WWW.DISS.SELUK.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА
(Авторефераты, диссертации, методички, учебные программы, монографии)

 

На правах рукописи

ШАГИЕВА ГАЛИНА СЕРГЕЕВНА

СНИЖЕНИЕ УРОВНЯ МИТОХОНДРИАЛЬНЫХ АКТИВНЫХ ФОРМ

КИСЛОРОДА ПРИВОДИТ К ФЕНОТИПИЧЕСКОЙ НОРМАЛИЗАЦИИ

КЛЕТОК КАРЦИНОМЫ ШЕЙКИ МАТКИ ЧЕЛОВЕКА

03.03.04. – клеточная биология, цитология, гистология

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Москва – 2013

Работа выполнена на факультете биоинженерии и биоинформатики и в НИИ физико-химической биологии имени А.Н. Белозерского МГУ им.

М.В.Ломоносова

Научный руководитель: кандидат биологических наук ДУГИНА Вера Борисовна старший научный сотрудник НИИ физико-химической биологии имени А.Н. Белозерского МГУ имени М.В. Ломоносова

Научный консультант: доктор биологических наук, академик РАН, профессор СКУЛАЧЕВ Владимир Петрович директор НИИ физико-химической биологии имени А. Н. Белозерского МГУ имени М.В. Ломоносова

Официальные оппоненты: доктор биологических наук ГЛУШАНКОВА Наталия Александровна ведущий научный сотрудник ФГБУ "Российский онкологический научный центр им. Н. Н. Блохина" РАМН кандидат биологических наук ГИОЕВА Фатима Константиновна старший научный сотрудник отдела клеточной биологии Института белка РАН

Ведущая организация: ФГБУН Институт биологии развития им.Н.К. Кольцова РАН

Защита диссертации состоится «17» декабря 2013 года в 15:30 на заседании диссертационного совета Д.501.001.52. при Московском государственном университете имени М.В.Ломоносова по адресу 119899, Москва, Ленинские горы, д.1, стр.12, Биологический факультет МГУ, аудитория М-1.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке биологического факультета МГУ им. М.В.Ломоносова.

Автореферат разослан « » ноября 2013 года.

Ученый секретарь диссертационного совета, кандидат биологических наук Калистратова Е.Н.

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы. Механизмы, благодаря которым опухолевые клетки приобретают способность к миграции, на сегодняшний день изучены недостаточно. Опухолевая трансформация клеток часто связана с изменениями в организации цитоскелета, исчезновением или уменьшением клеточной адгезии и нарушением сигнальных путей, связанных с адгезией. Разрушение адгезионных межклеточных контактов у трансформированных клеток ведет к усилению пролиферации, миграции, инвазии и метастазированию.

Активные формы кислорода (АФК) влияют на процесс трансформации клеток, опухолевые клетки часто имеют повышенное содержание АФК. Поиск и изучение веществ, влияющих на содержание АФК в клетках, является важным направлением современных исследований. Митохондриально-направленные антиоксиданты (в дальнейшем мАО) являются новым классом синтетических антиоксидантов (АО), для которых характерно быстрое и обратимое накопление в митохондриях, что повышает эффективность их действия (Скулачев, 2007).

Цель работы: исследование воздействия нового класса АО митохондриальной направленности на нормальные и опухолевые кератиноциты человека в культуральных условиях.

Задачи исследования:

1) Проанализировать изменения организации цитоскелетной системы и межклеточных адгезионных структур нетрансформированных и опухолевых кератиноцитов человека под действием мАО с помощью иммунофлуоресцентной микроскопии;

2) Изучить воздействие мАО на пролиферацию нормальных и опухолевых кератиноцитов в культуре;

3) Провести количественную оценку изменения соотношения эпителиальных и мезенхимальных маркеров в клетках карциномы шейки матки под действием мАО с помощью иммуноблоттинга белков;

4) Изучить возможное влияние мАО на активацию MAP-киназных сигнальных молекул в клетках рака шейки матки.

Научная новизна и практическая значимость работы. Исследованию механизмов подвижности опухолевых клеток, их способности к инвазии и метастазированию посвящено множество научных работ. Важнейшую роль в этих процессах играет реорганизация актинового цитоскелета, межклеточных контактов, каскадов сигнальных молекул.

В настоящее время активно изучается функциональная разница изоформ актина, их роль в направленном движении клеток. Благодаря использованию уникальных специфических антител к цитоплазматическим изоформам актина впервые были исследованы изменения организации актинового цитоскелета опухолевых клеток после воздействия мАО. В данной диссертационной работе впервые были показаны различия в распределении изоформ актина в опухолевых клетках разной степени трансформации. Полученные данные указывают на различные роли цитоплазматических актинов в опухолевой прогрессии.

Актиновый цитоскелет тесно связан с межклеточными контактами.

Наряду с перестройкой актинового цитоскелета после воздействия мАО группы SkQ, мы наблюдали реорганизацию адгезионных контактов и повышение количества опухолевых супрессоров – белков адгезионных контактов, Екадгерина и -катенина. Под действием SkQ опухолевые клетки формировали эпителиальные островки, характерные для нормальных кератиноцитов.

';

Исследование линий опухолевых клеток разной степени и этиологии трансформации позволило нам сравнить изменения морфологии и сигнальных каскадов, происходящие с клетками после воздействия мАО. Были выявлены новые закономерности, характерные для неопластически трансформированных клеток в целом, а также обнаружены различия влияния мАО на клетки разной степени трансформации.

Для реализации поставленных задач нами были использованы современные методы исследования, среди которых иммунофлуоресцентная световая и конфокальная лазерная микроскопии, проточная цитофлюориметрия, иммуноблоттинг белков, измерение митохондриальных АФК с помощью лентивирусной конструкции с белковым сенсором перекиси водорода Hyper.

Важными научными вопросами является выяснение биологических функций окислительного стресса и его влияния на неопластическую трансформацию. Впервые были получены данные о том, что митохондриальные АФК воздействуют на сигнальный каскад EGFR/MEK/ERK в клетках рака шейки матки. Существует множество доказательств участия каскада ERK в патогенезе и прогрессии различных опухолей человека (Bodart et al., 2002), поэтому идет интенсивный поиск и тестирование новых ингибиторов этого каскада в качестве противоопухолевой терапии (Friday & Adjei, 2008; Roberts & Der, 2010; Wong, 2009). Согласно нашим данным, мАО подавляют активацию ERK1/2, тем самым блокируя этот сигнальный каскад.

Таким образом, нами была обнаружена фенотипическая нормализация клеток рака шейки матки при снижении уровня АФК с помощью мАО группы SkQ, а также изучен механизм действия SkQ на клеточный сигнальный каскад киназы ERK. Наше исследование имеет не только теоретическое, но и важное практическое значение. Полученные нами данные позволяют рассматривать мАО как потенциальные средства превентивной и поддерживающей противоопухолевой терапии.

Апробация результатов работы. Основные результаты работы были Международная научная конференция «Ломоносов-2008», 8-11 апреля 2008 г., Москва, Россия; 2) XVI Евроконференция по апоптозу, 6-9 сентября 2008 г., Берн, Швейцария; 3) Всероссийская конференция «Фундаментальная онкология – Петровские чтения», апрель 2009 г., Санкт-Петербург, Россия; 4) Школасеминар по проблемам организации внутриклеточного транспорта, цитоскелета и путей передачи сигнала, 16-17 ноября 2009 г., Санкт-Петербург, Россия; 5) IX Международный симпозиум «Биологическая подвижность», 11-15 мая 2010 г., Пущино, Россия; 6) Международная конференция «From Homo sapiens to Homo sapiens liberatus», 25-26 мая 2010 г., Москва, Россия; 7) I Всероссийская конференция "Внутриклеточная сигнализация, транспорт, цитоскелет", 11– октября, 2011 г., Санкт-Петербург, Россия; 8) 37-ой международный конгресс Федераций европейских биохимических сообществ, 4-9 сентября 2012 г., Севилья, Испания; а также на совместном заседании отделов биоэнергетики и математических методов в биологии НИИ физико-химической биологии им.

А.Н. Белозерского МГУ им. М.В. Ломоносова 15.12.2011 г., на заседании кафедры клеточной биологии и гистологии биологического факультета МГУ имени М.В.Ломоносова 15.11.2012 г.

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 11 печатных работ, из них статей в журналах, соответствующих перечню ВАК РФ – 3, тезисов докладов и материалов конференций - 8.

Структура и объем работы. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов, результатов, обсуждения, заключения, машинописного текста, содержит 32 рисунка, 1 таблицу. Список литературы включает 243 источника, из которых 15 – на русском языке, 228 – на иностранном языке.

ОСНОВНОЕ СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Клеточные линии и питательные среды для роста клеток. Были иммортализованные in vitro кератиноциты из гистологически нормального эпителия человека; культуры клеток рака шейки матки - C-33A (ATCC #HTBSiHa (ATCC #HTB-35), Caski (ATCC #CRL-1550). Клетки культивировали на среде DMEM («ПанЭко», Россия) c добавлением 5% эмбриональной стрептомицина (по 100 ед/мл, «ПанЭко») и глутамина (5мМ, «ПанЭко») при 37°С в увлажненной атмосфере 5%-ного СО2.

Реактивы и специфические агенты. В ходе работы использовались мАО SkQ и его аналоги (10-40нМ, «Митотехнологии», Россия); АО NAC (1мM, N-acetyl-LSigma», США); разобщитель cysteine, FCCP (carbonyl cyanide ptrifluoromethoxyphenylhydrazone, 0,5М, «Sigma», США); эпидермальный фактор роста (ЭФР, 5–10 нМ, «Chemicon», США); высокоселективный ингибитор киназ MEK1/2, U0126 (2-10мкМ, «Cell Signalling», США).

Для иммунофлуоресцентной микроскопии и иммуноблоттинга белков использовали следующие мышиные моноклональные антитела: к -актину (клон 4С2, IgG1), -актину (клон 2А3, IgG2b; Dugina et al., 2009); Е-кадгерину, Nкадгерину («BD Transduction Laboratories», США), виментину (DAKO, США); тубулину («Sigma», США); крысиные моноклональные антитела к Snail («Cell Signalling», США); кроличьи поликлональные антитела к ERK1/2 (p42/44), pERK1/2 (p-p42/44) («Cell signalling», США), рецептору к эпидермальному фактору роста, РЭФР (EGFR), ф-РЭФР (p-EGFR) («Cell Signalling», США). В качестве вторых антител для иммунофлуоресценции использовали козьи флуоресцеин- и родамин-конъюгированные антитела к иммуноглобулинам IgG2a, IgG2b и IgG1 мыши («Southern Biotechnology», США), козьи Alexa-488конъюгированные антитела к иммуноглобулинам крысы («Molecular probes», США), ядра выявляли с помощью DAPI («Sigma», США). Для иммуноблоттинга белков вторыми антителами, связанными с пероксидазой хрена, служили козьи антитела к иммуноглобулинам IgG мыши и кролика («Sigma», США).

Содержание АФК в клетке изучалось с помощью H2DCF-DA (диацетиловый эфир 5'-6'-хлорметил-2',7'-дихлордигидро-флуоресцеина, «Invitrogen», США).

Иммунофлуоресцентная и лазерная сканирующая конфокальная микроскопия. Для иммунофлуоресцентного окрашивания клетки культивировали на покровных стеклах, фиксировали мин параформальдегидом, затем подвергали их экстракции–фиксации холодным метанолом при –20° в течение 5 мин для последующей окраски антителами.

Иммунофлуоресцентное исследование проводили с помощью микроскопа Axioplan (объективы Plan-Neofluar 40х/0.75 и 100x/1.3, «Carl Zeiss», Германия), лазерного сканирующего конфокального микроскопа LSM510 (аргоновый (исходящая длина волны 488 nm) и гелий-неоновый (543nm) лазеры, объектив Plan-Neofluar 63x/1.4, «Carl Zeiss», Германия). Обработка изображений производилась при помощи программ LSM5 Image Examiner и Adobe Photoshop.

Электрофорез и иммуноблоттинг белков проводили по стандартным методикам (Шагиева и др., 2012). Полученные пленки сканировали и проводили http://rsb.info.nih.gov/ij/) с использованием -тубулина для нормализации.

Измерение продукции АФК методом проточной цитофлуориметрии. Для изучения содержания АФК клетки инкубировали с раствором H2DCF-DA в концентрации 1,8 мкМ в культуральной среде в течение 10 минут в темноте при 37°С. Флуоресценцию анализировали с помощью проточного цитофлуориметра Beckman Coulter Cytomics FC500. Для измерения митохондриальной продукции последовательность, кодирующую сигнальный пептид импорта в митохондрии молекулярной биологии им. В. А. Энгельгардта РАН). Для экспериментов использовали линию клеток SiHa, стабильно экспрессирующих направленный в интенсивности флуоресценции проводили с помощью микроскопа Axioplan (объектив Plan-Neofluar 100х/1.3) и программы ImageJ 1,37C.

Подсчет количества клеток при изучении пролиферативных характеристик клеточных культур производился на единицу площади культурального матраса на сроках инкубации от 5 часов до 5 суток при помощи микроскопа Axioplan (объектив Plan-Neofluar 20х/0.50).

Статистический анализ. Данные представлены как среднее значение ± стандартная ошибка среднего по результатам как минимум трех независимых экспериментов. Для проверки статистических гипотез был использован t-тест Стьюдента, значения p < 0,001 (***), p < 0,01 (**) и p < 0,05 (*) считались статистически достоверными.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

1. Организация актиновых микрофиламентов в нормальных и опухолевых кератиноцитах. Влияние мАО на распределение изоформ актина. Из всех рассмотренных культур иммортализованные кератиноциты культуры HaCaT наиболее близки по организации к нормальным эпителиальным клеткам. В цитоплазме клеток HaCaT выявляется хорошо развитая система пучков актиновых микрофиламентов. После инкубации с SkQ1 (40 нМ, 7 сут.) кольцевые пучки -актина на периферии островков становятся немного толще, радиальная система -актина в зоне межклеточных контактов выявляется лучше.

Густая сеть -актина в клетках HaCaT после инкубации с мАО не меняется.

В неопластически трансформированных клетках, в основном, выявляется диффузный -актин и лишь небольшая часть -актиновых микрофиламентов организована в тонкие короткие ненаправленные фибриллы. По периметру клеток видны ламеллярные участки с повышенным окрашиванием -актина в раффлах (рис.1). Во всех культурах наблюдается интенсивное окрашивание густой кортикальной и ламеллярной сети -актиновых филаментов. В результате инкубации клеток SiHa, Caski и C33A с мАО в течение 4 - 7 суток пучки актина становятся толще. В клетках выявляется система тангенциальных и радиальных пучков -актина (рис.1). Распределение -актина в неопластически трансформированных клетках после инкубации с мАО не меняется. Схожие изменения организации цитоскелета под действием мАО в вирус-содержащих (SiHa и Caski) и безвирусной (С33А) культурах, позволили сделать вывод о том, что механизм действия мАО не затрагивает белки вируса папилломы человека (ВПЧ).

Изменения экспрессии цитоплазматических изоформ актина в зависимости от степени трансформации клеток показаны на рис.2. Наблюдается увеличение экспрессии -актина и достоверное снижение экспрессии -актина в более трансформированных клетках SiHa, по сравнению с клетками HaCaT.

В нашей работе (Шагиева и др., 2012) было показано снижение количества -актина при усилении трансформации клеток при помощи ЭФР in vitro и в опухолевых клетках гистологических срезов цервикальных интраэпителиальных неоплазий по сравнению с клетками нормального экзоцервикса.





Похожие работы:

«ГИЛЬМЕТДИНОВ БУЛАТ МИННЕКАСИМОВИЧ ФАРМАКО-ТОКСИКОЛОГИЧЕСКАЯ ОЦЕНКА ПРОИЗВОДНЫХ ДИКАРБОНОВЫХ КИСЛОТ 16.00.04 - ветеринарная фармакология с токсикологией АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук КАЗАНЬ-2003 Работа выполнена на кафедрах неорганической и аналитической химии, внутренних болезней животных и в учебно-опытном хозяйстве Казанской государственной академии ветеринарной медицины имени Н.Э.Баумана. заслуженный деятель науки...»

«Малыгина Наталья Сергеевна РЕКОНСТРУКЦИЯ ЗАГРЯЗНЕНИЯ АТМОСФЕРЫ АЛТАЯ ПО ЛЕДОВОМУ КЕРНУ СЕДЛОВИНЫ Г. БЕЛУХА 25.00.31 – гляциология и криология Земли АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата географических наук Москва – 2009 Работа выполнена в Учреждении Российской академии наук Институте водных и экологических проблем Сибирского отделения РАН Научные руководители: Доктор географических наук, профессор Винокуров Юрий Иванович Доктор химических наук Папина...»

«Ребров Алексей Владимирович ВЛИЯНИЕ СТРУКТУРЫ МОТИВАЦИИ РАБОТНИКОВ СОВРЕМЕННЫХ РОССИЙСКИХ ОРГАНИЗАЦИЙ НА РЕЗУЛЬТАТИВНОСТЬ ИХ ТРУДА Специальность 22.00.08 – Социология управления Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата социологических наук МОСКВА – 2009 Работа выполнена на кафедре управления человеческими ресурсами Государственного университета – Высшей школы экономики Научный руководитель доктор социологических наук, профессор Герчиков Владимир Исакович...»

«ЗЕНОВ Андрей Юрьевич АЛГОРИТМЫ ОБНАРУЖЕНИЯ И ОБРАБОТКИ ИНФОРМАЦИИ НА ОСНОВЕ ЭКСТРЕМАЛЬНОЙ ФИЛЬТРАЦИИ В СИСТЕМАХ ПЕРИМЕТРОВОЙ ОХРАНЫ Специальность 05.13.01 – Системный анализ, управление и обработка информации (в технике и технологиях) Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата технических наук ПЕНЗА 2013 1 Работа выполнена в Федеральном государственном бюджетном образовательном учреждении высшего профессионального образования Пензенский государственный...»

«Никитина Лариса Николаевна МЕЖДОЛИННОЕ РАССЕЯНИЕ ЭЛЕКТРОНОВ НА ФОНОНАХ В СВЕРХРЕШЕТКАХ (GaAs)m(AlAs)n специальность 01.04.10 – физика полупроводников АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата физико-математических наук Томск – 2011 Работа выполнена на кафедре физики полупроводников Государственного образовательного учреждения высшего профессионального образования Томский государственный университет и на кафедре теоретической и экспериментальной физики...»

«ГИОЕВА ЗАРИНА АНАТОЛЬЕВНА ИДЕЙНО-НРАВСТВЕННЫЕ ПРОБЛЕМЫ РОМАНА Д.МАМСУРОВА ПОЭМА О ГЕРОЯХ Специальность 10.01.02. – литература народов Российской Федерации (осетинская литература) АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата филологических наук Владикавказ, 2010 Работа выполнена на кафедре осетинского литературного творчества государственного образовательного учреждения высшего профессионального образования Северо-Осетинский государственный университет имени...»

«Резвых Ирина Геннадьевна УРОК ПОГРУЖЕНИЯ КАК ЗДОРОВЬЕСБЕРЕГАЮЩАЯ ФОРМА ОРГАНИЗАЦИИ ОБУЧЕНИЯ В БАЗОВОЙ ПРОФЕССИОНАЛЬНОЙ ШКОЛЕ Специальность 13.00.01 общая педагогика, история педагогики и образования АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата педагогических наук Казань - 2003 Работа выполнена в лаборатории методологии и теории среднего профессионального образования Института среднего профессионального образования Российской академии образования Научный...»

«УДК 517.54 Низамиева Лилия Юнисовна Внутренние и внешние смешанные обратные краевые задачи по параметру x 01.01.01 вещественный, комплексный и функциональный анализ АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата физико-математических наук Казань – 2011 Работа выполнена на кафедре математического анализа ФГАОУ ВПО Казанский (Приволжский) федеральный университет Научный руководитель доктор физико-математических наук, профессор Насыров Семен Рафаилович Официальные...»

«УДК 621.18:621.039 СОТСКОВ ВЛАДИМИР ВЛАДИМИРОВИЧ РАЗРАБОТКА И ИССЛЕДОВАНИЕ МОДЕРНИЗИРОВАННОЙ КОНСТРУКЦИИ СЕПАРАЦИОННЫХ УСТРОЙСТВ ПАРОГЕНЕРАТОРА ДЛЯ АЭС ПОВЫШЕННОЙ МОЩНОСТИ Специальность: 05.14.03 – Ядерные энергетические установки, включая проектирование, эксплуатацию и вывод из эксплуатации АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата технических наук Подольск – 2010 Работа выполнена в открытом акционерном обществе Ордена Трудового Красного Знамени и ордена...»

«Замахаев Сергей Александрович Методологические, организационно-правовые аспекты реорганизации государственных и муниципальных учреждений здравоохранения бюджетной сферы (социально-гигиеническое исследование) 14.00.33. – Общественное здоровье и здравоохранение АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Москва – 2006 г. Работа выполнена на базе Федерального Государственного Учреждения Центральный научно-исследовательский институт организации...»

«ТОЛКАЧЕВ Константин Сергеевич ПОСТРЕЗЕКЦИОННЫЙ HELICOBACTER PYLORI-АССОЦИИРОВАННЫЙ ГАСТРИТ. ДИАГНОСТИКА И ТАКТИКА ЛЕЧЕНИЯ 14.01.17 – хирургия АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Иркутск – 2010 Работа выполнена в ГОУ ВПО Иркутский государственный медицинский университет Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию Российской Федерации на базе клиники и кафедры факультетской хирургии. Научный руководитель : доктор...»

«Маджара Тарас Игоревич ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНАЯ СИСТЕМА ДЛЯ РЕШЕНИЯ ЗАДАЧ ОПТИМАЛЬНОГО УПРАВЛЕНИЯ С ВЫЧИСЛИТЕЛЬНЫМИ ОСОБЕННОСТЯМИ 05.13.01 – Системный анализ, управление и обработка информации АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата технических наук Владивосток 2011 Работа выполнена в лаборатории оптимального управления Института динамики систем и теории управления Сибирского отделения РАН (ИДСТУ СО РАН). Научный руководитель : доктор технических наук Горнов...»

«КОЧЕРГИН Сергей Валерьевич РАЗРАБОТКА И ОБОСНОВАНИЕ ПАРАМЕТРОВ УСТРОЙСТВА ЭЛЕКТРОПОДОГРЕВА МОТОРНОГО МАСЛА С САМОРЕГУЛИРОВАНИЕМ МОЩНОСТИ В ДВИГАТЕЛЯХ ВНУТРЕННЕГО СГОРАНИЯ Специальность 05.20.03 – Технологии и средства технического обслуживания в сельском хозяйстве Специальность 05.20.02 – Электротехнологии и электрооборудование в сельском хозяйстве АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата технических наук Тамбов Работа выполнена в государственном научном...»

«Андрианова Дарья Витальевна УСТОЙЧИВЫЕ ПАРНЫЕ СОЧЕТАНИЯ В ЧЕШСКОМ И РУССКОМ ЯЗЫКАХ (лингвистический анализ) Специальность 10.02.03 – Славянские языки Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата филологических наук Санкт-Петербург 2013 2 Работа выполнена на кафедре славянской филологии филологического факультета ФГБОУ ВПО Санкт-Петербургский государственный университет Научный руководитель : доктор...»

«ШЕВЕРНИЦКАЯ ОЛЬГА НИКОЛАЕВНА РАЗРАБОТКА ТЕХНОЛОГИИ КОМБИНИРОВАННОГО ПОРОШКОВОГО ПРОДУКТА НА ОСНОВЕ ПЕКТИНОСОДЕРЖАЩЕГО СЫРЬЯ Специальность: 05.18.01 Технология обработки, хранения и переработки злаковых, бобовых культур, крупяных продуктов, плодоовощной продукции и виноградарства АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата технических наук Москва – 2010 Диссертационная работа выполнена на кафедре Технология продуктов функционального и специализированного...»

«Малахов Павел Сергеевич ИМУЩЕСТВЕННЫЕ ПРАВА И ОБЯЗАННОСТИ КАК ОБЪЕКТЫ СДЕЛОК В БАНКОВСКОЙ СФЕРЕ 12.00.03 – гражданское право; предпринимательское право; семейное право; международное частное право Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата юридических наук Томск – 2007 2 Работа выполнена на кафедре гражданского права Юридического института ГОУ ВПО Томский государственный университет Научный руководитель : кандидат юридических наук, доцент Титов Николай...»

«КРАВЦОВА Юлия Анатольевна ОРГАНИЗАЦИОННО-КУЛЬТУРНАЯ АДАПТАЦИЯ МОЛОДЫХ СОТРУДНИКОВ К СЛУЖБЕ В ОРГАНАХ ВНУТРЕННИХ ДЕЛ Специальность: 19.00.05 — социальная психология АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата психологических наук Ярославль 2012 Работа выполнена на кафедре консультационной психологии федерального государственного бюджетного образовательного учреждения высшего профессионального образования Ярославский государственный университет им. П.Г....»

«Бочаров Сергей Николаевич ТЕМПЕРАТУРНЫЕ АНОМАЛИИ РОСТА КРИСТАЛЛОВ: КИНЕТИКА, МОРФОЛОГИЯ, ХИМИЧЕСКИЙ СОСТАВ Специальность 25.00.05 - минералогия, кристаллография Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата геолого-минералогических наук Санкт-Петербург 2008 Работа выполнена на кафедре кристаллографии геологического факультета Санкт-Петербургского государственного университета Научный руководитель : доктор...»

«ЛЕКСУТОВ ИЛЬЯ СЕРГЕЕВИЧ РАЗРАБОТКА СИСТЕМЫ АВТОМАТИЗАЦИИ МОДЕЛИРОВАНИЯ ПРОЦЕССОВ ХОЛОДНОЙ ОБЪЕМНОЙ ШТАМПОВКИ Специальность 05.13.12 – Системы автоматизации проектирования (промышленность) АВТОРЕФЕРАТ Диссертации на соискание ученой степени кандидата технических наук Омск – 2009 Работа выполнена в государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования Сибирская государственная автомобильно-дорожная академия (СибАДИ) Научный руководитель доктор...»

«Сазонов Петр Андреевич ЭКОНОМИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ ИНВЕСТИЦИОННОГО ОБЕСПЕЧЕНИЯ КАПИТАЛЬНОГО РЕМОНТА МНОГОКВАРТИРНЫХ ДОМОВ Специальность 08.00.12 Бухгалтерский учет, статистика Автореферат диссертации на соискание учёной степени кандидата экономических наук Нижний Новгород – 2014 1 Работа выполнена в Федеральном государственном бюджетном образовательном учреждении высшего профессионального образования Нижегородский государственный архитектурностроительный университет Научный...»






 
2014 www.av.disus.ru - «Бесплатная электронная библиотека - Авторефераты, Диссертации, Монографии, Программы»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.