Главная >> Программы

Pages: |

| 2 | 3 | 4 | 5 | ... | 7 |

«Программное обеспечение NetChrom Руководство пользователя МКУБ. 00017-05И Часть 1 NetChrom Версия 2.1 г. Йошкар-Ола 2010 Содержание 10 Часть 1 Введение 1.1 Программа NetСhrom 1.2 Основные преимущ ества программы 1.3 ...»

-- [ Страница 1 ] --

ООО"Научно-производственная фирма "Мета-хром""

Программное обеспечение

"NetChrom"

Руководство пользователя

МКУБ. 00017-05И

Часть 1

NetChrom

Версия 2.1

г. Йошкар-Ола

2010

Содержание

10 Часть 1 Введение 1.1 Программа NetСhrom

1.2 Основные преимущ

ества программы 1.3 Отличия от предыдущ версий

их 1.4 Требования к оборудованию

1.5 Настройка операционной системы компьютера

1.6 Элементы диалога

1.7 Перечень обозначений и сокращ

ений Часть 2 Теоретические основы 2.1 Основы хроматографии

2.2 Обработка хроматографического сигнала

2.3 Фильтрация шумов

2.4 Разметка, интегрирование пиков

2.5 Идентификация пиков

2.6 Градуировка

2.7 Количественный расчет

Часть 3 Настройка аппаратно-программного комплекса 3.1 Установка программы

3.2 Демо - версия

3.3 Установка конфигурации сети хроматографов

3.4 Запуск программы

3.5 Настройка программы

3.6 Конфигурация хроматографа

3.6.1 Кристаллюкс-4000M

3.6.2 Петрохром-

3.6.3 Кристалл-

3.6.4 ЛГХ-

3.6.5 Купол-

3.6.6 АЦП

3.7 Настройка Кристаллюкс-4000М

3.8 Обновление ПО с сайта фирмы

Часть 4 Структура программы 4.1 Структура папок

4.3 Главное окно программы

4.3.1 Общ вид

4.3.5.1 Панель графиков

4.3.5.2 Панель таблиц

Часть 5 Работа с методом

5.1 Что такое метод?

5.2.1.1 Имя метода

5.2.1.2 Паспорт

5.2.1.3 Управление

5.2.1.4 Тип расчета

5.2.1.5 Компоненты

5.2.1.6 Группы

5.2.1.7 Обработка

5.2.1.8 Идентификация

5.2.1.9 Устройства

5.2.1.10 Звук. сигнал

5.2.1.11 Печать

5.2.1.12 Калькулятор

5.2.2 Петрохром-

5.2.2.1 Имя метода

5.2.2.2 Паспорт

5.2.2.3 Управление

5.2.2.4 Компоненты

5.2.2.5 Группы

5.2.2.6 Обработка

5.2.2.7 Идентификация

5.2.2.8 Звук.сигнал

5.2.2.9 Печать

5.2.3 Кристалл-

5.2.3.1 Имя

5.2.3.2 Паспорт

5.2.3.3 Управление

5.2.3.4 Тип расчета

5.2.3.5 Компоненты

5.2.3.6 Группы

5.2.3.7 Обработка

5.2.3.8 Идентификация

5.2.3.9 Устройства

5.2.3.10 Звук.сигнал

5.2.3.11 Печать

5.2.3.12 Калькулятор

5.2.4 ЛГХ-

5.2.4.1 Имя метода

5.2.4.2 Паспорт

5.2.4.3 Управление

5.2.4.4 Тип расчета

5.2.4.5 Компоненты

5.2.4.6 Группы

5.2.4.7 Обработка

5.2.4.8 Идентификация

5.2.4.9 Устройства

5.2.4.10 Звук.сигнал

5.2.4.11 Печать

5.2.4.12 Калькулятор

5.2.5.1 Имя метода

5.2.5.2 Паспорт

5.2.5.3 Управление

5.2.5.4 Тип расчета

5.2.5.5 Компоненты

5.2.5.6 Группы

5.2.5.7 Обработка

5.2.5.8 Идентификация

5.2.5.9 Звук.сигнал

5.2.5.10 Печать

5.2.5.11 Калькулятор

5.2.6 АЦП

5.2.6.1 Имя метода

5.2.6.2 Паспорт

5.2.6.3 Управление

5.2.6.4 Тип расчета

5.2.6.5 Компоненты

5.2.6.6 Группы

5.2.6.7 Обработка

5.2.6.8 Идентификация

5.2.6.9 Устройства

5.2.6.10 Звук.сигнал

5.2.6.11 Печать

5.2.6.12 Калькулятор

5.4 Сохранить метод под другим именем

Часть 6 Работа с пакетом

Часть 7 Работа с прибором

7.2 Состояние, диагностика прибора

7.2.6 АЦП

7.3 Неисправности и регламент

7.4 Журнал хроматографа 7.5 Работа с сателлитом

Часть 8 Работа с видеосамописцем

8.1 Настройка свойств видеосамописца

8.2 Работа с видеосамописцем Часть 9 Работа с хроматограммой

9.1 Открыть хроматограмму

9.2 Настройка свойств хроматограммы

9.3 Сохранить хроматограмму под другим именем

9.4 Паспорт хроматограммы 9.5 Метод хроматограммы

9.6 Редактирование параметров пробы

9.7 Внешний расчет

9.8 Быстрый экспорт 9.9 Удалить хроматограмму

9.10 Масштабирование хроматограммы

9.11 Визуальная оценка хроматограммы

9.12 Идентификация пиков

9.13 Градуировка 9.13.1 Подготовка к градуировке

9.13.2 Создание файла градуировки

9.13.2.1 Паспорт

9.13.2.2 Список

9.13.3 Проведение градуировки

9.13.3.1 Внесение данных для градуировки

9.13.3.1.1 Из файла градуировки

9.13.3.1.2 Ручной ввод

9.13.3.2 Построение зависимости

9.13.3.2.1 Построение графика

9.13.3.2.2 Оценка погрешности

9.13.3.2.3 Создание ручной точки

9.14 Дополнительная обработка хроматограмм

9.14.3 Инвертирование

9.14.8 Конфигурация

9.15 Ручное редактирование пиков 9.15.1 О режиме ручного редактирования

9.15.2 Корректировка начала, конца, вершины пика

9.15.3 Удаление пика

9.15.4 Удалить пики слева

9.15.5 Удалить пики справа

9.15.6 Удалить все пики

9.15.8 Разделить пик

9.15.10 Пик наездник

9.15.11 Хвостатый пик

9.15.13 Базовый пик

9.16 Просмотр результатов

9.18 Экспорт отчета

Часть 10 Сервисные функции

10.1 Корректировать

10.4 Генерировать компоненты

10.7 Автоматическое удаление хроматограмм

10.8 Внешняя программа

10.9 Фиксация времен

10.10 Отчет о проблеме

Часть 11 Пошаговое руководство

11.1 Подключение и настройка 11.2 Проведение анализа

11.4 Охлаждение прибора

11.6 Выход из программы 1.1 Программа NetСhrom Программа "NetChrom V2.1" (далее по тексту программа) разработана и выпускается НПФ "Мета-хром", и предназначена для автоматизации работы хроматографов "Кристаллюкс-4000М", "Петрохром-4000", "КристаллЛГХ - 3000", "Купол-55", при проведении серийных анализов, исследовательских работ, а также разработки методик. Программа позволяет производить на одном компьютере типа IBM PC одновременную обработку сигналов и управление от одного до восьми хроматографов. Подключение хроматографов осуществляется к последовательному интерфейсу RS-232C или интерфейсу USB.

Программа обеспечивает также обработку хроматографического сигнала неавтоматизированных хроматографов типа "ЛХМ-80", "модель 3700", серии "Цвет" и др., в т.ч. зарубежных. Неавтоматизированные хроматографы подключаются к компьютеру через блок аналогово-цифрового преобразования. Программа работает со следующими типами АЦП:

24-х разрядный блок АЦП фирмы "Мета-Хром" (от 1 до 8 входов);

24-х разрядное устройство ИТЛЦ фирмы "Мета-Хром" (1 вход);

24-х разрядное, встраиваемое в компьютер, АЦП фирмы "L-Card" (L-24, L от 1 до 4 входов);

Программа обеспечивает управление и обработку хроматографических сигналов комбинированного комплекса, состоящего из набора хроматографов в различной комбинации. Количество хроматографов и других устройств, подключенных к компьютеру ограничено восемью.

Метрологически значимые процедуры, связанные с обработкой хроматографического сигнала, обнаружением пиков, расчетом высот и площадей пиков находятся в файле NetChromProc.dll, целостность этого файла проверяется путем вычисления хэш-кода по алгоритму MD5.

Хэш-код по алгоритму MD5, вычисленный для файла NetChromProc.dll:

da232b2b979bb908fab85b6925117688.

В типовой комплект поставки программы входит:

CD-диск с программой "NetChrom V2.1";

описание программы в электронном виде;

электронный ключ, обеспечивающий возможность использования программы на одном компьютере.

По мере развития программы, в нее постоянно вносятся различные изменения, касающиеся как исправления замечаний, выявленных по результатам эксплуатации, так и появления новых функциональных возможностей.

Поэтому текст описания может не соответствовать возможностям программы. Замечания как по тексту описания, так и по самой программе, равно как и по работе хроматографа просим направлять по электронной почте:

[email protected].

Изготовитель предупреждает потребителей, что использование хроматографа типа "Кристаллюкс" с другими программными продуктами, несертифицированными органами Госстандарта совместно с хроматографом, является нарушением "Закона Российской Федерации об обеспечении единства измерений"! Кроме того, использование этих программ может повлечь за собой выход хроматографа из строя. Вся ответственность за нарушение закона и выход из строя хроматографа при этом целиком ложится на потребителя!

В поставку программы входят ресурсы, призванные помочь пользователю быстро освоиться и приступить к работе.

Эти ресурсы включают в себя:

контекстно-зависимую справочную систему;

полезные советы;

демонстрационные ролики;

пошаговое руководство по выполнению типовых операций;

печатную документацию.

Кроме того, пользователь может получить техническую поддержку специалистов НПФ "Мета-хром":

на регулярно обновляемом Web-сайте: http://www.meta-chrom.ru;

по электронной почте: [email protected];

по телефонам: (8-836-2)42-49-97, 42-22-66, 41-10- 1.2 Основные преимущества программы Программа NetСhrom предоставляет пользователю весь базовый набор операций по автоматизации хроматографического процесса. Некоторые из них реализованы более удачно, чем в других аналогичных программах. Основными достоинствами программы являются:

автоматическое выявление и разметка до 2000 хроматографических пиков с возможностью ручной настройки алгоритма детектирования пиков, возможность выявления пиков на хроматограмме при помощи процедуры «события интегрирования»;

удобная процедура ручного редактирования расположения характерных точек пиков на хроматограмме;

идентификация до 1000 анализируемых соединений (компонентов) и до 200 групп соединений по заранее созданным пользователем в процессе градуировок моделям, с использованием абсолютного и относительного времени удерживания, соотношения сигналов одновременно работающих детекторов, индексов удерживания (Ковача), температуры кипения компонентов;

расчет концентрации и количества вещества различными методами непосредственно в программе;

многоточечная градуировка (до 100 точек), построение градуировочной характеристики компонентов с использованием как линейных, так и нелинейных (до кривой третьего порядка) характеристик, возможность объединения нескольких характеристик, расчет отклонения точек от построенной характеристики;

запись на винчестер компьютера хроматограмм почти неограниченной длительности, результатов расчета и условий проведения анализа;

возможность визуального сравнения нескольких хроматограмм на одном графике, в т.ч. в трехмерном виде;

полностью автоматизированное управление режимами работы хроматографа;

функция «plug-n-play», т.е. автоматическое распознавание хроматографа, подключенного к компьютеру, при загрузке операционной системы компьютера;

запись и графическое представление основных параметров диагностической информации, в т.ч. в процессе отображение на экране компьютера информации о результатах различных этапов обработки выходных сигналов детекторов, в т.ч., параметров созданных методов и компонентов, параметров диагностического контроля, результатов статистической обработки и т.д.;

расчеты различных физических свойств анализируемых соединений;

редактирование записанных хроматограмм, переобработка, переидентификация и вывод на принтер;

регистрация изменений, произведенных пользователем в хроматограмме;

запись неисправностей возникших при проведении анализа в электронный журнал, автоматическая сигнализация о необходимости проведения регламентных работ;

проведение операций над хроматограммами (сложение, вычитание, сравнение, фильтрация), расчет площади зашкаленных пиков, флуктуационных шумов и дрейфа нулевого сигнала, предела детектирования, среднего квадратического отклонения, параметров расхода потока через капиллярные колонки;

диагностика неисправностей хроматографа не только по значению параметров режима, но и по форме хроматографического сигнала;

интуитивно понятный интерфейс пользователя и наличие контекстно-зависимой справочной системы;

экспорт данных в различные форматы: Word, Excel, XML и др.

импорт из программ: Netchrom v. 1.5. и Мультихром возможность добавления новых полей к компонентам и пикам и новых процессов обработки данных, позволяющие пользователям самостоятельно реализовать свои специфические расчеты и отчеты;

возможность повысить производительность хроматографа, путем независимой обработки сигналов от каждого из двух каналов разделения при одинаковых температурных параметрах разделения ("два хроматографа в одном");

возможность обработки сигнала неавтоматизированного хроматографа с помощью незадействованного канала обработки (усилитель и АЦП) хроматографа;

возможность сбора данных и управление в реальном времени одновременно от одного до восьми хроматографов на одном компьютере;

ведение журнала состояния хроматографа на различных этапах работы;

ограничение доступа к программе посторонним лицам и управление доступом к программе обслуживающего возможность подключения к программе дополнительных пользовательских программ для расчетов результатов по требованиям Заказчика;

возможность общения с программой на русском и английском языках (в дальнейшем и др.), причем языки переключаются нажатием кнопки.

1.3 Отличия от предыдущих версий Программа продолжает линию развития программного обеспечения для автоматизации хроматографии, нашедшую свое воплощение в предыдущих версиях программы "NetChrom". Система дополнена возможностями, делающими работу с ней более гибкой для тех, кто ее настраивает, и одновременно более простой для регулярного использования. Наиболее заметные нововведения перечислены ниже:

программа обработки хроматографической информации, работающая в среде Windows, имеющая дружественный интерфейс и позволяющая работать с другими программами;

градуировочные точки теперь не хранятся вместе с компонентом, а берутся непосредственно из хроматограмм, где присутствует компонент с таким же названием, градуировочной группой, единицей концентрации, заданной концентрацией и некоторыми другими совпадающими параметрами;

редактирование компонентов, событий интегрирования и др. производится непосредственно в таблице;

таблицы имеют возможность сортировки, группировки, подведения промежуточных итогов, настройки формата представления чисел;

переработано отображение графиков и работа с ними;

изменена процедура ручной корректировки положения характерных точек пика на хроматограмме;

введены пароли доступа к программе для различных пользователей.

1.4 Требования к оборудованию Программа работает на компьютерах IBM PC или совместимых с ними следующей (минимальной) комплектации:

Компьютер с процессором, тактовая частота которого составляет не менее 300 МГц.* Использоваться могут процессоры семейств Intel Pentium/Celeron, AMD K6/Athlon/Duron, или другие совместимые процессоры.

Рекомендуемая частота процессора – 1700 МГц и выше.

ОЗУ объемом не менее 256 МБ, рекомендуется 512 МБ (для Vista) и выше (при работе с двумя и более хроматографами).* Жесткий диск HDD объемом не менее 80 ГБ;.

DirectX9 совместимая видеокарта (AGP/PCI-Express) с ОЗУ 64 МБ и выше. Не рекомендуется использовать интегрированную графику и видеокарты, использующие в своей работе ОЗУ (в этом случае рекомендуется увеличить объем ОЗУ).

Монитор Super VGA, с разрешением не менее 1028х768 точек, для комфортной работы лучше использовать мониторы с более высоким разрешением;* Дисковод для компакт-дисков СD(DVD),(DVD для Vista и Windows 7);* Клавиатура и мышь Microsoft Mouse или совместимое устройство ввода;

Порт принтера LPT или USB;

Порт для подключения хроматографа Serial (COM) или USB, к одному порту можно подключить один хроматограф;

Лицензионная версия Microsoft® Windows® XP (SP2)/2000(SP4)/Vista/Windows 7;

(*) - требования к компьютеру обусловлены требованиями операционной системы Microsoft® Windows® XP.

Кроме вышеперечисленного потребуется принтер для печати отчетов, предпочтение следует отдать современным принтерам (лазерным и струйным). Отдельных требований к принтеру нет 1.5 Настройка операционной системы компьютера Операционная система компьютера должна быть настроена следующим образом:

уровень чувствительности мыши должен быть в среднем положении;

разрешение экрана должно быть не менее 1024 х 768 точек;

в настройках экрана должны быть установлены шрифты крупного размера (более 98 точек на дюйм);

оформление окон и кнопок - классический стиль, цветовая гамма - стандартная, размер шрифтов- обычный, качество цветопередачи - 32 бита;

схема управления питанием не должна отключать питание в ждущем режиме (функция "никогда");

в настройках матричных принтеров установить наиболее симметричное разрешение печати, либо корректировать размеры печати, задаваемые пользователем, в соответствии с выбранным разрешением;

в настройках матричных принтеров установить высокое разрешение и низкую скорость печати (повышенное качество), в настройках программы включить функцию Упрощенная печать и возможно График на отдельном листе, по возможности подобрать для хроматограммы такие цвета, которые будут адекватно воспроизводится в черно-белом варианте;

для хроматографов "Кристалл-2000" в устройстве сопряжения МХ-1 на разъеме СНП-59 (96конт.) соединить если в компьютере установлена звуковая карта, а колонки отсутствуют, то для работы "спикера" компьютера необходимо проделать следующие операции в системе Windows. Нажмите кнопку Пуск на панели задач, выберите команду Настройка Панель управления Звуки и аудиоустройства. В появившемся Окне Свойства: Звуки и аудиоустройства открыть вкладку Оборудование. Выбрать в списке Устройства название аудиокарты компьютера. Нажать кнопку Свойства, в появившемся Окне во вкладке Общие найти пункт Применение устройства. Выбрать из выпадающего списка опцию Устройство не используется (отключено) и последовательно закрыть окна с помощью кнопок ОК. Перезагрузить Во время работы программы потребитель не должен запускать программы, которые переключают разрешение экрана, а также стараться избегать сильной загрузки компьютера программами, например, Тип платы расширения RS дополнительно устанавливаемой в компьютер, должен быть согласован в обязательном порядке с изготовителем во избежание возможных проблем с подключением хроматографа к Некоторые неисправности, которые могут возникать из-за неправильных настроек операционной системы:

Таблица 1.1. Настройка операционной системы в зависимости от неисправностей После загрузки операционной Причиной является алгоритм поиска Необходимо включать в сеть беспорядочно прыгает по экрану. подключенный к СОМ-порту, был хроматограф.

При работе в панели графиков, при Если при нажатии на клавишу мыши Необходимо уменьшить нажатии на левую клавишу мыши происходит ее сдвиг, хотя бы на один чувствительность мыши.

происходит полное или частичное пиксель экрана, программа Окне Видеосамописец мигает поддерживает программную современную видеокарту.

Программа медленно выполняет На компьютере запущена Выгрузить (закрыть) мешающую функции обработки ("тормозит"). программа, требующая большого программу.

При свертывании Окна Хроматограф Выставлено иное от рекомендуемого Изменить разрешение экрана.

окно уходит за пределы экрана разрешение экрана. Удалить файл state.dat и запустить При переустановке последних Как правило, такие ошибки возникают Для решения проблемы с версий драйверов Guardant на отдельных компьютерах под ОС помощью утилиты выполните выдается ошибка установки/ Windows Vista/2003/2000 при следующие действия:

удаления драйвера Guardant переустановке последних версий отсоедините все ключи от портов версий 5.xx. Например, такая - драйверов Guardant "поверх" ранних компьютера;

Error:1150 MsiGrdDrv_Uninstall, или версий. Поэтому перед установкой загрузите утилиту Windows хроматограммы не совпадают с матричных) разрешение (количество разрешение под конкретный заданными пользователем. точек на единицу длины) различается принтер, например, для принтера При запуске печати в NetChrom На компьютере был обнаружен После лечения антивирусной вместо окна предпросмотра отчета вирус, перехватывающий вызов программой AVP проблема будет показывается окно редактора параметр командной строки, Большая задержка между Некорректная работа драйвера Переустановить - удалить и или принтер.

После печати 30 листов на принтере Ошибка в драйверах принтера, Скачайте новую версию драйвера (Hewlett Packard) дальнейшая поставляемых вместе с ним. принтера с сайта производителя.

печать невозможна до перезагрузки Windows.

После включения компьютера Ошибка в прошивке партии Снимите галочку с переключателя до выключения страницу.

1.6 Элементы диалога Управление программой осуществляется путем воздействия на соответствующие элементы диалога программы. Для взаимодействия программы с пользователем используются следующие элементы диалога:

Таблица 1.2. Элементы диалога Иерархический список - вдавленный прямоугольник, который служит для отображения иерархических данных в виде дерева, состоящего из узлов.

Слева от узлов, которые имеют дочерние узлы (узлы более низкого уровня) отображается квадратик со знаком "+". Чтобы посмотреть дочерние узлы необходимо навести указатель мыши на квадратик и щелкнуть левой клавишей мыши. При этом под узлом разворачивается список узлов более низкого уровня, в квадратике слева появится знак "-". Повторный щелчок левой клавишей мыши приведет к сворачиванию списка дочерних узлов, Щелчок по узлу иерархического списка приведет к какому-либо действию.

Выпадающее меню - можно вызвать, если навести указатель мыши, например, на панель графиков хроматограмм и щелкнуть правой клавишей мыши. Выбрать пункт меню - навести указатель мыши на нужный пункт меню (при этом он выделится цветом) и щелкнуть по левой кнопки мыши. Выбор пункта меню приведет к действию, которое отображено в наименовании пункта меню.

Ползунок - шкала с делением и ползунком в виде стрелки. Ползунок управляется как передвижением, так и в пошаговом режиме (нажатием левой клавиши мыши при установке курсора слева или справа от ползунка).

Стрелки прокрутки вкладок. Используются для доступа к вкладкам, которые не отображаются в данный момент на экране.

Кнопка ОК принимает все сделанные изменения и закрывает окно.

Кнопка Отмена отменяет все сделанные изменения и закрывает окно. То же самое происходит при нажатии на клавишу Esc.

1.7 Перечень обозначений и сокращений В справочной системе NetChrom используются следующие условные обозначения:

На эту информацию следует обратить особое внимание, что позволит избежать проблем в дальнейшей Эта информация носит ознакомительный характер и помогает организовать работу эффективнее.

В справочной системе NetChrom используются аббревиатуры:

ДТП - детектор по теплопроводности;

ПИД - пламенно - ионизационный детектор;

ЭЗД - электронозахватный детектор;

ТИД - термоионный детектор;

ПФД - пламенно - фотометрический детектор;

ФИД- фотоионизационный детектор;

АЦП - аналого-цифровой преобразователь, ПК - персональный компьютер;

РРГ - регулятор расхода газа;

РД - регулятор давления газа.

ИРГ - измеритель расхода газа ДАГ - дозатор автоматический газовый.

ДАЖ - дозатор автоматический жидкостный.

ДРП - дозатор равновесного пара.

СКО - среднеквадратичное отклонение.

ВУФ - вакуумная ультрафиолетовая лампа.

2 Теоретические основы 2.1 Основы хроматографии Хроматография - физико-химический метод анализа и исследования веществ и смесей, основанный на разделении компонентов за счет распределения их при перемещении через слой неподвижной фазы потоком подвижной фазы. В основе хроматографических процессов лежат явления сорбции и десорбции, многократное повторение которых, приводит к разделению компонентов за счет разницы в константах распределения веществ между двумя фазами, несмешивающимися и перемещающимися друг относительно друга. Или, проще говоря, хроматография – процесс разделения смесей веществ, основанный на различии скоростей движении этих веществ в системе несмешивающихся и движущихся друг относительно друга фаз.

В зависимости от агрегатного состояния движущейся фазы – газ, жидкость или флюид, хроматография разделяется соответственно на газовую, жидкостную и флюидную.

В газовой хроматографии неподвижная фаза может быть твердым телом - адсорбентом, этот вид хроматографии называется газоадсорбционной, или жидкостью, в виде пленки, нанесенной на поверхность твердого носителя, этот вид хроматографии называется газожидкостной. В качестве подвижной фазы (элюента), используется газ, который называется газом-носителем.

Система электронного управления потоками газов (ЭУПГ) осуществляет формирование, очистку и стабилизацию потока газа-носителя и вспомогательных газов (если они необходимы для питания детекторов).

Система ЭУПГ включает в себя:

газовые фильтры;

регуляторы давления;

электронные регуляторы расхода;

электронные регуляторы давления;

газовый коллектор.

2. Устройство ввода подает через испаритель в поток газа-носителя определенное количество анализируемой смеси в газообразном состоянии непосредственно перед колонкой.

3. В хроматографической колонке осуществляется разделение смеси на отдельные составляющие компоненты.

При продвижении смеси по колонке протекают процессы сорбции и десорбции веществ на неподвижной фазе. При этом вещества, слабо сорбируемые неподвижной фазой, будут переноситься подвижной фазой по колонке с большей скоростью и наоборот.

Различают хроматографические колонки:

- насадочная колонка — колонка с сорбентом (неподвижным активным твердым веществом);

- капиллярная колонка — капилляр, в котором роль неподвижной фазы играет его внутренняя поверхность, на которую нанесены неподвижная жидкая фаза и слой сорбента.

4. Из колонки разделенные компоненты смеси попадают в детектор. Детектор регистрирует присутствие веществ, отличающихся по физическим или физико-химическим свойствам от газа-носителя, и преобразует возникающие изменения в электрический сигнал.

Используют следующие типы детекторов:

ПИД — пламенно-ионизационный детектор. Принцип действия ПИД основан на ионизации анализируемых соединений, происходящей при их сгорании в водородном пламени, за счет энергии окисления углерода;

ДТП — детектор по теплопроводности (катарометр). Принцип действия ДТП основан на изменении электрического сопротивления проводника в зависимости от теплопроводности окружающей среды (элюата);

ЭЗД — электронно-захватный детектор. Принцип действия ЭЗД основан на том, что электроотрицательные частицы анализируемых соединений захватывают тепловые электроны с образованием отрицательных ионов.

Количество захваченных электронов зависит от массы и структуры анализируемого соединения;

ПФД — пламенно-фотометрический детектор. Принцип действия ПФД основан на возбуждении анализируемых соединений в обогащенном по водороду пламени. При возвращении возбужденных молекул в основное состояние возникает эмиссия света на определенной длине волны, характерной для данного ТИД — термоионный детектор. Принцип действия ТИД основан на ионизации органических молекул, содержащих атомы азота, фосфора, мышьяка, некоторых галогенов, олова и серы, в присутствии паров ионов щелочного металла;

ФИД — фотоионизационный детектор. Принцип действия ФИД основан на ионизации молекул анализируемых соединений в результате поглощения ими вакуумного ультрафиолетового излучения, причем ионизации подвергаются те соединения, потенциал ионизации которых меньше энергии излучения.

Детекторы могут объединяться в аналитическом модуле в различных комбинациях.

5. Далее происходит усиление и аналогово-цифровое преобразование полученного сигнала.

6. Регистрирующий прибор (компьютер или самописец) строит график зависимости сигнала детектора от времени, называемый графиком хроматограммы.

Требуемые температурные режимы устройства ввода, колонки и детектора поддерживаются с помощью соответствующих термостатов, входящих в систему термостатирования вместе с датчиками измерения температуры и терморегуляторами.

Прохождение в детекторе газа-носителя без пробы на хроматограмме отражается фоновым сигналом детектора, который называется нулевой линией. Нулевая линия всегда имеет колебания, которые можно классифицировать на высокочастотные (шум) и низкочастотные (дрейф).

При прохождении через детектор анализируемого компонента происходит отклонение уровня сигнала детектора от нулевой линии. Это отклонение отображается на хроматограмме в виде пика.

Пик на хроматограмме имеет следующие характеристики:

Время удерживания — время от начала анализа до выхода максимума пика.

Площадь — область, ограниченная профилем пика и базовой линией.

Высота — расстояние от вершины пика до базовой линии.

Ширина пика на половине высоты пика (полуширина пика) — расстояние между передним и задним фронтом пика на половине его высоты.

Базовая линия — воображаемое продолжение нулевой линии под пиком.

Время удерживания — качественная характеристика анализируемого компонента, т.е. какому компоненту (веществу) принадлежит пик.

Площадь и высота — количественные характеристики компонента, т.е. сколько компонента содержится в пробе.

Ширина пика на половине высоты пика — характеристика, используемая для настройки алгоритма нахождения и разметки пика, а также оценки его симметрии.

2.2 Обработка хроматографического сигнала После получения хроматограммы программой автоматически без участия оператора проводится ее обработка, которая включает в себя несколько последовательных этапов:

1. Фильтрация шумов - сглаживание нулевой линии хроматограммы с целью повышения стабильности автоматической обработки хроматограммы.

2. Разметка пиков (интегрирование) - определение базовой линии пиков, определение начала, вершины и окончание пика и измерение параметров пиков (время удерживания, площадь, высота, ширина на половине высоты).

3. Идентификация пиков - отнесение пиков на хроматограмме к тому или иному компоненту в таблице по параметрам удерживания. Как правило, анализ производится с целью получения информации о количественном содержании компонентов в анализируемой пробе. Определение количества вещества в анализируемой пробе требует измерения площади (высоты) пика и знания коэффициента чувствительности детектора к этому веществу.

Измерение площади выполняется программой на этапе разметки пиков. Коэффициенты чувствительности детектора по каждому анализируемому компоненту вычисляются программой на этапе градуировки хроматографа.

Таким образом, хроматограмма, в зависимости от поставленной цели может служить для выполнения градуировки, либо для расчета концентрации компонента в пробе при неизвестном его содержании.

4. Градуировка - анализы проб с известным содержанием анализируемых компонентов с целью вычисления коэффициентов чувствительности детектора к этим компонентам или определения зависимости чувствительности детектора от концентрации компонента (построение градуировочного графика).

В тех случаях, когда градуировочные коэффициенты известны заранее, градуировка компонентов не проводится. При этом известные коэффициенты заносятся в таблицу компонентов.

5. Количественный расчет - завершающая стадия количественного анализа, в которой производится расчет концентраций компонентов в анализируемой пробе.

Таким образом, хроматограмма, в зависимости от поставленной цели, может служить для выполнения градуировки прибора, либо для расчета концентраций в пробе с неизвестным содержанием компонентов.

2.3 Фильтрация шумов На хроматограмме всегда присутствуют шумы и выбросы, которые обусловлены неидеальностью аналитической и электронной систем хроматографа, в т.ч. ЭУПГ, терморегуляторов, детектора, АЦП и их соединения. Высокое значение шума снижает предел детектирования, а вместе с высоким значением дрейфа затрудняет автоматическую обработку хроматограммы.

Существует ряд методов фильтрации шумов, отличающихся по принципу действия. Основная часть из них заключается в выполнении определенных действий над значением точки хроматограммы, причем в расчет принимаются значения соседних точек. Количество точек, расположенных справа и слева от точки, над которой совершается действие, определяют ширину окна фильтрации.

Чем точек больше, тем больше степень сглаживания шумов. Поскольку любая фильтрация искажает форму пиков, то ее использование оправдано лишь при высоких значениях шума. Для оптимального сглаживания хроматограммы рекомендуется начинать с минимальной ширины окна фильтрации и при неудовлетворительных результатах постепенно ее увеличивать до получения удовлетворительного результата. Возможно сглаживание флуктуационных шумов за несколько проходов.

В программе реализованы четыре метода фильтрации шумов и выбросов на хроматограмме:

1. фильтрация выбросов – фильтр, устраняющий одиночные выбросы и неискажающий исходную хроматограмму.

При этом точка выброса заменяется средним арифметическим значением двух соседних точек, выброс детектируется по превышению шума сигнала над заданным порогом выбросов.

2. фильтр среднего ("гауссова" фильтрация) - наиболее эффективный фильтр, сглаживающий шумы сигнала, но искажающий форму пиков. Пики после сглаживания становятся ниже и шире, их площадь при этом не изменяется, а высота пиков уменьшается. Вычисляется среднее значение всех точек внутри окна фильтрации с весом, распределенным по Гауссовой функции с центром в середине окна и значение средней точки окна заменяется вычисленным значением.

3. фильтр медианы - эффективный фильтр, сглаживающий как шумы сигнала, так и выбросы, в меньшей степени искажающий форму пиков, особенно на склонах. При этом ширина окна фильтрации должна быть не меньше ширины самого большого выброса. Значения точек внутри окна фильтрации сортируются в порядке возрастания и точка, соответствующая середине окна, заменяется значением, попадающим в центр отсортированного массива.

Фильтр слегка "сглаживает" вершины пиков и ложбины между пиками и соответственно изменяет как высоту, так и площадь хроматографических пиков.

4. фильтр полиномиальный - эффективный фильтр, сглаживающий как шумы сигнала, так и выбросы, в наименьшей степени искажающий форму пиков. По точкам внутри окна фильтрации вписывается кривая второго порядка методом наименьших квадратов.

5. фильтр биномиальный - самый эффективный фильтр, сглаживающий как шумы сигнала, так и выбросы, практически неискажающий форму пиков. Каждая точка внутри окна фильтрации рассчитывается с учетом своего биномиального коэффициента.

2.4 Разметка, интегрирование пиков Разметка пиков (интегрирование ) - операция вычисления параметров пиков, полученных на хроматограмме путем определения характерных точек (начало, вершина и конец пика). При этом пики ограничиваются базовой линией (прямой, соединяющей точки начала и конца пика на нулевой линии), которая проводится по методу «резиновой ленты», натягивающейся снизу от точки начала до точки конца базовой линии на протяжении всей хроматограммы.

На основании вычислений оцениваются:

время удерживания - время от начала анализа до максимума пика;

площадь - область, заключенная между пиком и ограничивающей его базовой линией;

высота - расстояние между базовой линией и максимумом пика;

ширина пика на половине его высоты.

Особенностью программы является полностью автоматизированный процесс ее настройки под конкретный хроматографический сигнал, непрерывное отслеживание изменения характеристик хроматографического сигнала в ходе обработки хроматограммы: уровня шумов и дрейфа, а также уровня самого сигнала.

Для определения характерных точек пиков: начала, конца и вершины — в программе используется алгоритм на основе вычисления первой сглаженной производной хроматографического сигнала, скорректированной на дрейф базовой линии. При превышении или достижении определенного уровня этой производной, называемой порогом, определяются характерные точки пиков. Уровень порога определяется на основе шума производной на участках хроматографического сигнала, свободного от пиков.

Кроме уровня шума, дрейфа и уровня сигнала, большое значение имеет также зависимость изменения ширины хроматографических пиков от времени их удерживания в процессе анализа (ширина пика в начале и в конце анализа). Как известно, ширина хроматографических пиков непрерывно увеличивается в процессе анализа, причем в изотермическом режиме эта зависимость имеет линейный характер, в режиме программирования температуры колонок эта зависимость имеет более сложный характер. Программа использует эту зависимость для автоматической настройки программных фильтров под хроматографический сигнал во время анализа. Кроме этого, пользователю предоставлена возможность сформировать или отредактировать зависимость изменения ширины хроматографических пиков от времени удерживания самостоятельно (ширина пиков в начале и в конце хроматограммы). При неправильном задании этой зависимости возможно некорректное определение характерных точек пика и даже пропуск небольших пиков. Зависимость изменения ширины хроматографических пиков от времени индивидуальна для каждого метода, и после изменения условий анализа: температуры колонок, расхода газаносителя и др., необходимо откорректировать зависимость. Пики могут быть нескольких типов:

простые пики - начало и конец пика принадлежат базовой линии;

хвостатые пики - асимметрия заднего фронта пика;

пики наездники - пики на хвосте большего по величине пика, неразделенные пики - конец первого пика совпадает с началом второго и эта точка не принадлежит базовой зашкаленные пики - пики с плоской вершиной.

Разделение слившихся пиков производится по перпендикуляру или тангенте в зависимости от соотношения ширины и высоты этих пиков. Пики наездники отделяются по тангенте и площадь под ними включается в площадь хвостатого пика.

Следует иметь в виду, что никакой алгоритм не может в ряде случаев (сложная форма базовой линии, плохое разделение хроматографических пиков, малые пики-наездники, высокий уровень шумов и т.д.) гарантировать корректную разметку на пики, поскольку само понятие "пик" во многом субъективно и зависит от конкретной аналитической задачи. При этом правильность получаемых результатов зачастую зависит от опыта пользователя.

В программе реализованы два подхода для проведения разметки пиков:

1. автоматическая разметка пиков;

2. ручная (графическая) разметка пиков.

1. Автоматическая разметка пиков Автоматическая разметка пиков (интегрирование) имеет смысл, если ожидается обработка серии хроматограмм со сходными, повторяющимися особенностями базовой линии, значениями величины и последовательностью хроматографических пиков.

Параметры интегрирования, с помощью которых пользователь может влиять на процесс обнаружения пиков на хроматограмме, перечислены ниже:

Оптимальное значение параметра "Ширина пика".

Значение параметра "Ширина пика" слишком мало, в результате чего данный участок хроматограммы принимается за дрейф базовой линии и не размечается как пик.

Значение параметра "Ширина пика" недостаточно, в результате чего данный пик размечается как пик Порог обнаружения пиков может быть задан по двум параметрам: площади и высоте пика.

Минимальная площадь Минимально допустимая площадь детектируемого пика. При детектировании пиков имеется возможность подавлять пики, площадь которых меньше заданной. При этом значение параметра, равное 0, означает, что подавление пиков выключено.

Значение параметра "Минимальная площадь" меньше площади левого пика.

Значение параметра "Минимальная площадь" достаточно большое. При этом левый пик был удален.

Чем больше значение данного параметра, тем больше пиков будет удалено.

Минимальная высота Минимально допустимая высота детектируемого пика. Подавление пиков с высотой значение которой, меньше заданного. При этом значение параметра, равное 0, означает, что подавление пиков выключено.

Значение параметра "Минимальная высота" меньше высоты левого пика.

Значение параметра "Минимальная высота" достаточно большое. При этом левый пик был удален.

Чем больше значение данного параметра, тем больше пиков будет удалено.

Не всегда получается подобрать одинаковые параметры для разметки всех пиков. Например, с увеличением времени выхода пика, изменяется его ширина, поэтому значения параметров, подходящие для пиков в начале хроматограммы, могут не подходить для пиков в ее конце. В таких случаях рекомендуется использовать события интегрирования. Настройка алгоритма разметки с использованием событий интегрирования имеет смысл, если ожидается серия однотипных хроматограмм со сходными, повторяющимися особенностями базовой линии. События интегрирования позволяют настроить процесс разметки в соответствии с особенностями данной серии хроматограмм, задавая для некоторых участков хроматограмм индивидуальные параметры и правила разметки. Событие можно задать для отдельного детектора, и оно начинает действовать с указанного момента времени до тех пор, пока не будет переопределено другим событием такого же типа, или пока не завершится хроматограмма.

Если не удается добиться желаемой разметки при использовании параметров и событий интегрирования, используют ручное графическое интегрирование (непосредственно на графике хроматограммы).

2. Ручная разметка пиков Как правило, используется, если не удается добиться желаемой разметки при использовании параметров автоматической разметки. Ручная графическая разметка пиков производится непосредственно на графике хроматограммы. При этом все действия, выполняемые пользователем, относятся к выделенному фрагменту хроматограммы или к выделенному пику. В программе существуют следующие типовые операции по ручному редактированию пиков на хроматограмме:

создание пика;

разделение пика;

слияние пиков;

корректировка положения характерных точек пика;

задание пика наездником;

задание пика хвостатым;

задание пика базовым;

слившийся пик;

удаление пика;

удаление пика справа;

удаление пика слева;

удаление всех пиков.

2.5 Идентификация пиков Идентификация - отнесение пиков на хроматограмме к тому или иному компоненту из списка компонентов рабочего метода. При этом производится сравнение рассчитанных параметров удерживания всех обнаруженных на хроматограмме пиков с информацией, хранящейся в таблице компонентов. Идентификация компонентов по одному или по нескольким детекторам осуществляется следующими способами:

1. по абсолютному времени удерживания;

2. по относительному времени удерживания;

3. по относительному объему удерживания;

4. по времени удерживания и соотношению интенсивностей пиков на параллельно (последовательно) работающих детекторах;

5. по индексам удерживания (Ковача);

6. по температурам кипения.

1. Идентификация по абсолютному времени удерживания Наиболее простой способ идентификации – идентификация по времени удерживания, т.е. сравнение времени удерживания анализируемого компонента с временем удерживания известного соединения при строго заданных условиях анализа. Для проведения идентификации пика по времени удерживания, в библиотеке компонентов должна содержаться информация:

наименование компонента;

время удерживания;

окно поиска по времени (в единицах времени).

Окно поиска - границы области, в которой будет осуществляться поиск пика, как в положительную, так и в отрицательную сторону от заданного в таблице параметра удерживания. При задании окна необходимо стремиться, чтобы ширина окна была достаточной для попадания пика в окно при неизбежных изменениях времени удерживания, но и не слишком большой, чтобы в окно не попадали соседние пики. В случае если в окно поиска попадают несколько пиков, то среди них выбирается пик, имеющий максимальную вероятность идентификации (наиболее интенсивный или ближайший к библиотечному времени).

2. Идентификация по относительному времени удерживания При изменении условий в процессе анализа (расход газа-носителя, температура колонки), а также в процессе "старения" колонок, пики могут не попасть в окно поиска. Это происходит чаще всего, когда нельзя задать достаточно широкое окно поиска, чтобы в него не попали соседние пики, а также при длительных анализах с программированием температуры колонок, когда время удерживания может измениться в большей степени. Выход из положения состоит в том, что один из пиков (или несколько) назначается "стандартом времени", для него задается увеличенное окно поиска (2-5%),а для остальных пиков рассчитывается относительное время удерживания.

Стандартом времени, как правило, выбираются стоящие отдельно или большие пики обязательно присутствующие на хроматограмме. Таким образом, при одновременном сдвиге по той или иной причине времен удерживания всех компонентов, наличие пиков-стандартов времени поможет правильно идентифицировать вещества, несмотря на то, что их время удерживания не будет попадать в окно поиска по времени.

В этом случае идентификация производится следующим образом:

производится поиск пика стандарта времени по времени удерживания;

для стандарта времени удерживания рассчитывается коэффициент отклонения реального времени удерживания по сравнению с библиотечным временем по формуле:

для остальных пиков рассчитывается ожидаемое время удерживания, исходя из времени, заданного в библиотеке для данного компонента, и рассчитанного коэффициента отклонения времени стандарта по формуле:

3. Идентификация по относительному объему удерживания Является более точным расчетным параметром по сравнению с относительным временем удерживания, т.к. в нем учитывается время на прохождения подвижной фазой расстояния от устройства для ввода пробы до детектора (иногда это время называют мертвым временем или временем удерживания несорбирующегося вещества).

При этом относительный объем удерживания стандарта времени принимают за единицу, а относительный объем удерживания компонентов ( ) рассчитывают по формуле:

- время удерживания анализируемого компонента;

- время удерживания стандарта времени;

- мертвое время.

4. Идентификация по времени удерживания и соотношению интенсивностей пиков на параллельно (последовательно) работающих детекторах Если в процессе анализа используются несколько (чаще всего два) параллельно или последовательно работающих детектора, то для более достоверной идентификации можно применить способ идентификации, заключающийся в том, что наряду со временем удерживания (абсолютным или относительным), можно использовать отношение интенсивностей пиков соответствующих детекторов. Вначале пик идентифицируется по времени удерживания на ведущем детекторе (детекторе, по интенсивности пика которого рассчитывается концентрация компонента). Затем сравниваются отношения интенсивностей пика на различных детекторах с библиотечным отношением. Для идентификации может использоваться не только отношение интенсивностей, но также наличие или отсутствие пика на другом (не ведущем) детекторе.

5. Идентификация по индексам удерживания (Ковача) Для идентификации могут использоваться и другие относительные параметры удерживания, которые в меньшей степени зависят (в отличие от времени удерживания) от условий анализа. Одним из таких параметров является индекс удерживания - безразмерная величина, характеризующая положение пика вещества на хроматограмме относительно пиков выбранных стандартов. Если в качестве стандартов используются насыщенные углеводороды (алканы, парафины), то индекс удерживания называется индексом Ковача. Выбор типа индекса (линейный или логарифмический) зависит от условий анализа. Для постоянной температуры колонки во время анализа характерна логарифмическая зависимость, при программировании - линейная. Однако между этими двумя зависимостями нет четкого разделения, поэтому при использовании режима программирования температуры колонок с начальным изотермическим участком, используется смешанный тип индекса. При этом на изотермическом участке выбирается логарифмический тип индекса, до первого реперного пика, который попадает на участок программирования температур, и в дальнейшем - линейный тип индекса. Начало программирования температуры колонок выбирается согласно заданным параметрам управления соответствующего метода.

При идентификации по индексам удерживания в таблицу компонентов должны быть занесены табличные значения индекса компонентов и ширина окна поиска по индексу. Пикам – стандартам индексов удерживания необходимо присвоить тип: реперный в таблице компонентов и задать увеличенное окно поиска (2-5%) от времени удерживания.

Идентификация по индексам удерживания производится следующим образом:

Производится идентификация реперных пиков по времени удерживания.

Реперным пикам присваиваются соответствующие индексы из таблицы компонентов.

Используя индексы удерживания реперных пиков, рассчитываются индексы удерживания обычных пиков и сравниваются с табличными данными.

Индексы удерживания Ковача рассчитываются по формулам:

линейный индекс удерживания:

Ii = In + (In+1 - In) * (ti - tn) / (tn+1 - tn), (4) логарифмический индекс удерживания:

Ii = In + (In+1 - In) * (Log(t'i) - Log(t'n)) / (Log(t'n+1) - Log(t'n)), (5) где:

Ii - время удерживания интересующего пика;

In, In+1 - индексы предыдущего и последующего компонентов с известной величиной индекса;

ti - время удерживания интересующего пика;

tn, tn+1 - времена удерживания пиков, соответствующие предыдущему и последующему компонентам с известными индексами;

t'... - приведенное время удерживания.

Для увеличения точности расчета индексов удерживания в качестве времени удерживания необходимо брать приведенное время удерживания.

Приведенное время удержания равно разности абсолютного времени удержания и мертвого времени (времени нахождения неудерживаемого компонента в хроматографической системе).

Мертвое время определяется либо экспериментально, либо расчетом, выполненным с помощью газового калькулятора. В качестве неудерживаемого компонента чаще всего используют метан.

В окно ожидаемого времени или индекса удерживания одного компонента может попасть несколько пиков. В этом случае выбор пика, в зависимости от настройки, может осуществляться по следующим критериям:

ближайший к ожидаемому (библиотечному) времени или индексу удерживания;

максимальный по высоте;

максимальный по площади.

Один и тот же пик может попасть в окна поиска разных компонентов, в этом случае необходимо уменьшить ширину окон поиска.

Указанная схема распознавания (идентификации) компонентов оказывается достаточно универсальной и гибкой для того, чтобы проблема корректного распознавания пиков в подавляющем большинстве случаев было решена. Все, что требуется от оператора - на этапе настройки грамотно выбрать пик стандарта времени или реперные пики и в дальнейшем время от времени корректировать их ожидаемые времена удерживания по текущей хроматограмме.

5. Идентификация по температурам кипения Частным случаем расчета индексов удерживания является расчет температур кипения. При расчете температур кипения используются те же формулы, что и при расчете индексов. Для расчета температур кипения необходимо в библиотеке методов выбрать тип индекса (линейный или логарифмический) и задать известные температуры кипения реперных компонентов.

2.6 Градуировка Градуировка проводится с целью получения градуировочной зависимости, которая характеризует связь между величиной отклика детектора (площадь или высота пика) и количеством компонента в пробе. Градуировочная зависимость компонента в общем случае имеет вид:

где Q - количество компонента в пробе;

R - отклик детектора (площадь или высота);

- градуировочные коэффициенты компонента.

Для получения градуировочной зависимости проводят анализы одного или нескольких образцов пробы с известным содержанием анализируемых компонентов.

Концентрации компонентов в градуировочных смесях в идеале должны охватывать весь диапазон измеряемых концентраций. Для получения достоверных результатов анализ каждой градуировочной смеси проводят не менее двух раз.

По полученным результатам строится градуировочный график зависимости отклика пика от концентрации:

Рисунок 2.4 - Г рафик зависимости отклика пика от концентрации Градуировочные коэффициенты ( ) рассчитываются исходя из градуировочного графика.

При многоточечной градуировке зависимость может быть аппроксимирована кривой любого, необязательно линейного типа. Градуировочные коэффициенты рассчитываются методом наименьших квадратов для кривой, наилучшим образом описывающей экспериментальные данные. Тип кривой для расчета выбирается оператором из предложенных программой функциональных зависимостей, при этом предложенный график не должен противоречить объективной зависимости сигнала для данного детектора, известной по литературе.

Если градуировочная зависимость представляет собой прямую линию, проходящую через начало координат, т.е.

она может быть построена по одной точке (с применением одной градуировочной смеси с известными концентрациями компонентов).

Выбор интенсивности отклика (площадь или высота) для формирования графика градуировочной зависимости не всегда однозначен. В большинстве случаев площадь является более объективным показателем, однако есть много результатов в пользу лучшей воспроизводимости высоты. Общие закономерности таковы:

Если пики узкие и высокие, то их высота измеряется более точно, чем площадь.

Для несимметричных пиков расчеты, основанные на высотах, непригодны.

Площади пиков более устойчивы к колебаниям условий анализа.

При некоторых методах расчета, например, методе внутренней нормализации, часто используются относительные коэффициенты отклика детектора, которые известны заранее из литературы. В этом случае можно, не выполняя градуировочных измерений, а вручную задать коэффициент К1.

2.7 Количественный расчет Количественный расчет является завершающей стадией обработки хроматографического сигнала, на которой производится расчет концентраций компонентов в пробе с неизвестным содержанием анализируемых компонентов.

При проведении количественного расчета на основании измеренного отклика анализируемого компонента и по имеющейся градуировочной зависимости рассчитывают его концентрацию.

Наиболее часто используются следующие методы количественного расчета:

Метод процентной нормализации (нормализации) Метод основан на том, что сумма площадей или высот всех пиков на хроматограмме принимается за 100%. Этот метод не требует предварительной градуировки и предполагает ряд условий:

все компоненты анализируемой пробы элюируются из колонки;

все компоненты имеют одинаковые коэффициенты чувствительности детектора;

сигнал детектора линеен во всем диапазоне концентраций.

Концентрацию каждого компонента вычисляются по формуле:

где - концентрация i-го компонента;