«ПРАКТИКУМ ПО ФАРМАЦЕВТИЧЕСКОЙ ХИМИИ Методическое пособие по специальности 060108 (040500) Фармация ВОРОНЕЖ 2006 УДК 615.322 (076.5) Утверждено научно-методическим советом фармацевтического факультета протокол № 4 от 27. ...»

б) К 0,5 мл раствора прибавляют 5 капель 10 % раствора натрия гидроксида;

при нагревании появляется желтое окрашивание.

Натрия хлорид. а) Графитовую палочку смачивают анализируемым раствором и вносят в бесцветное пламя. Пламя окрашивается в желтый цвет.

б) К 2 мл раствора прибавляют по 3 капли воды, разведенной кислоты азотной и серебра нитрата – образуется белый творожистый осадок.

Левомицетин. а) 2 мл раствора помещают в пробирку, прибавляют 1 мл разведенной кислоты хлороводородной, 0,05 г цинковой пыли, затем добавляют еще 1 мл разведенной кислоты хлороводородной, смывая со стенок пробирки остатки цинковой пыли, и оставляют на 5 мин. Далее жидкость фильтруют через небольшой ватный тампон. Пробирку и воронку с ватным тампоном промывают 3-4 раза водой порциями по 1,5 мл, присоединяя их к основному фильтрату. К фильтрату добавляют 0,05 г калия бромида, 2 капли раствора тропеолина 00 и 1 каплю раствора метиленового синего, титруют 0,02М раствором натрия нитрита, добавляя его вначале по 3 капли через 1 мин, а в конце титрования (за 0,1-0,2 мл до эквивалентного количества) – по 1 капле через 1 мин до перехода красно-фиолетовой окраски в голубую. Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,02М раствора натрия нитрита соответствует 0,006462 г левомицетина.

б) 2 мл раствора помещают в пробирку, прибавляют 0,2 мл 10 % раствора натрия гидроксида и тотчас же 0,1 мл 10 % раствора сульфата меди. Смесь взбалтывают 1 мин, затем фильтруют через воронку с небольшим ватным тампоном (тампон должен быть не очень плотным, входящим на 1 см в трубочку воронки). Пробирку и воронку с ватным тампоном промывают водой 3 раза по 1 мл, присоединяя промывные воды к основному фильтрату. К фильтрату прибавляют по каплям разведенную кислоту серную до обесцвечивания (1-2 капли), 0,2 мл калия йодида и выделившийся йод оттитровывают 0,01 н. раствором натрия тиосульфата до обесцвечивания. В конце титрования прибавляют 1- капли раствора крахмала.

1 мл 0,01 М раствора натрия тиосульфата соответствует 0,006462 г левомицетина.

Натрия хлорид. К 0,5 мл раствора прибавляют 1 мл воды, 1-2 капли раствора бромфенолового синего, по каплям разведенную кислоту уксусную до зеленовато-желтого окрашивания и титруют 0,1 н. раствором серебра нитрата до фиолетового окрашивания.

1 мл 0,1 н. раствора серебра нитрата соответствует 0,005844 г натрия хлорида.

Задание 3. Провести экспресс-анализ мази левомицетиновой, результаты занести в протокол (Приложения 2, 3, 4) Мазь белого или белого с желтоватым оттенком цвета, без постороннего запаха.

Левомицетин. а) К 0,5 г мази прибавляют 2 мл раствора натрия гидроксида, нагревают до кипения. Появляется желтое окрашивание, переходящее при дальнейшем нагревании в красно-оранжевое.

б) К 0,5 г мази прибавляют 1-2 мл разведенной кислоты хлороводородной, 0,1 г цинковой пыли и нагревают на водяной бане 2-3 мин. После охлаждения раствор фильтруют. К фильтрату добавляют 1-2 мл воды, 3-4 капли 0,1М раствора натрия нитрита и 1 мл полученной реакционной смеси вливают в 1-2 мл щелочного раствора -нафтола. Появляется вишнево-красное окрашивание.

Левомицетин. 0,5 г мази помещают в коническую колбу на 50 мл и прибавляют 10 мл разведенной кислоты хлороводородной, постепенно 0,5 г цинковой пыли и 1 мл концентрированной кислоты хлороводородной. Нагревают на водяной бане 15 мин. Охлаждают, прибавляют 10 мл воды и фильтруют.

Фильтр и колбу промывают водой (примерно 50-60 мл), присоединяя к основному фильтрату. Затем к фильтрату прибавляют 0,5 г калия бромида, капли раствора тропеолина 00, 1 каплю раствора метиленового синего и при температуре 18-20 С медленно титруют 0,02М раствором натрия нитрита, добавляя его вначале по 0,2-0,3 мл в минуту, а в конце титрования (за 0,1мл до точки эквивалентности) – по 1-2 капле в минуту до перехода красно-фиолетовой окраски в голубую.

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,02М раствора натрия нитрита соответствует 0,006463 г левомицетина.

«Производные гидроксифенилалифатических аминокислот, нитрофенилалкиламинов и аминодибромфенилалкиламинов»

1. Напишите структурные формулы, рациональные и латинские названия лекарственных веществ данной группы.

2. Опишите физико-химические свойства веществ данной группы исходя из их строения.

3. Приведите уравнение гидроксамовой пробы для левомицетина и левомицетина стеарата.

4. Исходя из химического строения левомицетина, приведите уравнения реакций различных методик количественного определения препарата.

5. Приведите уравнения реакций, подтверждающих принадлежность леводопы к аминокислотам.

6. Приведите уравнения возможных реакций количественного определения метилдофы.

7. Приведите биохимические предпосылки создания лекарств группы фенилалкиламинов на основе метаболизма аминокислот.

ЛЕКАРСТВЕННЫЕ СРЕДСТВА ИЗ ГРУППЫ СУЛЬФАНИЛАМИДОВ

Лекарственные средства, предложенные для изучения:

Стрептоцид, сульфацил-натрий, сульфадиметоксин, сульфален, фталазол, салазопиридазин, бактрим, АКТУАЛЬНОСТЬ ТЕМЫ: Лекарственные вещества изучаемой группы широко применяются в медицинской практике как антибактериальные средства в составе однокомпонентных и многокомпонентных лекарственных форм промышленного и внутриаптечного производства.

ЛАБОРАТОРНАЯ РАБОТА

«Контроль качества лекарственных средств из группы сульфаниламидов»

Цель работы. Освоить навыки оценки качества лекарственных средств индивидуального изготовления, содержащих вещества из группы сульфониламидов.

Задачи деловой игры - самостоятельно подобрать в справочной литературе и применить на практике оптимальные методы для качественного и количественного анализа лекарственных форм индивидуального изготовления, содержащих сульфониламиды;

- теоретически обосновать выбор условий анализа;

- провести предварительные аналитические расчеты;

- показать практические умения по выполнению методик анализа предложенных лекарственных форм;

- уметь проанализировать возможные ошибки приготовления лекарственных форм и сделать правильное заключение об их качестве;

- провести обсуждение полученных результатов.

Основные этапы деловой игры Изучение химической структуры, физических и химических свойств препаратов группы сульфониламидов;

Изучение химических и физико-химических методов идентификации указанных лекарственных препаратов, уравнений реакций, лежащих в их основе;

Изучение возможных методов количественного определения лекарственных препаратов. Умение писать уравнения реакций;

Изучение особенностей анализа различных лекарственных форм, содержащих лекарственные вещества данной группы;

Изучение требований к качеству и особенностей анализа лекарственной формы «глазные капли» (ГФ XI);

Знакомство со сценарием деловой игры;

Распределение ролей;

Выбор в справочной литературе и НД методик по контролю качества предложенных преподавателем лекарственных форм;

Проведение анализа лекарственного средства и выполнение соответствующих расчетов;

Оценка качества лекарственной формы в соответствии с приказами № 214 и № 305 МЗ РФ.

Обсуждение полученных результатов.

Сценарий деловой игры В качестве объекта игрового сценария выбрана аптека № 5.

1. Раствор сульфацил-натрия 30 % - 10 мл.

Состав: сульфацил-натрия 1,0;

натрия тиосульфата 0,015;

раствора соляной кислоты 1 моль/л – 0,035 мл;

воды до 10 мл.

После закапывания в глаза данного препарата у Ступицина П.И. (2000 г.р.) наблюдалось сильное жжение и покраснение глазного яблока. Родители больного обратились в областную глазную больницу и в департамент здравоохранения с просьбой разобраться в случившемся.

2. Порошок по прописи:

Норсульфазола 1, Стрептоцида 1, Эфедрина г/х 0, После вдувания данного препарата в полость носа (с помощью специального порошковдувателя) для лечения острого насморка у больной Ивановой Н.П.

(1989 г.р.) возникло головокружение, тошнота, рвота. Гражданка обратилась в ОКБ, где при обследовании у нее был выявлен цианоз.

В связи со случившимся районный департамент здравоохранения начинает административное расследование. Назначается экспертная комиссия из двух групп специалистов – провизоров аптек № 1 и № 2 для проведения арбитражного анализа лекарственных форм, изготовленных в аптеке № 5.

Роль председателя комиссии берет на себя преподаватель, роли провизорованалитиков арбитражных аптек – студенты.

Студентам выдаются для анализа остатки двух лекарственных форм. Они должны провести независимо друг от друга анализ полученных лекарственных форм.

На отдельном участке лаборатории, играющей роль библиотеки находится учебная литература, приказы, справочники, ГФ и методические указания, предназначенные для работы членов комиссии. Каждый студент внутри экспертной группы получает индивидуальное задание. Суть задания заключается в практическом выполнении качественного и количественного анализа одной лекарственной формы. Распределяет задание председатель комиссии (преподаватель).

Провизоры-аналитики проводят полный химический контроль качества предложенных лекарственных форм. На основании проведенного анализа выдается заключение о качестве ЛФ в соответствии с приказом № 305 МЗ РФ. Выполненное задание оформляется в виде протокола. После выполнения всех заданий проходит совещание каждой экспертной группы. Затем после обсуждения полученных результатов оформляется акт экспертизы (образец прилагается), в котором проводятся результаты работы экспертов. Оба акта экспертизы оглашает председатель комиссии. Правильно проведенный анализ одной лекарственной формы оценивается в 5 баллов.

После оглашения актов экспертизы преподаватель проводит обсуждение полученных результатов с помощью контрольных вопросов (см. Приложение).

АКТ ЭКСПЕРТИЗЫ

Наименование лекарственного средства Серия _ Организация изготовитель Заказчик Дата изготовления Наименование показателей качества 1. Описание 2. Подлинность 3. Количественное определение Заключение:

Дата анализа:

Члены экспертной комиссии:

Председатель экспертной комиссии:

«Лекарственные средства из группы сульфаниламидов»

1. Напишите структурные формулы, русские и латинские названия лекарственных веществ, предложенных для изучения.

2. Проведите функциональный анализ лекарственных веществ из группы сульфаниламидов и на основе его данных обоснуйте физико-химические свойства веществ.

3. Какие сульфониламидные препараты являются производными гетероциклических систем? Назовите эти системы.

4. В соответствии с химической структурой обоснуйте методы идентификации этой группы веществ. Напишите соответствующие уравнения реакций.

5. По НД на изучаемые вещества укажите испытания на подлинность, применение которых основано на: а) кислотно-основных свойствах, б0 окислительно-восстановительных свойствах. Охарактеризуйте специфичность этих реакций.

6. С какими веществами сульфониламиды несовместимы и почему?

7. Назовите фармакопейные методы количественного определения каждого вещества и напишите уравнения соответствующих реакций.

8. В чем заключается принцип конкурентного антагонизма? Почему сульфаниламидные препараты назначают в «ударных дозах»?

ЛЕКАРСТВЕННЫЕ СРЕДСТВА, ПРОИЗВОДНЫЕ

СУЛЬФОНИЛМОЧЕВИНЫ И БИГУАНИДИНОВ

Лекарственные средства, предлагаемые для изучения:

Замещенные сульфонилмочевины: карбутамид (букарбан), глибенкламид (манинил), глипизид (минидиаб), гликвидон (глюренорм), гликлазид (предиан);

Бигуаниды: метформин АКТУАЛЬНОСТЬ ТЕМЫ: Лекарственные вещества изучаемой группы широко применяются в медицинской практике как противодиабетические (гипогликемические) средства в составе различных лекарственных форм.

ЛАБОРАТОРНАЯ РАБОТА

Контроль качества лекарственных средств, содержащих производные сульфонилмочевины Цель работы. Освоить методы контроля качества лекарственных средств, содержащих производные сульфонилмочевины Задание 1. Написать формулы, латинские и химические названия, выделить в структуре молекул группу, обусловливающую гипогликемическое действие изучаемых лекарственных веществ. Перечислить другие функциональные группы и структурные фрагменты, имеющиеся в молекуле каждого изучаемого вещества. Охарактеризовать физические свойства и растворимость препаратов группы. Ответ оформить в виде таблицы (Приложение 1).

На основе знаний о химической структуре молекул предложить возможные способы подтверждения подлинности изучаемых лекарственных средств, а также предполагаемые способы их количественного определения.

Задание 2. Провести реакции, подтверждающие подлинность лекарственных средств, производных сульфонилмочевины, результаты оформить в виде таблицы (Приложение 2).

2.1. Общие реакции подлинности на карбутамид (букарбан), а) Кислотный гидролиз с последующим выделением соответствующих аминов. М е т о д и к а. К 0,05 г препарата или навеске растертых таблеток, содержащих такое же его количество прибавляют 2-3 мл 16 % серной кислоты и кипятят в течение 3 мин, затем осторожно прибавляют 3 мл 30 % раствора гидроксида натрия – на поверхности выделяются жирные кали аминов, имеющих характерный запах.

б) Реакция щелочного гидролиза с выделением аммиака. М е т о д и к а. К 0,05 г препарата или эквивалентной этому количеству навеске растертых таблеток прибавляют 3 мл 30 % гидроксида натрия. При нагревании в течение 2- мин препарат гидролизуется с образованием аммиака, который можно обнаружить по запаху или по посинению лакмусовой бумаги.

в) Обнаружение органически связанной серы (сульфогруппа). М е т о д и к а.

Навеску, эквивалентную 0,2 г препарата, помещают в фарфоровую чашку или тигель, прибавляют 0,05 г натрия нитрата и 2 г натрия карбоната. Смесь спекают прокаливанием. После охлаждения к остатку прибавляют концентрированную кислоту хлороводородную и выпаривают досуха. К остатку прибавляют мл воды и отфильтровывают нерастворившуюся часть. К фильтрату прибавляют 5 мл горячего раствора хлорида бария 5 %, образуется белый осадок сульфата бария.

г) Реакция образования комплексных солей. М е т о д и к а. 0,1 г субстанции или эквивалентную этому количеству навеску растертых таблеток растворяют в 5 мл 0,02М раствора натрия гидроксида и делят на 2 равные части (при работе с таблетками предварительно фильтруют и используют фильтрат). К одной части далее прибавляют 2-3 капли раствора меди (II) сульфата, к другой – 2-3 капли кобальта (II) хлорида. Наблюдают цвет образовавшихся осадков.

2.2. Частные реакции подлинности на букарбан (карбутамид) а) Букарбан отличается от других лекарственных веществ группы наличием в молекуле первичной аминогруппы, поэтому для него может быть проведена реакция образования азокрасителя. М е т о д и к а. К 0,05 г препарата прибавляют 2 мл воды, 3-5 капель разведенной кислоты хлороводородной, 3-5 капель 0,1М раствора натрия нитрита. К полученному раствору прибавляют 3 мл щелочного раствора -нафтола, образуется вишнево-красное окрашивание.

б) Реакция с нингидрином. М е т о д и к а. К 0,2 г препарата прибавляют 1 мл 0,2 % раствора нингидрина в бутаноле. При нагревании смеси появляется фиолетовое окрашивание.

Задание 3. Провести фармакопейный анализ лекарственной формы, содержащей производные бигуанида. Результаты занести в паспорт аналитического контроля (Приложение 5) Таблетки метформин-БМС 500 мг и 850 мг, покрытые оболочкой (Бристол-Майерс Сквибб, отделение А/С ГЕА Фармасьютик Фабрик, Дания)

СПЕЦИФИКАЦИЯ

Высвобождение ВР, метод вращающейне менее 75 % через 45 мин Микробиологическая чистота Фармакологическое действие Активное вещество – местформина гидрохлорид:

Лекарственная форма - таблетки Внешний вид: 500 мг. Белые, круглые, выпуклые, покрытые оболочкой таблетки, имеющие код на одной стороне: I7 и LD. Ядро белого цвета.

Диаметр: I2 мм 0,2 мм.

850 мг. Белые, круглые, выпуклые, покрытые оболочкой таблетки, имеющие код на одной стороне: 17 и LD. Ядро белого цвета.

Диаметр: I2 мм 0,2 мм.

Белые, круглые, выпуклые, покрытые оболочкой таблетки, имеющие код на одной стороне: F 7 и LD. Ядро белого цвета.

Диаметр: I3 мм 0,2 мм.

Средняя масса: 500 мг – 603 мг 5 %;

850 мг – 1023 мг 5 %.

Однородность массы: 18 из 20 таблеток 5 %, 2 из 20 таблеток 10 %.

Истираемость: не более 3 %.

Распадаемость: не более 30 мин (Евр.Ф. или ГФ XI).

Тест на растворение: Согласно Брит. Фармакопее метод «Вращающаяся корзинка», 100 оборотов в мин.

Норма: не менее 75 % через 45 мин.

Среда: 0,68 % раствор (в/об) калия дигидрофосфата с рН 6,8, установленный 40 % NaOH при 37 С, 1000 мл.

Методика: помещают по 1 таблетке в 6 стаканов. Через 45 минут отбирают по 10 мл раствора образца и фильтруют.

Тестируемый препарат разводят следующим образом:

1 мл – до 50 мл (для таблеток 500 мг) 1 мл – до 100 мл (для таблеток 850 мг) Метод УФ-спектрофотометрия, максимум около анализа: 233 нм Раствор сравнения – среда растворения Расчеты: (Х, %) высвободившегося вещества рассчитывают по формуле:

где: b – указанное содержание действующего вещества в таблетке, мг f = 50 (для таблеток 500 мг) f = 100 (для таблеток 850 мг) Идентификация: УФ-спектрофотометрия.

Сканируют тестируемый раствор, приготовленный для количественного определения, и сравнивают со спектром стандарта.

Примеси (ВЭЖХ) Колонка: Bondapak C18 или Nucleosil С18 10 мкм, 300 3,9 мм внутреннего диаметра.

Подвижная фаза: 0,087 % водный раствор натрия пентасульфоната (в/об) и 0,12 % натрия хлорида (в/об) с рН 3,5, устанавливаемый 1М раствором фосфорной кислоты Скорость потока: Около 3 мл в минуту Детектор: 218 нм Исходный раствор. Экстрагируют навеску порошка таблеток, исследуемого образца: соответствующую содержанию 1,0 г метформина гидрохлорида в 100 мл воды и фильтруют (раствор 1) Разведение раствора. Приготавливают разведение исследуемого образца раствора 1:1000 водой. Концентрация 0,001 % (раствор 2).

Приготовление стандарта. Растворяют 20 мг дициандиамида-стандарта в 100,0 мл воды. Разводят 1:100 водой. Концентрация 0,0002 %.

Вводят раствор стандарта в двукратной повторности, пока не получится двух одинаковых площадей пиков. Затем вводят раствор 2, и в заключении, раствор 1.

Для исходного раствора исследуемого образца записывают хроматограмму для трехкратного определения времени удерживания метформина гидрохлорида.

Расчеты: % содержание дициандиамида:

Количественное определение. УФ-спектрофотометрия.

Тестируемый раствор:

Измельчают 10 таблеток и навеску порошка таблеток, эквивалентную 100 мг метформина гидрохлорида, помещают в мерную колбу на 500 мл. Добавляют мл воды и встряхивают на механическом шейкере в течение 20 минут с последующей обработкой ультразвуком в течение 10 минут. Доводят объем раствора до метки водой. Раствор фильтруют, отбрасывая первые порции фильтрата – 20 мл, и разводят 5,00 мл фильтрата до 200,00 мл водой.

Раствор стандарта:

Помещают 100 мг метформина гидрохлорида – стандарта в мерную колбу на 500 мл. Добавляют 300 мл воды и встряхивают на механическом шейкере в течение 10 минут с последующей обработкой ультразвуком в течение 5 минут.

Доводят объем раствора до метки водой и разводят 5,00 мл фильтрата до 200, мл водой.

Измеряют оптическую плотность тестируемого и стандартного растворов при максимуме поглощения приблизительно при 234 нм, используя в качестве раствора сравнения воду.

Расчет количественного содержания метформина гидрохлорида в 1 таблетке (Х, %) проводят по формуле:

где Ах и Аст – оптическая плотность тестируемого и стандартного раствора, соответственно;

mхи mст – навески растертых таблеток и метформина гидрохлорида стандарта, соответственно, мг;

b – указанное содержание метформина гидрохлорида в таблетках, мг;

Р – средняя масса 1 таблетки, мг Полученное значение сравнивают с приведенным в спецификации и делают вывод о соответствии.

Специфические тесты Идентификация красящего компонента титана диоксида Е171:

Удаляют оболочки с такого количества таблеток, чтобы получить 50 мг.

Сжигают оболочки в тигле в течение 15 минут, охлаждают, добавляют 2-3 капли концентрированной серной кислоты и нагревают еще 10 минут. Охлаждают приблизительно до 20 С и добавляют 13 мл почти кипящей воды, 5 мл 3 % перекиси водорода до получения 50 мл раствора.

Исследуют раствор методом спектрофотометрии.

Микробиологическая чистота: Испытания проводят в соответствии с требованиями и нормами XI. Категория 3.

ПРОИЗВОДНЫЕ БЕНЗОЛСУЛЬФОХЛОРАМИДА И АМИДА

ХЛОРБЕНЗОЛСУЛЬФОНОВОЙ КИСЛОТЫ И БЕНЗОТИАДИАЗИНА

Лекарственные вещества, предложенные для изучения:

Производные амида бензолсульфоновой кислоты: гидрохлоротиазид (дихлотиазид, гипотиазид), фуросемид, буметанид (буфенокс);

Производные бензолсульфохлорамида: хлорамин Б, галазон (пантоцид) АКТУАЛЬНОСТЬ ТЕМЫ: Лекарственные вещества изучаемой группы широко применяются в медицинской практике в виде различных лекарственных форм как диуретики и гипотензивные средства (гипотиазид, фуросемид, буфенокс), а так же как активные антисептические средства (хлорамин Б, пантоцид).

ЛАБОРАТОРНАЯ РАБОТА

Контроль качества лекарственных средств, производных бензолсульфохлорамида и амида хлорбензолсульфоновой кислоты Цель работы. Освоить методы контроля качества лекарственных средств, производных бензолсульфохлорамида и амида хлорбензолсульфоновой кислоты.

Задание 1. Напишите структурные формулы, русские и латинские названия лекарственных средств группы, охарактеризуйте их физические свойства, растворимость в различных растворителях. Ответ оформить в виде таблицы (Приложение 1).

Задание 2. Определите подлинность и количественное содержание хлорамина Б в субстанции по ГФ X с. 913. Результаты занести в таблицы (Приложение 2,3).

C6H5ClNNaO2S 3H2O (М.в. 267, 68). Белые или слегка желтоватые кристаллы или кристаллический порошок со слабым запахом хлора. Растворим в воде, легче – в горячей воде, растворим в спирте с образованием мутноватых растворов. Очень мало растворим в эфире и хлороформе.

Содержание активного хлора не менее 25 % и не более 29 %.

Хлорамин Б при нагревании в тигле разлагается со вспышкой. После прокаливания остатка и внесения его в бесцветное пламя горелки оно окрашивается в желтый цвет (наличие ионов натрия).

Полученный после растворения остатка в воде фильтрат дает положительную реакцию на сульфаты, подтверждающую присутствие атома серы в молекуле. (ГФ Х1, ч. 1) М е т о д и к а. Около 1,5 г препарата (точная навеска) растворяют в 50 мл воды в мерной колбе емкостью 100 мл и доводят объем раствора водой до метки. 20 мл раствора переносят в коническую колбу с притертой пробкой емкостью 250 мл, прибавляют 10 мл раствора йодида калия, 10 мл разведенной соляной кислоты и выделившийся йод титруют 0,1 М раствором натрия тиосульфата (индикатор – крахмал).

1 мл 0,1М раствора натрия тиосульфата соответствует 0,003546 г Cl.

Хранят в хорошо укупоренной таре, в сухом, прохладном, защищенном от света месте.

Задание 3. Определить подлинность и количественное содержание буфенокса в субстанции по ФС 42-2979-93, результат оформить в виде паспорта аналитического контроля (Приложение 5) 3.1. Провести реакции подлинности на буфенокс а) М е т о д и к а. 0,03 г препарата растворяют в 10 мл этанола 95 %; появляется фиолетовая флуоресценция.

б) М е т о д и к а. 0,02 г препарата нагревают с 1 мл кислоты азотной концентрированной на кипящей водяной бане в течение 2 мин; появляется коричневато-красное окрашивание.

в) Снять УФ - спектр поглощения 0,002 % раствор препарата в смеси 95 % этанол – 0,1М HCl (1:1) в области от 250 до 400 нм.

Спектр препарата должен иметь максимум поглощения при 267 нм нм и 343 нм 2 нм.

3.2. Провести количественное определение буфенокса в субстанции М е т о д и к а. Около 0,5 г препарата (точная навеска) растворяют в 20 мл ацетона, прибавляют 10 мл воды, 0,1 мл индикатора бромтимолового синего 2 и титруют 0,1М раствором натра едкого до синего окрашивания.

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1М раствора натра едкого соответствует 0,03644 г С7Н20N2O5S, которого в препарате должно быть не менее 99,0 %.

УЧЕБНАЯ ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКАЯ РАБОТА ( УИРС )

Анализ инъекционной лекарственной формы, содержащей производные амида о-хлорбензолсульфоновой кислоты Цель работы. Приобрести умения анализа и освоить способы расчета содержания действующего вещества в растворах для инъекций. Результаты испытаний оформить в виде паспорта аналитического контроля (Приложение 5).

Объект исследования: Раствор фуросемида 1 % для инъекций (ФС 42-3152-95).

Состав лекарственной формы и некоторые характеристики качества приведены в таблице 11.1.

Некоторые характеристики качества раствора фуросемида 1 % Задание 1. Определить цветность раствора для инъекций.

Провести испытание согласно ОФС «Определение окраски жидкости» (ГФ XI, вып. 2, с.194).

Полученные данные сравнить с данными нормативной документации (табл.

11.1).

Задание 2. Провести проверку наполняемости ампул (определение номинального объема) согласно ОФС «Инъекционные лекарственные формы» ГФ XI, вып. 2, с.140).

Объем инъекционных растворов в сосудах должен быть больше номинального (табл. 11.1). Объем инъекционного раствора в сосудах вместимостью до мл проверяют калиброванным шприцем, сосудов вместимостью 50 мл и более – калиброванным цилиндром при температуре (20 2) С.

Объем заполнения инъекционного раствора в сосудах зависит от вязкости (невязкие и вязкие растворы) и номинального объема. Количество сосудов для контроля заполнения зависит от номинального объема.

Провести измерения объема и результаты сравнить с НД (табл.).

Задание 3. Установить рН раствора потенциометрически.

Испытание провести согласно ОФС «Определение рН» (ГФ XI, вып. 1, с.113). Сделать заключение о соответствии данного показателя требованиям НД (табл.).

Задание 4. Провести испытание на механические включения в инъекционных лекарственных формах.

Данное испытание проводят в соответствии с действующей Инструкцией РД 42-501- Под механическими включениями подразумеваются посторонние нерастворимые частицы (кроме пузырьков газа), случайно присутствующие в лекарственных средствах.

Контроль на механические включения должен проводиться в условиях, исключающих возможность попадания посторонних частиц в контролируемые образцы.

Контроль и подсчет количества частиц может проводиться 3 методами: визуальным, счетно-фотометрическим, микроскопическим.

При визуальном методе контроля инъекционных препаратов на механические включения помещение и выполнение анализа защищают от прямого попадания солнечного света. Рабочее место контролера оснащают столом по ГОСТ 12.2.032-78 и источником освещения.

Визуальный контроль инъекционных препаратов на механические включения проводится контролером невооруженным глазом на черном и белом фонах.

Зона контроля при просмотре освещается электрической лампой накаливания или лампой дневного света соответствующей мощности в зависимости от степени окраски растворов, так, чтобы освещенность зоны контроля составляла не менее 2000 лк.

Расстояние от глаз контролера до объекта контроля должно быть в пределах 25-30 см. Угол между оптической осью просмотра и направлением лучей света соответствует примерно 90.Глаза контролера должны быть защищены от попадания света непосредственно от источника освещения. Линия зрения должна быть направлена несколько книзу при вертикальном положении головы.

Количество образцов, отбираемых от каждой серии инъекционного лекарственного средства, зависит от его агрегатного состояния (раствор или сухое вещество), объема инъекционного лекарственного средства (малого – 10 мл и менее, и большого – более 100 мл), объема серии и метода контроля (разрушающий или неразрушающий).

Для проведения визуального контроля инъекционных препаратов большого и малого объема, не требующих вскрытия и растворения (неразрушающий контроль), поверхность ампул, флаконов, бутылок, шприц-тюбиков и других емкостей из прозрачных полимерных материалов должна быть чистой и сухой.

Для просмотра инъекционных препаратов берут в руки ампулу за капилляры, флаконы и бутылки за горловины, шприц-тюбики – за колпачки, вносят их в зону контроля в положении «вверх донышком» и просматривают на черном и белом фонах, переводят их в положение «вниз донышком» и вторично просматривают на черном и белом фонах.

Емкости с инъекционными препаратами, в которых обнаружены видимые механические включения, считают забракованными и укладывают в отдельную тару с отметкой «Брак».

Проверить на наличие механических включений не менее 10 ампул.

Задание 5. Определить подлинность препарата.

Ультрафиолетовый спектр раствора препарата, приготовленного для количественного определения, в области от 220 до 300 нм имеет максимумы поглощения при 228 нм 2нм и 271 нм 2нм и минимум при 249 нм 2нм.

Задание 6. Выполнить испытания на содержание примесей в препарате.

Испытание на первичные ароматические амины.

М е т о д и к а. 1,2 мл препарата помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, прибавляют 7 мл воды, 5 мл диметилформамида, перемешивают и охлаждают в ледяной бане. Не вынимая колбы из бани, прибавляют при перемешивании 2 мл 0,1М раствора кислоты хлористоводородной и 1 мл 0,1М раствора натрия нитрита. Через 5 мин прибавляют 1 мл 2,5 % раствора кислоты сульфаниловой и непрерывно перемешивают раствор в течение 3 мин. Затем колбу вынимают из бани, прибавляют 1 мл 0,5 % раствора N-(1-нафтил)этилендиамин дигидрохлорида, перемешивают, доводят объем раствора диметилформамидом до метки и вновь перемешивают. Выдерживают в защищенном от света месте в течение 30 мин. Измеряют оптическую плотность полученного раствора на спектрофотометре при длине волны 530 нм в кювете с толщиной слоя 1 см.

В качестве раствора сравнения используют раствор, содержащий воду вместо раствора препарата. Оптическая плотность не должна превышать 0,2.

Задание 7. Выполнить количественное определение фуросемида в растворе для инъекций.

М е т о д и к а. 2 мл препарата помещают в мерную колбу вместимостью мл, доводят объем раствора водой до метки и перемешивают. 10 мл раствора помещают в мерную колбу вместимостью 250 мл, прибавляют 25 мл раствора натра едкого 0,1М, доводят объем раствора водой до метки и перемешивают.

Измеряют оптическую плотность полученного раствора на спектрофотометре при длине волны 271 нм в кювете с толщиной слоя 1 см.

Одновременно проводят определение оптической плотности раствора рабочего стандартного образца (РСО) фуросемида. В качестве раствора сравнения используют раствор натра едкого 0,01М.

Содержание фуросемида в 1 мл препарата в граммах (Х) вычисляют по формуле:

где Dр – оптическая плотность испытуемого раствора;

D0 – оптическая плотность раствора стандартного образца;

m – навеска фуросемида, г.

Содержание С12Н11ClN2O5S (фуросемид) в 1 мл препарата должно быть от 0,0090 до 0,011 г.

П р и м е ч а н и е. Приготовление раствора РСО фуросемида. 0,08 г (точная навеска) фуросемида помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, прибавляют 80 мл раствора натра едкого 0,1М, доводят объем до метки и перемешивают. 1 мл полученного раствора переносят в мерную колбу вместимостью 100 мл, прибавляют 9 мл раствора натра едкого 0,1М, доводят объем раствора водой до метки и перемешивают.1 мл раствора РСО содержит 0,000008 г фуросемида.Срок годности раствора 1 сутки.

Задание 8. Результаты проведенных испытаний оформить, заполнив аналитический паспорт на препарат по прилагаемой форме (Приложение 5).

Задание 9. Ответить на контрольные вопросы по теме УИРС

КОНТРОЛЬНЫЕ ВОПРОСЫ

по теме «Производные бензолсульфохлорамида и амида хлорбензолсульфоновой кислоты и бензотиадиазина»

1. Какой нормативный документ регламентирует качество лекарственных форм для инъекций?

2. Какие требования предъявляются к инъекционным растворам в отношении прозрачности и цветности?

3. Как определяют объем инъекционных лекарственных форм в ампулах?

4. Какие требования в отношении наполняемости ампул предъявляет ГФ в зависимости от номинального объема и вязкости жидкости?

5. Какое количество ампул нужно взять для контроля заполнения в соответствии с требованиями ГФ, если номинальный объем ампул 5 мл?

6. Напишите структурные формулы ЛС, производных амида бензолсульфоновой кислоты, а также общую формулу этих соединений, выделите имеющиеся функциональные группы. В формулах фуросемида и буфенокса выделите структурный фрагмент, соответствующий бензолсульфоновой кислоте и ее амиду. Выделите этот же фрагмент в формуле гипотиазида. Поясните, почему по химической структуре гипотиазид может быть отнесен как к производным бензолсульфоновой кислоты, так и к производным бензотиадиазина. Выделите структурный фрагмент бензотиадиазина в структуре гипотиазида, пронумеруйте атомы в циклах.

7. Напишите структурные формулы ЛС, производных бензолсульфохлорамида. Выделите структурный фрагмент бензолсульфокислоты и ее амида, а так же другие функциональные группы и структурные фрагменты. Укажите структурный фрагмент, отвечающий за антисептическую активность изучаемых веществ, приведите их латинские, химические названия (синонимы).

8. Напишите латинские и химические (синонимы) названия изучаемых веществ.

9. Укажите фармакологическую группу и медицинское применение изучаемых веществ, а также их лекарственные формы;

10. Перечислите основные источники и методы получения изучаемых веществ.

11. Охарактеризуйте внешний вид изучаемых веществ и их растворимость в воде и органических растворителях. Охарактеризуйте растворимость ЛС группы в растворах кислот и щелочей. Покажите связь этих свойств с химической структурой изучаемых соединений;

12. Поясните, подлинность каких из изучаемых ЛС может быть определена по реакциям (там, где возможно, приведите уравнения):

а) образования окрашенных солей с тяжелыми металлами;

б) осаждения сульфатаниона после предварительной минерализации препарата;

в) образования азокрасителя после щелочного гидролиза ЛС;

г) образования ауринового красителя с хромотроповой кислотой после кислотного гидролиза ЛС;

д) образования характерного окрашивания при взаимодействии с концентрированной кислотой серной или азотной;

е) обесцвечивания окраски индикаторов.

13. Какие химические процессы происходят при гидролизе хлорамина Б и галазона? Приведите схемы происходящих при этом реакций. Почему этот процесс получил название «кислородного распада»? Как это свойство препаратов связано с проявляемым ими антисептическим действием и как его используют при подтверждении их подлинности и количественном определении?

14 Поясните, как в одном испытании хлорамина Б на подлинность можно сразу подтвердить наличие в его составе ионов натрия и органически связанной серы. Какой еще характерный эффект имеет место при выполнении этого испытания?

15. Опишите условия, в которых может происходить «хлорный распад»

галазона и хлорамина. Как это свойство используют для количественного определения препаратов? Приведите необходимые уравнения реакций. Укажите титрант, индикатор, условия проведения определения. Проведите расчет фактора эквивалентности определяемых веществ. Поясните, в чем заключается особенность расчета титра по определяемому веществу в этом методе. В каких единицах принято выражать активность хлорамина Б, пантоцида и почему?

16. Какие примеси нормируют по НД в гидрохлоротиазиде и фуросемиде?

Какие методы для этого используют?

17. Приведите схемы реакций, лежащих в основе количественного определения гипотиазида, фуросемида и буфенокса методом неводного титрования.

Что используют в качестве растворителя в этом методе? На каких свойствах препаратов основано определение? Какие функциональные группы отвечают за эти свойства? Укажите титрант, индикатор, условия проведения титрования.

Проведите расчет фактора эквивалентности определяемых веществ в этой реакции.

18. Приведите схему реакций, лежащих в основе количественного определения гидрохлоротиазида методом цериметрии. Укажите титрант, индикатор, условия проведения определения. Проведите расчет фактора эквивалентности определяемого вещества в этой реакции.

19. Какие физико-химические методы анализа используют при проведении контроля качества лекарственных препаратов данной группы?

Укажите условия хранения ЛС группы, ответ мотивируйте.

ЛИТЕРАТУРА

1. Фармацевтическая химия : учеб. для студ. фарм. ин-тов и фарм. фак. мед.

ин-тов. – в 2 ч. :– Ч.1: Общая фармацевтическая химия. – 1993. – 432 с.

2. Фармацевтическая химия : учеб. для студ. фарм. ин-тов и фарм. фак. мед.

ин-тов. в 2 ч. : – Ч.2: Специальная фармацевтическая химия. – 1996. – 608 с.

3. Беликов В.Г. Фармацевтическая химия : учебник по фарм. химии для студ.

фарм. вузов и фак. / В.Г. Беликов. в 2 ч. : – Пятигорск: Пятигорская гос. фарм.

акад., 2003. – 713 c.

4. Анализ лекарственных смесей : учеб. пособие для студ. фарм. ин-тов и фарм. фак. мед. вузов / А. П. Арзамасцев и др. – М. : Компания Спутник, 2000.

– 275 c.

5. Руководство к лабораторным занятиям по фармацевтической химии : учеб.

пособие для студ. фарм. вузов и фак. / Э.Н.Аксенова и др. – М. : Медицина, 2001. – 379 с.

6. Государственная фармакопея Союза Советских социалистических республик / М-во здравоохранения СССР ; редкол. : М.Д.Машковский (гл.ред.) и др. – 10-е изд. – М.: Медицина, 1968. – 1035 с.

7. Государственная фармакопея СССР / МЗ РФ. – Вып. 1,2. – Репр. изд. 11-го изд. 1987 и 1990 гг., 1998. – 333 с., 397 с.

8. Лабораторные работы по фармацевтической химии : учеб. пособие / В.Г. Беликов и др. – Пятигорск, 2003. – 341 с.

9. Сливкин А.И. Контроль качества экстемпоральных лекарственных форм :

учеб. пособие / А.И. Сливкин, Н.П. Садчикова. – Воронеж : Изд-во Воронеж.

гос. ун-та, 2003. – 260 с.

10. Сливкин А.И. Физико-химические и биологические методы оценки качества лекарственных средств : учеб. пособие / А.И. Сливкин, В.Ф. Селеменев, Е.А. Суховерхова. – Воронеж : Изд-во Воронеж. гос. ун-та, 1999. – 366 с.

11. Государственный реестр лекарственных средств: Официальное издание (по сост. на 1 февр. 2002 г.) / М-во здравоохранения Рос. Федерации; Пред. кол.

Катлинский А.В. – 2002. – Т. 1. – 1300 с.

12. Экспресс-анализ с целью выявления фальсифицированных лекарственных средств : Фторхинолоны и цефалоспорины Практическое руководство / А.П. Арзамасцев и др. – М. : Русский врач, 2003. – 130 с.

13. Типовые тестовые задания для итоговой государственной аттестации выпускников высших медицинских и фармацевтических учебных заведений по специальности 040500 "Фармация" / cост. А.П. Арзамасцев и др. – М. :

ВУНМЦ, 2004. – 202 с.

14. Типовые ситуационные задачи для итоговой государственной аттестации выпускников медицинских и фармацевтических вузов по специальности "Фармация" / cост. А.П. Арзамасцев и др. – М. : ГОУ ВУНМЦ, 2004. – 139 с.

15. Лекарственные средства : пособие для врачей : в 2 т. / М.Д. Машковский;

науч. ред. С.Д. Южаков. – 2002. – Т.1. – 539 с.

16. Лекарственные средства: пособие для врачей : в 2 т. / М. Д. Машковский;

науч. ред. С.Д. Южаков. – 2002. – Т.2. – 608 с.

17. Международная фармакопея : Спецификации для контроля качества фармацевтических препаратов / пер. с англ. А.П. Арзамасцева; под ред. М.Д.

Машковского. – М. : Медицина, 1969. – 982 с.

18. European Pharmacopoeia : Supplement, 2001 : Publ. in accordance with the Convention on the Elaboration of a European Pharmacopoeia (European Treaty Series No. 50. – 3rd ed. – Strasbourg: Council of Europe, 2000. – XIV.

19. European Pharmacopoeia, 1997 : Publ. in accordance with the Convention on the Elaboration of a European Pharmacopoeia (European Treaty Series No) – 3rd ed.

– Strasbourg : Council of Europe, 1996. – XVIII.

20. The United States Pharmacopoeia (электронный ресурс). Version 4.00. – United States Pharmacopoeial Convention, 2000. – 1 электрон. опт. диск (CDROM).

ПРИЛОЖЕНИЯ

Приложение Результаты определения физических и физико-химических Лекарственное ние, синонимы) Приложение Исследуемое леИсполькарственное Результаты Приложение Результаты количественного определения лекарственного вещества химическими методами Масса навески, (аликвота, мл) Результаты количественного определения лекарственного вещества физико-химическими методами Масса навески, взятая Результаты измерений Приложение результатов анализа лекарственного вещества Время начала анализа 1. Свойства лекарственного вещества.

2. Испытания на подлинность.

3. Испытания на чистоту.

4. Количественное определение.

5. Заключение.

Время окончания анализа Приложение Наименование Серия Испытания проведены по НД 1. Описание 2. Подлинность 3. Испытания на чистоту Хлориды и т.д.

4. Количественное определение 5. Упаковка 6. Маркировка 7. Срок годности Учебно-методическое издание Практикум по фармацевтической химии по специальности 060108 (040500) «Фармация»

Формат 60х841/16. Объем 8 п.л.

Воронежский государственный университет 394006, г. Воронеж, Университетская пл., Отпечатано в типографии ИПЦ ВГУ 394000, г. Воронеж, ул. Пушкинская,