК (титр 6,4+0,1 ТЦД50/мл (3, 4). Изучен характер взаимодействия вируса Акабане (шт.Р) с клетками перевиваемой культуры CV-I. При заражении последней в дозе 104,5 ТЦД50/мл вирус вызывал ЦПИ через 48 ч. Они проявлялись расширением межклеточных пространств, снижением митотической активности клеток, набуханием, полиморфизмом ядер большинства входящих в состав монослоя клеток, конденсацией в них хроматина, выраженной зернистостью и вакуолизацией периферических участков цитоплазмы. К 72-96 ч после заражения процессы деструкции были максимально выраженными и проявлялись в разрежении монослоя, образовании обширных "окон", обрамленных пикнолитическими клетками с ярко выраженной эозинофильной цитоплазмой. Вирус Акобане, судя по результатам перекрестной РН, РСК, РТГА и ИФ, антиген связан с вирусами группы Синбу, однако имеет отношение и к вирусам группы Oroponche, lugwawuma и Manzanilla.
Экспериментальная инфекция воспроизводится на 5-6-день СПФ КЭ, мышатах и крысятах-сосунах и мышатах-прыгунках. КЭ заражают в ЖМ 10кратными разведениями суспензии мозга инфицированных мышат-сосунов. На 7-10 сут у погибших КЭ наблюдали уродства конечностей, у некоторых - водянку головного мозга. У выживших цыплят отмечали уродства конечностей и потерю координации движений. Вирус Акобане накапливается в мозге СПФ КЭ в титре до 4,5 lg ЭЛД50/мл. Мышат и крысят-сосунов и мышат-прыгунков заражали интрацеребрально 1%-ной вируссодержащей суспензией мозга мышей. Клинические признаки (потеря рефлекса сосания, параличи и гибель) наблюдали с первого пассажа. После 3-х последовательных пассажей вирус Акобане накапливался в мозге мышей-прыгунков от 5,1 Ig ЛД50/мл, в мозге крысят-сосунов в мозге мышат-сосунов -7,07±0,23 Ig ЛД50/мл. Титр АГ, приготовленных из мозга мышат-сосунов, составлял в РСК 1:32, в твердофазной ИФА 1:3125.
Штаммом вируса Акобане, прошедшим в лабораторных условиях 3 пассажа, заражали овец на 32-36 дн беременности. Плоды животных обследовали на 69-108 день беременности. От 39 овец родилось 55 ягнят, у 44 из которых (80%) были тяжелые врожденные дефекты, в основном мозга. Наблюдали гипоплазию легких и т.п. Гистопатологически обнаружен широкий спектр поражений - атрофия скелетных мышц и их дегенерация, общий отек мозга, периваскулярные муфты. Сходные изменения обнаружены в мозге и мозжечке. Обширные поражения с воспалением и без него отмечены в спинном мозге.
Эпизоотология. Анализируя результаты серологических и вирусологических исследований, направленных на выяснение этиологии болезни Акобане и связи данной патологии с вирусом болезни Акобане, сделали заключение о том, что вирус Акобане широко распространен среди коров и овец. В пользу этиологической роли вируса Акобане в болезни Акобане говорят результаты частого выделения вируса Акобане от плодов стельных коров. Полагают, что передача вируса осуществляется трансмиссивно горизонтально и вертикально потомству.
Клинические признаки характеризуются нарушением координации движений, потерей аппетита и вялостью, анорексией, атрофией скелетной мускулатуры, одышкой.
Патоморфологические изменения. При вскрытии обнаружены глубокие дистрофические изменения головного мозга, гипоплазия легких, атрофия скелетных мышц и их дегенерация, общий отек мозга, периваскулярные муфты, воспалительные явления в спинном мозге.
Диагностика. Предложен специфический культуральный антиген вируса Акобане для серологической диагностики в РН, РСК, РТГА и ИФ. Для изготовления антигена накопление вируса проводят в культуре клеток CV-1 (шт. В8935).
Получена асцитическая жидкость, содержащая вирус Акобане. Ее использовали в РДП.
Вопросы для самопроверки:
1. Определение болезни.
1. Характеристика возбудителя.
2. Эпизоотологические особенности.
3. Клиническая картина болезни.
4. Патоморфологические изменения.
5. Диагностика.
При составлении данного учебного пособия были использованы материалы, изложенные в следующих изданиях:
1. Эпизоотология и инфекционные болезни сельскохозяйственных животных. (Под.ред. профессора А.А. Конопаткина), М., 2. Лабораторные исследования в ветеринарии. (Под.ред. В.Я. Антонова и П.Н. Блинова), М., 1971; М., 3. Инфекционные болезни сельскохозяйственных животных в тропических странах (А.А. Конопаткин, А.А. Глушков, С.С. Медведев) М., 4. Малоизвестные заразные болезни животных (Ф.М. Орлов), М., 5. Практикум по вирусологии (проф. Я.Е.Коляков, проф. Е.В. Козловский, доц. С.С. Гительсон, ассистент В.А. Байрак), М., 6. Справочник по микробиологическим и вирусологическим методам исследования (под.ред. М.О. Биргера), М., 7. Частная ветеринарная вирусология. Справочная книга (В.Н. Сюрин и Н.В. Фомина), М., 8. Вирусные болезни животных (составитель книги Ф.М. Орлов), М., 9. Вирусные болезни животных (В.Н. Сюрин, А.Я. Самуйленко, В.Б. Соловьев, Н.В. Фомина), М., 10. Справочник по инфекционным болезням животных (Ю.Ф. Мишанин), Ростов-на-Дону, изд.центр МарТ, 11. Ветеринарная микробиология (Я.Е. Коляков), М., 12.Руководство к практическим занятиям по ветеринарной микробиологии (Е.И. Коленько) М., 13. Руководство к практическим занятиям по эпизоотологии (Н.М. Носков) М., 14. Основы серологии (Т.С. Сайдулдин), Алма-Ата, ылым, 15. Руководство к практическим занятиям по эпизоотологии (Д. Райымбеков, Т. Касымов, В. Ким, Ж. Касымбеков), Бишкек, «Шам», 16. Бруцеллез животных и меры борьбы с ним (Н.П. Иванов), Алматы, 2007.
ОГЛАВЛЕНИЕ
Респираторный микоплазмоз Инфекционный ларинготрахеит Инфекционныйо гепатит плотоядных Парвовирусный энтерит собак Стафилококковая инфекция собак и кошек Стрептококкоз собак и кошек Вирусный ринотрахеит кошек Калицивирусная инфекция кошек Панлейкопения кошек Алеутская болезнь норок Миксоматоз кроликов Американский гнилец пчел Европейский гнилец пчел Мешотчатый расплод пчел Весенняя вирусная болезнь рыб Септический псевдомоноз рыб Фурункулез лососевых Вирусная геморрагическая септицемия радужной форели Воспаление плавательного пузыря Спорадический энцефаломиелит крупного рогатого скота Аденовирусная бронхопневмония телят Нодулярный дерматит крупного рогатого скота Эфемерная лихорадка крупного рогатого скота Неориккетсиозная бронхопневмония крупного рогатого 31.5. Неориккетсиозный аборт крупного рогатого скота Неориккетсиозная пневмония овец Неориккетсиозный полиартрит ягнят Инфекционный гидроперикардит жвачных Везикулярный стоматит Инфекционная катаральная лихорадка овец Лихорадка долины Рифт Шотландский энцефаломиелит овец Вессельсбронская болезнь Эпизоотическое бесплодие крупного рогатого скота Аденоматоз легких овец Африканская чума лошадей Вирусный артериит лошадей Борнаская болезнь лошадей Африканская чума свиней Кератоконъюнктивит Бациллярная гемоглобинурия крупного рогатого скота Болезнь Шмаленберга Трансмиссивная энцефалопатия норок Губкообразная энцефалопатия крупного рогатого скота Тургенбаев Кайрат АлтынбековичИНФЕКЦИОННЫЕ БОЛЕЗНИ ЖИВОТНЫХ
Болезни птиц, плотоядных и пушных зверей, пчел, рыб, малоизвестные болезни и медленные инфекции Подписано в печать 00.00.2010 г. Формат 60 х84 1/16.Объем 56,75 усл.печ.л. Бумага офсетная. Тираж 600 экз.
«