На правах рукописи

ПАРШИНА

Наталья Анатольевна

БИОФАРМАЦЕВТИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ ГЕМЦИТАБИНА –

ПРОТИВООПУХОЛЕВОГО ЛЕКАРСТВЕННОГО СРЕДСТВА ГРУППЫ

АНТИМЕТАБОЛИТОВ

15.00.02 – фармацевтическая химия, фармакогнозия

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Москва — 2009 1

Работа выполнена в экспресс-лаборатории централизованного клиниколабораторного отдела НИИ КО РОНЦ им. Н. Н. Блохина РАМН и на кафедре фармацевтической и токсикологической химии медицинского факультета ГОУ ВПО Российский Университет дружбы народов Научные руководители:

доктор биологических наук, профессор Байкова Валентина Николаевна доктор химических наук, профессор Плетенева Татьяна Вадимовна

Официальные оппоненты:

доктор фармацевтических наук, профессор Берлянд Александр Семенович доктор биологических наук, профессор Горбачева Лора Борисовна

Ведущая организация: Российский Государственный Медицинский Университет

Защита диссертации состоится «25» декабря 2009 г. в 14 часов на заседании Диссертационного Совета Д.212.203.13 при Российском университете дружбы народов (117198 г. Москва, ул. Миклухо-Маклая, д.6).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке РУДН (117198, г. Москва, ул. МиклухоМаклая, д.6).

Автореферат разослан «_» ноября 2009 г.

Ученый секретарь диссертационного совета доктор биологических наук профессор Е. В. Лукашева

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ДИССЕРТАЦИИ

Актуальность темы. Гемцитабин (2',2'-дифтородезоксицитидин, торговое название «Гемзар») – лекарственное средство из группы антиметаболитов пиримидина – применяется в терапии злокачественных новообразований (A. Veltkamp - 2008; P. Shmidt Гемцитабин является препаратом выбора в терапии нерезектабельного рака поджелудочной железы (C. Louvet - 2003; J. Abbruzzese - 2002). Уникальный механизм действия, выраженная эффективность гемцитабина в терапии различных типов опухолей у взрослых, а также умеренная токсичность создали предпосылки для внедрения препарата в детскую практику (J. Reid - 2004).

Оптимизация режимов введения гемцитабина путем модификации дозы и длительности инфузии – актуальная задача противоопухолевой терапии (M. Zwitter Достижение максимальной эффективности терапии эскалацией дозы препарата нецелесообразно, так как влечет за собой развитие тяжёлых токсических реакций. В связи с этим важной задачей является поиск новых режимов дозирования, заключающихся в увеличении продолжительности инфузии по сравнению со стандартным режимом с одновременным снижением дозы гемцитабина. При стандартной 30-минутной инфузии 1000-1500 мг/м2 (J. Clark - 2002, M. Crul - 2005) не учитывают особенности метаболизма и биотрансформации гемцитабина. Вследствие этого большую часть времени его концентрация в плазме крови превышает концентрацию насыщения дезоксицитидинкиназы - фермента, обеспечивающего образование активных внутриклеточных форм пролекарства, что приводит к неполной субоптимальной активации гемцитабина.

Исследования последних лет показали, что с изменением скорости введения гемцитабина меняется его противоопухолевая активность и переносимость (L. Cattel — 2006, M. Saif - 2006).

особенностей метаболизма гемцитабина разработан режим фиксированной дозовой интенсивности (Fixed Dose Rate - FDR), когда гемцитабин инфузируется длительно (до 120 мин) с постоянной скоростью 10 мг/м2 в минуту (M. Tempero — 2003).

В условиях пролонгированного введения для оценки скорости накопления внутриклеточных метаболитов, ответственных за реализацию цитотоксического эффекта гемцитабина, необходимо исследовать его фармакокинетику. Кроме того, особое значение приобретает оценка эффективности и безопасности режима длительных инфузий препарата на основе контроля общих клинических и биохимических показателей крови.

Химиотерапия гемцитабином в сочетании с другими цитостатиками успешно применяется в лечении различных гистологических подтипов лимфомы Ходжкина у взрослых. Но недостаточная и противоречивая информация о безопасности режимов химиотерапии, включающих гемцитабин, ограничивает его применение для лечения гемобластозов и солидных опухолей у детей (P. Steinherz - 2002). Для эффективного дозирования гемцитабина в схемах химиотерапии в детской практике требуется детальное исследование особенностей его метаболизма.

Цель работы – разработка системы терапевтического лекарственного мониторинга гемцитабина у больных раком поджелудочной железы и лимфомой Ходжкина на основе методик количественного определения в лекарственном препарате и плазме крови методом ВЭЖХ и кинетического контроля общеклинических и биохимических Задачи исследования:

1. Разработать методики контроля качества лекарственного препарата и количественного определения гемцитабина в плазме крови методом ВЭЖХ.

оптимизации химиотерапии.

Определить изменение биохимических и гематологических показателей крови у больных раком поджелудочной железы, получающих препарат в режиме модифицированной инфузии с фиксированной скоростью введения.

4. Провести терапевтический мониторинг гемцитабина у детей с лимфомой Ходжкина при его ведении в состав комплексной химиотерапии для оценки эффективности и безопасности применения.

гепатотоксичности при различных схемах терапии гемцитабином по кинетическим параметрам биохимических и общеклинических показателей крови.

Разработана и валидирована экспресс-методика определения гемцитабина охарактеризовать различные серии препарата по показателям качества: «подлинность», «испытания на чистоту», «количественное определение».

Разработана и валидирована экспресс-методика определения гемцитабина в плазме крови методом ВЭЖХ. Методика позволила проводить терапевтический лекарственный мониторинг гемцитабина и продемонстрировать преимущественную эффективность не применявшегося ранее режима пролонгированных инфузий гемцитабина по сравнению со стандартным введением.

Впервые проведена оценка безопасности не применявшегося ранее режима пролонгированных инфузий гемцитабина в терапии рака поджелудочной железы по кинетическим параметрам биохимических и общеклинических показателей.

Разработанная методика определения гемцитабина в плазме крови позволяет мониторировать его содержание при назначении инфузий препарата в различных режимах и схемах моно- и полихимиотерапии для контроля и коррекции дозы.

На основании результатов терапевтического лекарственного мониторинга гемцитабина и оценки показателей биохимического и общеклинического анализа крови модифицированный режим с фиксированной скоростью введения может быть рекомендован для терапии неоперабельного рака поджелудочной железы взамен действующему стандартному протоколу.

Выявленные изменения биохимических и гематологических показателей крови — маркеров гепатотоксичности, нефротоксичности, миелосупрессии позволят врачам своевременно осуществлять коррекцию нежелательных побочных эффектов при применении гемцитабина в составе схем химиотерапии лимфомы Ходжкина и солидных опухолей у детей.

Экспресс-метод количественного определения гемцитабина гидрохлорида реализуется в экспресс-лаборатории РОНЦ им. Н. Н. Блохина РАМН.

Рекомендации по применению модифицированного режима инфузий гемцитабина взамен стандартного режима введения, биокинетическая оценка показателей гематологической токсичности и гепатотоксичности у детей, получающих гемцитабин в составе полихимиотерапии используются в лечебной практике в РОНЦ им. Н. Н. Блохина РАМН (отделение клинической фармакологии НИИ КО и отделение химиотерапии гемобластозов НИИ ДОГ).

Результаты исследования внедрены в учебный процесс кафедры фармацевтической и токсикологической химии медицинского факультета РУДН (специальность «Фармация», дисциплина «фармацевтическая химия» – раздел «Современные методы стандартизации и контроля качества лекарственных средств», дисциплина «токсикологическая химия» – раздел «Аналитическая токсикология»).

Апробация диссертации. Основные положения работы доложены и обсуждены на Международном конгрессе «Здоровье и образование в XXI веке», «Концепции болезней цивилизации» (Москва, 2007 г.), на совместных научных семинарах кафедр фармацевтической и токсикологической химии, биологии и общей генетики, экспресслаборатории, отделения клинической фармакологии РОНЦ РАМН.

Результаты работы представлены в периодической печати: 4 статьи опубликованы в журналах списка ВАК.

Структура и объем работы. Диссертация изложена на 156 страницах и состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследований, результатов исследования и их обсуждения, выводов и библиографического указателя, включающего 140 источников. Работа иллюстрирована 45 рисунками и 32 таблицами.

Связь задач исследования с научным планом НИР РОНЦ им. Н.Н. Блохина РАМН Диссертационная работа выполнена в рамках НИР РОНЦ им. Н.Н. Блохина РАМН:

№ 00-15-97909 «Биохимические механизмы токсикокинетики различных режимов химиотерапии при злокачественных опухолях у детей», «Изучение общих биохимических механизмов синдрома токсичности у детей, страдающих злокачественными опухолями».

Положения, выносимые на защиту:

Валидация методики качественного и количественного определения гемцитабина в лекарственном препарате (метод ВЭЖХ) Валидация методики качественного и количественного определения гемцитабина в плазме крови (метод ВЭЖХ).

Оценка безопасности режима пролонгированных инфузий с фиксированной гематологических показателей крови у больных при пролонгированных инфузиях с фиксированной скоростью введения.

Оценка эффективности модифицированного режима введения гемцитабина при монотерапии рака поджелудочной железы.

СОДЕРЖАНИЕ ДИССЕРТАЦИОННОГО ИССЛЕДОВАНИЯ

Для проведения оценки качества лекарственного препарата (ЛП) “Гемзар” использовали: лиофилизированный порошок для приготовления раствора для инъекций фл. 200 мг и 1 г «Eli Lilly» (Франция).

В работе были использованы следующие реактивы: стандарты гемцитабина гидрохлорида (USP, США) и дезоксицитидина (Sigma-Aldrich); компоненты подвижной фазы - ацетонитрил (HPLC grade, Sigma-Aldrich), метанол (HPLC grade, Merck), натрия дигидрофосфат «хч», ледяная уксусная кислота (Sigma-Aldrich), аммония ацетат (for molecular biology, Sigma-Aldrich), о-фосфорная кислота (85%, «чда»).

В исследование было включено 17 пациентов (11 мужчин, 6 женщин) с местнораспространенного рака головки и тела поджелудочной железы, не подвергавшихся ранее химио- и радиотерапии. Возраст больных — от 47 до 64 лет (57,1 ± 4,7 лет). Их состояние характеризовалось удовлетворительными показателями функционирования костного мозга (число лейкоцитов 3•109/л, число тромбоцитов 100•109/л, уровень гемоглобина 90г/л).

Основными критериями исключения из исследования были метастазы в ЦНС;

неадекватное функционирование почек (уровень креатинина в сыворотке 120 мкмоль/л) и печени (билирубин < 1,5 мг/дл, уровни АЛТ и АСТ 3 N). Данная группа пациентов получала гемцитабин в рамках протокола «Исследование дозозависимого режима длительных инфузий гемцитабина у больных местнораспространенным и диссеминированным раком поджелудочной железы», разработанного в отделении Клинической фармакологии НИИ КО РОНЦ РАМН. Препарат вводили внутривенно, капельно в виде 120минутной инфузии (10 мг/м2 в мин) в 1-й, 8-й и 15-й дни курса.

Затем следовал двухнедельный перерыв. Число курсов составило 1- 4.

Для сравнительной оценки содержания гемцитабина в плазме крови при внутривенных инфузиях была подобрана группа пациентов (N=15, 9 мужчин и 6 женщин) с солидными опухолями (рак поджелудочной железы 2, рак почки 5, рак легкого 6, рак яичника 2). Больные получали гемцитабин в качестве монотерапии по стандартной схеме 1500 мг/м2 в/в в течение 30 мин.

Исследование влияния полихимиотерапии по схеме винорельбин, гемцитабин, прокарбазин, преднизолон (ViGePP) на показатели периферической крови проводили у пациентов(4 мальчика, 2 девочки) с рефрактерными и рецидивными формами лимфогранулематоза. Противорецидивная программа включала винорельбин (30 мг/ м2сут) в 1 и 8 дни, гемцитабин (1000 мг/м2 сут) в 1 и 8 дни, прокарбазин (100 мг/м 2сут) в 7 день внутрь и преднизолон (30 мг/м2) внутрь в 114 дни цикла. Возраст пациентов от 13 до 16 лет (средний возраст 14,2±1,2 лет). Число курсов химиотерапии составило 25.

Оценку безопасности применения химиотерапии по схеме: гемцитабин ( мг/м ) в 1 и 8 дни и оксалиплатин (3050 мг/м2) в 1 и 8 дни четырехнедельного цикла проводили у 5 детей (3 мальчика, 2 девочки) с солидными опухолями различной локализации. Возраст пациентов от 3 до 6 лет. Число курсов – 46.

До начала терапии состояние детей в обеих группах характеризовалось удовлетворительными показателями функционирования костного мозга (число нейтрофилов 1,5•109/л, число тромбоцитов 90•109/л). У пациентов отсутствовали признаки нарушения функционирования почек и печени (уровень креатинина 1 мл/мин наблюдали смещение пиков в область мертвого пространства. Объем вводимой пробы – 20 мкл. Продолжительность анализа не превышала 12 мин. При анализе плазмы интервал между введениями проб составлял не менее 15 мин, что обеспечивало полное элюирование длительно удерживаемых эндогенных примесей. УФ-детектирование гемцитабина и дезоксицитидина проводили при 282 и 269 нм, соответственно.

Биохимические показатели крови определяли на автоматическом биохимическом анализаторе Alcyon300 (Abbott, США). Мониторинг показателей общего анализа крови проводили на гематологическом анализаторе Cell-Dyn 3700 (Abbott, США).

Определение кинетических параметров восстановления показателей гематологической токсичности и гепатотоксичности осуществляли в компьютерной программе «Origin 6.1». Для определения константы скорости реакций первого порядка использовали полулогарифмические координаты lnC(t). Уравнение прямой вида y=a-bx (lnC=lnC0-kt) сопровождалось вычислением значений коэффициентов a и b. Это не требовало дополнительных расчетов константы скорости (k=-b). Начальную концентрацию биохимического показателя С0 (а=lnC0 при t=0) определяли графически.

Статистическую обработку результатов исследования и корреляционный анализ проводили с помощью программ «Origin 6.1», «Statistica 6» и программ пакета Microsoft Office ХР–Excel. Метрологическую характеристику методик количественного определения гемцитабина в препарате и плазме крови проводили по ФС: «Статистическая обработка результатов химического эксперимента и биологических испытаний» (ГФ XI).

1. Разработка методики количественного определения гемцитабина гидрохлорида в Метод ВЭЖХ, предлагаемый Фармакопеей США (USP) для идентификации и количественного определения гемцитабина, характеризуется особенностями, не позволяющими использовать его в экспресс-анализе непосредственно перед применением препарата в клинике. Время выполнения анализа составляет 30 мин. Для проведения градиентного элюирования требуется дополнительное дорогостоящее устройство, обеспечивающее формирование градиента концентраций.

Для качественного и количественного определения гемцитабина гидрохлорида в его лекарственной форме (ЛФ) нами был разработан более быстрый (12 мин по сравнению с 30-минутным выполнением по USP) и простой в исполнении метод изократической ВЭЖХ с использованием обращенно-фазовой колонки, заполненной модифицированным силикагелем с привитым сорбентомоктадецилсиланом Prontosil C18 (150х4,6 мм, размер частиц 5 мкм).

При подборе оптимальных условий хроматографического анализа были исследованы двухкомпонентные подвижные фазы (ПФ) разного состава.

Хроматограммы, полученные при использовании различных ПФ, оценивали по показателям: время удерживания (tR), коэффициент емкости (k), селективность (), разделение (R), асимметрия пика (As). В качестве вещества для проверки пригодности системы использовали дезоксицитидин. При использовании ПФ состава метанол-вода (20:80) гемцитабин элюировался слишком быстро, пики выходили слишком рано, попадая в область «мертвого пространства». При уменьшении содержания органического модификатора на 10 % (метанол-вода 10:90 %, об) удалось достичь улучшения удерживания на неподвижной фазе, однако разделение компонентов было неудовлетворительным.

Принимая во внимание, что ацетонитрил обладает несколько большей полярностью, чем метанол (индексы полярности Снайдера - 5,8 и 5,1 соответсвенно), при следующих испытаниях этот растворитель был выбран в качестве модификатора ПФ.

Использование ПФ состава ацетонитрил-вода (10:90 и 5:95, % об) привело к увеличению коэффициента емкости до 1,42. Однако хроматограммы, полученные с использованием этих ПФ, характеризовались низкой селективностью. Кроме того, происходило «размывание» концов пиков.

Известно, что в случае одновременного существования в системе молекулярного иона, молекулы, димера или более сложных ассоциатов целевого аналита (адсорбата) на поверхности адсорбента, его хроматографический пик уширяется (Sadek P, 2002).

Поэтому для оптимизации хроматографической методики было предложено заменить деионизированную воду на ацетатный буфер, что могло способствовать смещению равновесия в сторону ионизированных (протонированных) форм.

Действительно, реализация такого подхода позволила добиться удовлетворительной селективности и эффективности хроматографического разделения (рис.1).

Поглощение Рис. 1. Хроматограмма гемцитабина и внутреннего стандарта дезоксицитидина для подвижной фазы ацетатный буфер (рН 5,0):ацетонитрил (97,5 : 2,5, % об.) и Таким образом, в результате исследований была подобрана изократическая система ацетатный буфер (рН 5,0):ацетонитрил в объемном соотношении 97,5:2,5, которая явилась Нижний предел обнаружения гемцитабина (сигнал, превышающий тройной уровень флуктуации линии фона) составил 0,2 мкг/мл. Нижний предел количественного Содержание гемцитабина и дезоксицитидина определяли методом абсолютной калибровки по градуировочным графикам (рис.2). Для их построения использовали серию Площадь под пиком, мЕА*с Рис.2. Калибровочные графики для определения гемцитабина гидрохлорида в ЛП зависимости от содержания аналита в пробе, был рассчитан поправочный коэффициент, характеризующий различие в степени молярного поглощения определяемого вещества – гемцитабина и внутреннего стандарта – дезоксицитидина, который составил 1,28.

образцов гемцитабина гидрохлорида были рассчитаны метрологические характеристики разработанной методики (табл. 1).

Таблица 1. Метрологические характеристики методики определения гемцитабина (N=7, Р=95%) концентрация, мг/л Таким образом, разработанная методика характеризуется приемлемой относительной ошибкой среднего и не содержит систематической ошибки. Параметры количественного определения свидетельствуют о возможности применения методики для контроля качества ЛП «Гемзар».

2. Определение подлинности и содержания гемцитабина гидрохлорида в С целью повышения безопасности применения цитотоксического препарата «Гемзар» для контроля качества ЛП в клинике может быть использована разработанная методика хроматографического определения. На рис. 3 показан пример хроматограммы, полученной при анализе препарата. Подлинность действующего вещества была подтверждена по совпадению времен удерживания анализируемого и стандартного образцов. Относительное содержание гемцитабина и родственных примесей было определено по соотношению площадей хроматографических пиков. Численную оценку содержания примесей проводили относительно площади пика стандарта гемцитабина.

Поглощение Рис.3 Хроматограмма, полученная при анализе лиофилизированного порошка «Гемзар»

Для расчета количества гемцитабина гидрохлорида применяли метод внутреннего стандарта, что позволяло компенсировать небольшие отклонения параметров разделения на размер пиков. Содержание гемцитабина гидрохлорида в лекарственной форме вычисляли по формуле:

где Сst – концентрация стандартного раствора дезоксицитидина, мг/мл; AUC1 – площадь пика гемцитабина в анализируемой пробе; AUC2 – площадь пика внутреннего стандартадезоксицитидина; V – общий объём растворителей с учетом разведений, мл; m – масса препарата, мг; К – коэффициент, учитывающий различие в УФ поглощении внутреннего стандарта и анализируемого вещества (k = 1, 28); 263,20 и 299, молекулярные массы гемцитабина и гемцитабина гидрохлорида. Результаты количественного определения представлены в таблице 2.

Таблица 2. Содержание гемцитабина гидрохлорида и родственных примесей в лиофилизированном порошке для приготовления инъекционного раствора «Гемзар»

(Eli Lilly, Франция) (N=5, Р=95%) Содержание гемцитабина гидрохлорида,% Суммарное содержание примесей, %

USP XXIX/НД USP

Таким образом, препарат «Гемзар» соответствовал требованиям Фармакопеи США и НД производителя.

3. Разработка методики количественного определения гемцитабина в плазме крови Для определения концентрации гемцитабина в плазме крови осуществляли пробоподготовку, оптимизируя известные методики. Было обнаружено, что при использовании комбинации изопропанола и этилацетата значительно возрастает время выпаривания (от 20 до 60 мин). Применение в качестве экстрагента ацетонитрила без добавления метанола не позволяет достичь нужной степени очистки от примесных соединений в плазме, интерферирующих с определяемыми веществами.

Оказалось, что смесь ацетонитрилметанол (9:1) наиболее эффективно преципитирует белки и позволяет значительно сократить время упаривания образца. Для повышения эффективности извлечения активных веществ нами была успешно апробирована двукратная экстракция. Кроме того, было установлено, что на стадии пробоподготовки до введения экстрагента необходимо добавление в анализируемую пробу ледяной уксусной кислоты. Снижение рН и концентрации полярного растворителя приводит к ингибированию активности цитидиндеаминазы, что блокирует биотрансформацию 2',2'дифтородезоксицитидина до дифтордезоксиуридина, т.е.

обеспечивает стабильность определяемого вещества в пробе. Центрифугирование образца при пониженной температуре (40С) привело к снижению растворимости примесей и обеспечило чистоту пробы, вносимой в хроматограф. В процессе эксперимента нами была установлена необходимость замены природы инертной среды. Вместо жидкого азота в системе был обеспечен вакуум (остаточное давление 10 мм рт. ст.), создаваемый роторновакуумным испарителем. Это существенно упростило процедуру высушивания пробы за счет понижения температур кипения летучих растворителей.

Специфичность метода была подтверждена при анализе трех образцов плазмы, взятых у здоровых доноров (рис.4).

Поглощение, мЕА Параметр Гемцитабин Дезоксицитидин Рис.4. Образцы хроматограмм : а плазма без определяемых веществ; б плазма, полученная при добавлении гемцитабина и дезоксицитидина (модельная система) и параметры разделения.

Из сравниваемых хроматограмм образцов плазмы без и с добавлением определяемых веществ следует, что эндогенные вещества не мешают идентификации основных компонентов. Состав подвижной фазы не отличался от выбранного нами при контроле качества ЛП, условия хроматографирования также совпадали, за исключением скорости потока элюэнта (0,7 мл/мин).

Установленная линейная зависимость (r=0,9975) площади под пиком на хроматограмме от содержания гемцитабина в модельных смесях сохранялась в интервале (115) мкг/мл (рис. 5).

Рис. 5. Калибровочный график для определения гемцитабина в плазме крови.

Уравнение регрессии имело вид: у=8,51+51,59•х. Нижний предел количественного определения составил 1 мкг/мл (отношение сигнал/шум>3, RSD=8,9%).

Таблица 3. Результаты определения гемцитабина в плазме крови (N=5, Р=95%).

Разработанная методика определения гемцитабина в плазме крови может быть использована для контроля его содержания в крови с целью выбора оптимального режима дозирования препарата.

4. Терапевтический лекарственный мониторинг гемцитабина в плазме крови и оценка безопасности применения пролонгированной инфузии в терапии рака поджелудочной железы Доклинические исследования (R.Grunewald - 1990) показали, что оптимальная концентрация гемцитабина в плазме, достаточная для образования активного метаболита гемцитабина трифосфата в мононуклеарных и лейкозных клетках, должна составлять в среднем 1020 мкмоль/л (69 мкг/мл). Нами было установлено, что такая концентрация достигается в среднем через 30 мин от начала 120–минутного введения и остается на данном уровне во время инфузии и в течение 30 мин после её завершения. Через 80 мин после окончания введения гемцитабин не детектируется в плазме крови (рис.6).

фармакокинетические параметры для модифицированной инфузии:

Сmax=10,71±1,79мкг/мл, период полувыведения t1/2=16,9 мин, константа элиминации k= (0,041±0,007)мин1.

Рис. 6. Содержание гемцитабина в плазме крови при 120-минутной инфузии со скоростью введения 10 мг/ м2 в мин (N=17) и 30-минутной инфузии в дозе 1200-1500мг/м2. Заштрихованная область — интервал концентраций, соответствующих проявлению терапевтического эффекта.

При определении содержания гемцитабина в плазме пациентов, получавших препарат в виде 30-минутной инфузии в дозе 1500 мг/м2, была обнаружена значительная вариабельность результатов. Так, через 5 мин после окончания инфузии концентрация варьировала от 5,1 до 17,2 мкг/мл. Однако через 30 мин после завершения введения она составила 2,32±1,13 мкг/мл.

В нашем исследовании было показано, что длительная, 120-минутная инфузия при скорости введения 10 мг/м2 в мин позволяет избежать избыточного накопления токсичного лекарственного вещества и обеспечивает его оптимальное терапевтическое содержание в плазме крови в течение более длительного временного интервала по сравнению со стандартным режимом введения.

Переносимость и токсичность режима модифицированных инфузий гемцитабина.

Оценку безопасности пролонгированных инфузий гемцитабина осуществляли путем определения биохимических и общеклинических показателей крови у пациентов перед началом каждого курса, между введениями в пределах цикла и по завершению терапии.

В преобладающем большинстве случаев серьезные проявления токсичности режима лечения были связаны с поражением системы кроветворения. Уменьшение абсолютных количеств лейкоцитов, нейтрофилов, тромбоцитов, эритроцитов и