[ Учреждение образования
«Международный государственный экологический университет
имени А.Д.Сахарова»
УТВЕРЖДАЮ
Проректор по учебной работе
МГЭУ им. А.Д.Сахарова
О.И. Родькин
2012 Регистрационный № _
ИММУНОДИАГНОСТИКА.
КЛИНИЧЕСКАЯ ИММУНОЛОГИЯ
Учебная программа для специальности 1 – 80 02 01 Медико-биологическое дело Факультет Экологической медицины Кафедра иммунологии Курс Семестр осенний Лекции (часы) 28 часов Практические (семинарские) занятия (часы) 8 часов Лабораторные занятия (часы) 48 часов Всего аудиторных часов по дисциплине 84 часа Всего часов по дисциплине 140 часов Зачет (семестр) осенний Экзамен (семестр) Контрольная работа (месяц) Курсовой проект (работа) (семестр) Форма получения высшего образования очная Составила: Т.Р. Романовская, доцент кафедры иммунологии учреждения образования «Международный государственный экологический университет имени А.Д.Сахарова», кандидат медицинских наук Минск 2012 г.Учебная программа составлена на основе учебной программы для высших учебных заведений «Иммунодиагностика. Клиническая иммунология», регистрационный №_.
Рассмотрена и рекомендована к утверждению в качестве рабочего варианта на заседании кафедры иммунологии 28.05.2012 г. Протокол № Заведующая кафедрой _ М.М. Зафранская Одобрена и рекомендована к утверждению Советом факультета экологической медицины МГЭУ им. А.Д.Сахарова 29.05.2012 г. Протокол № Председатель _М.С. Морозик
I. ПОЯСНИТЕЛЬНАЯ ЗАПИСКА
Дисциплина специализации «Иммунодиагностика. Клиническая иммунология» посвящена изучению комплекса иммунодиагностических процедур, позволяющих выявлять нарушения структурно-функциональной организации иммунной системы, а также рассмотрению причин, механизмов развития и клинических проявлений ряда заболеваний человека, протекающих с вовлечением в патогенез иммунной системы.Как известно, иммунопатологические реакции сопутствуют многим заболеваниям человека, а также могут иметь самостоятельное значение. Частая встречаемость иммунопатологических реакций обусловлена собственными особенностями иммунной системы, среди которых способность лимфоцитов к бластной трнасформации, возможность системных проявлений активности цитокинов и некоторые другие.
Поэтому особое значение приобрели методические подходы как к проведению иммунодиагностических методов, так и к анализу и интерпретации полученных результатов, чему уделено достаточно большое внимание в настоящей дисциплине специализации.
Цель изучения дисциплины «Иммунодиагностика. Клиническая иммунология» состоит в том, чтобы сформировать у студентов современные представления о применении иммунодиагностических методов при различных заболеваниях, в патогенезе которых нарушения иммунитета играют заметную роль.
Задачи дисциплины:
1) сформировать основы теоретических знаний об этиологии и патогенезе воспалительных поражений разных органов и систем организма человека, связанных с наличием иммунодефицитного состояния;
2) ознакомить студентов с современными иммунодиагностическими комплексами, предназначенными для выявления нарушений функционирования иммунной системы;
3) обучить студентов основным иммунологическим методам, позволяющих выявить нарушения функционирования иммунной системы.
В результате усвоения этой дисциплины обучаемый должен:
знать:
– причины и механизмы развития иммунодефицитных состояний;
– закономерности изменений лабораторных показателей при иммунодефицитах;
– принципы исследовательских иммунологических методов и технологий, позволяющих применять их с целью диагностики нарушений структурнофункционального состояния иммунной системы;
- осуществлять методы количественной и функциональной оценки иммунокомпетентных клеток и иммуноактивных молекул;
– планировать проведение иммунологических методов исследований для решения прикладных диагностических задач;
- анализировать результаты иммунологического исследования и интерпретировать данные диагностического исследования.
Учебная программа по дисциплине «Иммунодиагностика. Клиническая иммунология» разработана в соответствии с учебной программой по дисциплине «Иммунодиагностика. Клиническая иммунология» по специальности – 80 02 01 «Медико-биологическое дело».
Учебный материал включает следующие разделы: «Иммунодиагностические методы», «Клиническая иммунология». Программа рассчитана на часов, из них 84 часа аудиторных занятий (28 часов лекций, 48 часов лабораторных занятий, 8 часов практических занятий).
Для изучения дисциплины необходимо усвоение следующих разделов и тем смежных дисциплин специальностей: «Иммунология» (основные понятия, механизмы иммунного ответа в норме и патологии, антигены, антитела, механизмы взаимодействия антиген-антитело, диагностические моноклональные антитела), «Цитология, гистология и эмбриология» (клетки крови, костного мозга, тимуса, селезенки, лимфоузлов, гистиоциты, эмбриогенез), «Нормальная анатомия» (органы иммунной и кроветворной систем), «Нормальная физиология» (регуляция сосудистого тонуса, синапсы, система крови), «Современные методы микроскопии» (методы визуализации клеток, методы приготовления микроскопических препаратов, методы окрашивания микроскопических препаратов, особенности морфологии иммунокомпетентных клеток).
В преподавании дисциплины «Иммунодиагностика. Клиническая иммунология» при чтении лекций используются технология проблемномодульного обучения и проблемно-ориентированного междисциплинарного подхода. Проведение практических и лабораторных занятий предполагает моделирование проблемных ситуаций и разработку методов их преодоления.
Самостоятельная работа студентов по дисциплине осуществляется в аудиторной и внеаудиторной формах. Для оценки самостоятельной работы студентов проводиться контроль за ее выполнением в виде собеседования, коллоквиумов и рефератов.
2. СОДЕРЖАНИЕ УЧЕБНОГО МАТЕРИАЛА
РАЗДЕЛ 1. ИММУНОДИАГНОСТИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ
1.1. Организация проведения иммунологических исследований Методы иммунодиагностических исследований. Уровни исследования структурно-функционального состояния иммунной системы (клинический, инструментальный, лабораторный).Принципы организации иммунологической лаборатории. Документы, регламентирующие деятельность иммунодиагностической лаборатории в Республике Беларусь. Оснащение иммунодиагностической лаборатории.
Алгоритмы приобретения реактивов и оборудования для целей иммунодиагностических исследований.
Техника безопасности при работе в клинико-диагностической лаборатории. Хранение, учет и применение ядовитых, сильнодействующих, едких, взрывоопасных и огнеопасных средств и растворов и работа с инфицированным материалом. Правила и принципы взятия биологического материала для исследования.
Виды биологических материалов, которые могут быть использованы для иммунологического исследования. Хранение биологического материала, предназначенного для иммунодиагностического исследования.
Методы сепарации клеток, принципы и характеристика. Использование градиента плотности для разделения клеточных популяций. Методы сепарации, основанные на использовании моноклональных антител.
1.2. Иммунный статус: методы исследования Иммунный статус: определение, системы оценки. Иммунопатогенетический подход в исследовании иммунного статуса. Иммунограмма.
Формирование нормативов иммунологических параметров. Причины недостаточной эффективности иммунограммы.
Особенности крови как материала для исследования иммунного статуса. Значение параметров иммунного статуса и общего анализа крови при разных заболеваниях и состояниях.
Алгоритм анализа и интерпретации иммунограммы. Показания для назначения иммунограммы. Периодичность мониторинга иммунного статуса.
1.3. Методы исследования количества и функциональной активности лимфоцитов Иммунофенотипические, морфологические и функциональные особенности лимфоцитов. Методы изучения лимфоцитов.
Общая характеристика методов иммунофенотипирования. Историческое значение, достоинства и недостатки реакции розеткообразования и компементзависимого цитолиза для идентификации лимфоцитов. Технология иммунофенотипирования на основе использования моноклональных антител.
Проточная цитофлуориметрия.
Основные направления оценки функциональных свойств лимфоцитов.
Принципы исследования. Культуральный метод, его значение в исследовании иммунокомпетентных клеток. Основные правила культивирования клеток в искусственных условиях (in vitro). Способы контроля жизнеспособности клеток в процессе культивирования Оценка пролиферативной активности лимфоцитов. Оценка цитокинпродуцирующей активности лимфоцитов и других типов иммунокомпетентных клеток. Оценка эффекторных функции лимфоцитов.
1.4. Методы исследования количества и функциональной активности нейтрофилов Иммунофенотипические, морфологические и функциональные особенности нейтрофилов. Методы изучения нейтрофилов. Исследование функциональной активности нейтрофилов. Принципы оценки адгезивных, миграционных, поглотительных и метаболических свойств фагоцитов. Значение исследования показателей функциональной активности нейтрофилов в исследовательской и иммунодиагностической практике.
1.5. Методы исследования иммуноактивных молекул Виды (классификация) иммуноактивных молекул по функциональной активности. Основные направление исследования иммуноактивных молекул.
Исследование системы комплемента. Методы определения концентрации, функциональной активности и субкомпонентов-анафилатоксинов в биологическом материале. Применение иммунохимических и биологических методов в исследовании системы комплемента. Основные параметры функциональной активности комплемента.
Общая характеристика методов исследования иммуноглобулинов. Оптические методы идентификации комплексов антиген-антитело. Индикаторные методы идентификации комплексов антиген-антитело. Принципы нефелометрии, турбидиметрии и иммунохимического анализа для детекции и исследования иммуноглобулинов.
Исследовательские технологии для изучения цитокинов. Возможности и ограничения в исследовании секретированных молекул цитокинов.
РАЗДЕЛ 2. КЛИНИЧЕСКАЯ ИММУНОЛОГИЯ
2.1. Первичные иммунодефициты: молекулярно-биологические и Определение понятия и классификация первичных иммунодефицитов (ПИД). Основные и ассоциативные синдромы ПИД. Врожденные иммунодефициты с установленными генными мутациями.Нарушения развития и дифференцировки Т-лимфоцитов как причина формирования врожденных иммунодефицитов. Тяжелые комбинированные иммунодефициты (ТКИД). ПИД, связанные с нарушением экспрессии МНС и TCR. ПИД с преимущественным нарушением В-клеточного иммунного ответа. Дефекты активации В-лимфоцитов. Болезнь Бруттона, гипер-IgМсиндром, общий вариабельный иммунодефицит (ОВИН).
Врожденные дефекты фагоцитарной системы. Дефицит молекул лейкоцитарной адгезии, кислородзависимой микробицидности, хемотаксиса.
Панель скрининговых лабораторных тестов для диагностики ПИД. Лабораторная диагностика ПИД с преимущественными поражением Тклеточного звена иммунитета. Лабораторная диагностика ПИД с преимущественными поражением В-клеточного звена иммунитета. Лабораторная диагностика врожденных дефектов фагоцитарной системы и системы комплемента.
Современные подходы к лечению первичных иммунодефицитов.
Трансплантация костного мозга (ТКМ), генная терапия.
2.2. Вторичные иммунодефициты: причины и механизмы развития Вторичные иммунодефициты. Определение понятия. Клинические и лабораторные маркеры вторичных иммунодефицитов. Условия и причины возникновения вторичных иммунодефицитов. Значение инфекционного и экологического фактора в развитии иммунодефицитов. Роль генетических факторов в развитии вторичных иммунодефицитов. Классификация иммунодефицитов по локализации и механизму развития. Лабораторная диагностика вторичных ИД.
Иммунодефициты, вызванные лечебными мероприятиями. Иммунодефициты, развивающиеся после приема лекарственных препаратов, оперативного вмешательства, травмы. Основные фармакологические препараты, обладающие иммуноповреждающими свойствами.
2.3. Особенности патологических процессов, локализующихся в биотопах, ассоциированных с мукозо-ассоциированной иммунной Структура иммунной системы слизистых оболочек желудочнокишечного тракта и дыхательных путей: клеточные и гуморальные факторы.
Основные особенности миграции лимфоцитов слизистых оболочек желудочно-кишечного тракта. Понятие об оральной иммунологической толерантности. Роль иммуноглобулина А в обеспечении иммунного ответа: синтез и секреция IgA.
Роль иммунной системы при развитии заболеваний желудочнокишечного тракта (гастрит, дуоденит, язвенная болезнь желудка и 12перстной кишки). Заболевания желудочно-кишечного тракта (ЖКТ), связанные с аутоиммунными процессами (неспецифический язвенный колит, болезнь Крона). Роль иммунной системы при развитии заболеваний дыхательных путей (острых респираторных заболеваний, острых и хронических бронхитов, пневмоний).
2.4. Иммунологические особенности заболеваний сердца и почек Иммунное воспаление и атерогенез. Современные гипотезы развития атеросклероза. Иммунопатология хронической сердечной недостаточности.
Цитокиновая гипотеза возникновения заболевания. Иммунологические изменения при ишемическом повреждении миокарда. Кардиопротективная роль белков теплового шока.
Патогенез иммунокомплексного поражения почек. Нефритогенные аутоантитела. Иммунодиагностика иммунообусловленных заболеваний почек.
Анти-БМК-нефрит. Механизмы повреждения гломерулярного фильтра. Роль мезангиальных клеток в развитии патологических процессов в почечных клубочках.
2.5. Роль иммунной системы при беременности Физиологическая беременность как пример успешной формы трансплантации. Барьерная функция плаценты и антигенов ее главного комплекса гистосовместимости, a-фетопротеина, цитокинов (ИЛ-10), трансформирующего фактора роста (TGF-), натуральных киллеров, материнских анти-МНСиммуноглобулинов G и др. в механизмах, обеспечивающих вынашивание гетерозиготного плода в организме матери развития. Роль иммунной системы в механизмах имплантации яйцеклетки. Иммунологические выкидыши как причина невынашивания беременности. Этиопатогенез гемолитической болезни новорожденных, иммунологическая диагностика, иммунопрофилактика.
2.6. Иммунологические аспекты трансплантации органов, тканей, стволовых клеток. Переливание крови Виды трансплантатов. Условия проведения трансплантации. Классификация реакций отторжения трансплантата. Механизмы развития. Трансплантация костного мозга. Подготовка к трансплантации. Понятие о «химеризме». Лекарственная толерантность.
Переливание крови. Группы крови, определение понятия. Иммуногенетика и медико-биологические аспекты систем ABO, Rh, Ii, Левис. Роль лейкоцитарных, тромбоцитарных антигенов при переливании крови. Иммунологическая безопасность гемотрансфузий. Тестирование на инфекции. Препараты крови и методы обеззараживания препаратов крови.
Методы подбора пар «донор-реципиент» в комплексе процедур, предшествующих проведению трансплантации органов и тканей. Гены и молекулы главного комплекса гистосовместимости (ГКГ). Физиологическая роль молекул главного комплекса гистосовместимости. Значение молекул ГКГ в реакциях отторжения трансплантата. Организация иммуногенетических исследований. Области применения иммуногенетических исследований.
Общая характеристика методов определения молекул/генов главного комплекса гистосовместимости. Лифоцитотоксический тест, метод смешанной культуры лимфоцитов, молекулярно-генетические методы типирования ГКГ.
2.7. Основные группы иммунокорригирующих препаратов Иммунокорригирующая терапия, определение. Классификация иммунокорригирующих мероприятий. Заместительная иммунокоррекция, определение, показания к применению, побочные эффекты и проблемы заместительной иммунокоррекции. Основные препараты для проведения заместительной иммунокоррекции. Экстракорпоральные методы иммунокоррекции.
Использование заместительной иммунокоррекции в целях экстренной профилактики инфекционных заболеваний у здоровых лиц: достоинства и побочные эффекты.
Иммуносупрессирующая терапия, определение, показания к применению, побочные эффекты и противопоказания. Основные группы препаратов для иммуносупрессирующей терапии. Механизм действия. Препараты на основе моноклональных антител, области их применения.
Понятие об иммуномодулирующей терапии, показания к применению.
Проблемы иммуномодулирующей терапии. Основные группы иммуномодуляторов, механизм действия, отдельные препараты. Подходы и принципы проведения иммунокорригирующей терапии.
УЧЕБНО – МЕТОДИЧЕСКАЯ КАРТА
Номер раздела, темы, заняных часов тия;2. Документы, регламентирующие деятельность иммунодиагностической лаборатории в Республике Беларусь.
Виды биологических материалов, которые могут быть использонологических Иммунный статус: методы исследования Иммунный статус: определение, системы оценки Алгоритмы анализа и интерпретации иммунограммы 1. Формирование нормативов иммунологических параметров.
2. Причины недостаточной эффективности иммунограммы. Методы иммуОсобенности крови как материала для исследования иммунного нологических Значение параметров иммунного статуса и общего анализа крови при разных заболеваниях и состояниях 1.Показания для назначения иммунограммы.
2.Периодичность мониторинга иммунного статуса.
3.Анализ гемограмм и иммунограмм 1.4. Методы исследования количества и функциональной активности 1.4.1 Иммунофенотипические, морфологические и функциональные особенности лимфоцитов 2.Историческое значение, достоинства и недостатки реакции розетко- Лабораторная образования и компементзависимого цитолиза для идентификации работа 4.
3.Технология иммунофенотипирования на основе использования моноклональных антител. Проточная цитофлуориметрия.
Культуральный метод в оценке функциональной активности 2.Культуральный метод, его значение в исследовании иммунокомпе- лабораторный 3. Оценка пролиферативной и цитотоксической активности лимфоци- Лабораторная 1.5. Методы исследования количества и функциональной активности Методы исследования иммуноактивных молекул Методы исследования системы комплемента Методы исследования иммуноглобулинов и цитокинов Первичные иммунодефициты: молекулярно-биологические и 1. Основные и ассоциативные синдромы ПИД.
2. Нарушения развития и дифференцировки Т-лимфоцитов как причина формирования врожденных иммунодефицитов.
3.ПИД с преимущественным нарушением В-клеточного иммунного Комбинированные первичные иммунодефициты 3. Врожденные дефекты фагоцитарной системы.
Методы диагностики и направления терапии первичных иммуноная презентадефицитов 1. Механизмы формирования первичных иммунодефицитов.
2. Панель скрининговых лабораторных тестов для диагностики ПИД.
3.Современные подходы к лечению первичных иммунодефицитов.
Вторичные иммунодефициты: причины и механизмы развития Вторичные иммунодефициты 1.Определение понятия «вторичный иммунодефицит».
2. Условия и причины возникновения вторичных иммунодефицитов.
3. Значение инфекционного и экологического фактора в развитии иммунодефицитов.
4. Роль генетических факторов в развитии вторичных иммунодефицитов.
Иммунодефициты, вызванные лечебными мероприятиями препаратов, оперативного вмешательства, травмы.
2. Основные фармакологические препараты, обладающие иммуноповреждающими свойствами.
Клинические и лабораторные маркеры вторичных иммунодефиФронтальный 2. Клинические симптомы вторичных иммунодефицитов.
3. Лабораторная диагностика вторичных ИД.
2.3. Особенности патологических процессов, локализующихся в бионая презентатопах, ассоциированных с мукозо-ассоциированной иммунной 2.3.1. Структура иммунной системы слизистых оболочек желудочнокишечного тракта и дыхательных путей 1. Клеточные и гуморальные факторы слизистых оболочек ЖКТ и дыхательного тракта.
2. Основные особенности миграции лимфоцитов слизистых оболочек желудочно-кишечного тракта.
3.Понятие об оральной иммунологической толерантности.
4.Роль иммуноглобулина А в обеспечении иммунного ответа: синтез и 3. Роль иммунной системы при развитии заболеваний дыхательных Иммунологическая диагностика заболеваний, локализующихся в мых мукозо-ассоциированной иммунной системой.
2. Биологические материалы, используемые для иммунологического исследования мукозо-ассоциированной иммунной системы.
3. Лабораторная диагностика заболеваний ЖКТ и дыхательных путей.
Иммунологические особенности заболеваний сердца и почек Иммунологические особенности заболеваний сердца 2. Современные гипотезы развития атеросклероза.
3. Иммунопатология хронической сердечной недостаточности.
Иммунологические особенности заболеваний почек 3.Анти-БМК-нефрит.
2.5. Роль иммунной системы при беременности 3. Иммунологические выкидыши как причина невынашивания беременности.
4. Этиопатогенез гемолитической болезни новорожденных, иммунологическая диагностика, иммунопрофилактика.
Иммунологические аспекты трансплантации органов, тканей, Трансплантация органов и тканей 1. Виды трансплантатов.
2. Классификация и механизмы развития реакций отторжения трансплантата.
3. Трансплантация костного мозга.
3. Иммунологическая безопасность гемотрансфузий.
Методы подбора пар «донор-реципиент» в комплексе процедур, 1.Общая характеристика методов определения молекул/генов ГКГ. торный пракТестовые 4. Молекулярно-генетические методы типирования ГКГ.
Основные группы иммунокорригирующих препаратов 3. Основные группы и механизмы действия препаратов для заместительной, иммуномодулирующей, иммуносупрессирующей иммунокоррекции
IV. ИНФОРМАЦИОННО-МЕТОДИЧЕСКАЯ ЧАСТЬ
Примерный перечень лабораторных занятий п/п 1. Виды биологических материалов, которые могут быть использованы для иммунологического исследования 2. Алгоритмы анализа и интерпретации иммунограммы 3. Значение параметров иммунного статуса и общего анализа крови при разных заболеваниях и состояниях 4. Иммунофенотипические, морфологические и функциональные особенности лимфоцитов 5. Культуральный метод в оценке функциональной активности лимфоцитов 6. Исследование функциональной активности нейтрофилов 7. Методы подбора пар «донор-реципиент» в комплексе процедур, предшествующих проведению трансплантации органов и тканей 8. Методы исследования системы комплемента 9. Методы исследования иммуноглобулинов и цитокинов Основная литература 1. Наглядная иммунология / Г.-Р. Бурместр, А Пецутто; Пер. с англ. – М.:БИНОМ.Лаборатория знаний, 2007. – 320 с.
2. Иммунология: учебник / А.А. Ярилин. – М. : ГЕОТАР-Медиа, 2010. – 3. Ройт, А.Основы иммунологии. М.: Мир. 2000. – 1010 с.
4. Hay, F.C. Practical immunology / Frank C. Hay, Olwyn M.R. Westwood; th ed. – Oxford : Blackwell Publishing Company, 2002. – 409 p.
5. Методы иммунологических исследований : лабораторный практикум / сост.:Т. Р. Романовская [и др.]. – Минск : МГЭУ им. А. Д. Сахарова, Дополнительная литература 6. Полетаев, А.Б. Клиническая лабораторная иммунология: Избранные лекции. – М.: ООО «Медицинское информационное агенство», 2007. – 7. Змушко Е.И., Белозеров Е.С., Митин Ю.А. Клиническая иммунология:
руководство для врачей. – СПб: Питер, 2001. – 573с.
8. Хаитов P.M., Игнатьева Г.А., Сидорович И.Г. Иммунология: Учебник.
— М.: Медицина, 2000. — 432 с 9. Основы клинической иммунологии и методологические подходы к оценке иммунного статуса: Практикум / А.Г. Гончаров; И.С. Фрейдлин;
В.С. Смирнов и др.; Под общей редакцией М.Г. Романцова / Калинингр. ун-т. - Калининград, 1997. - 73 с.
10. Essentials of Clinical Immunology. H. Chapel [et al.]Blackwell Science:
Oxford, 2006. – 368 p.
11. Essential Clinical Immunology. Ed. J.B. Zabriskie. – Cambridge University Press, 2009. – 373 p.
«